| 假单胞菌生物合成L-半胱氨酸途径中脱巯基酶的研究 |
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| 作者姓名： | 余养盛 李洋 金永杰 白钢 杨文博 |
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| 作者单位： | 南开大学生命科学学院,天津,300071 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（No.30470053）天津市重点基金资助项目（No.05YFJZJC00900） |
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| 摘 要： | 通过PCR方法扩增得到假单胞菌TS1138L-半胱氨酸脱巯基酶基因（cd）,将其克隆至pBlueseript SKII载体,测定了含有L-半胱氨酸脱巯基酶基因的1．2kbDNA片段序列,并与其它菌株的脱巯基酶基因进行了同源性比较;同时,将其克隆至表达载体pET-21a（＋）,IPTG诱导表达,表达产物经Ni-NTA柱亲合层析后,得到纯化的重组蛋白。利用脱巯基酶的活性染色方法对重组表达的L-半胱氨酸脱巯基酶进行了鉴定,并探讨了L-半胱氨酸脱巯基酶的酶学性质,以及在生物转化合成L-半胱氨酸途径中的关键作用。
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| 关 键 词： | L-半胱氨酸脱巯基酶 假单胞菌 基因克隆 基因表达 酶学性质 |
| 文章编号： | 0253-2654（2006）04-0021-06 |
| 收稿时间： | 2005-09-28 |
| 修稿时间： | 2005-12-09 |
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