以家蚕核型多角体病毒为载体高效表达天花粉蛋白基因 |
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引用本文: | 储瑞银,林玉莲,潘乃穟,陈章良.以家蚕核型多角体病毒为载体高效表达天花粉蛋白基因[J].中国生物工程杂志,1994,14(2):44-48. |
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作者姓名: | 储瑞银 林玉莲 潘乃穟 陈章良 |
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作者单位: | 北京大学生物学系蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室 北京 100817 |
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摘 要: | 本文报道以家蚕核型多角体病毒为载体,在家蚕体内高效表达天花粉蛋白基因的结果。天花粉蛋白基因是用PCR技术从栝楼基因组中分离的,该基因被插入到家蚕核型多角体病毒转移载体质粒pBm-1的多角体蛋白基因启动子下游,构建成重组质粒pBmTCS。将重组质粒DNA和野生型BmNPVDNA共转染家蚕培养细胞,通过在家蚕培养细胞中进行同源重组和筛选,获得了无多角体的重组病毒BmTCS。采用PCR技术对重组病毒进行了鉴定,证实重组病毒合天花粉蛋白基因。重组病毒对家蚕的感染性不及野生病毒,提示表达产物对病毒的增殖有抑制作用。对重组病毒感染的家蚕血淋巴进行了SDS-PAGE和免疫印迹分析,结果显示在蚕体血淋巴中的表达产物天花粉蛋白占总蛋白的5%。本实验为利用基因工程方法大量生产天花粉蛋白提供了又一条新的途径。
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关 键 词: | 天化粉蛋白 家蚕 核型多角体病毒 基因表达 |
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