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大肠杆菌原核增强子样序列的克隆及其结构与功能的研究
作者姓名:朱民吴淑华  秘晓林薛水星 韩峰
作者单位:中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室,北京,100052
基金项目:国家高技术研究发展计划项目。
摘    要:利用氯霉素乙酰转移酶(cat)以及β-半乳糖苷酶(lacZ)基因作为报告基因,从大肠杆菌MC1061株染色体基因组中克隆到3个原核增强子样序列——MC2,MC8,MC9,这3个片段均具有正反向增强活性,对β-半乳糖苷酶基因的增强活性(正向)在2~5.5倍之间。采用体内转录,RNA Dot blot杂交的方法对MC8的功能进行了研究,结果表明,MC8片段对于基因表达的调控发生在转录水平上。用核酸外切酶III末端缺失的方法对MC8的功能区进行了定位。结果显示,MC8的功能区位于距其正向克隆5′端450~950bp长约500bp的区段内。在450~600bp以及840~950bp区段内至少分别含有一个功能位点。序列分析的结果表明,MC8功能区有3个AT丰富区,其中2个分别位于450~600bp以及840~950bp区段内。

关 键 词:大肠杆菌  原核增强子样序列
文章编号:1000-3061(2000)01-0027-04
修稿时间:1998-09-21
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