| 超声破裂载基因微泡增强心肌细胞报告基因的转染与表达 |
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| 作者姓名： | Wang GZ Hu SJ Zheng ZL Sun J Li J Zheng X Zhu ZH Yao YM |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学医学院附属第一医院心内科,杭州,310003
2. 浙江大学医学院附属第一医院超声影像科,杭州,310003 |
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| 摘 要： | 目的:通过超声破裂载基因微泡介导报告基因心肌细胞转染,探讨其能否增强心肌细胞外源基因转染与表达.方法:以β-galactosidase质粒为报告基因,将其与自制氟碳气体微泡粘附,制备载基因微泡.利用诊断性超声破裂微泡进行体外心肌细胞基因转染;以磷酸钙共沉淀转染为阳性对照并将其以不同方式与超声破裂微泡技术联合应用,以期进一步增强基因转染效果.分别采用原位染色及酶学定量检测β-galactosidase表达水平,同时进行细胞活性检测.结果:超声破裂载基因氟碳气体微泡(PESDA)转染组心肌细胞β-galactosidase表达水平可达单纯质粒转染组60倍(P＜0.01).磷酸钙共沉淀转染3.67倍(P＜0.01)超声强度、微泡浓度对超声破裂介导基因转染效果有明显影响.超声破裂微泡技术与磷酸钙共沉淀联合应用可进一步提高报告基因的表达(P＜0.05),即使在磷酸钙转染后6 h,超声破裂微泡仍能明显增强报告的基因的表达(P＜0 05).结论:超声破裂微泡技术是一种高效基因转染方法,其不但能增加DNA转染,而且增强入胞后基因的表达.超声破裂微泡与其它基因转染技术联合应用能进一步增加基因转染效率.
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| 关 键 词： | 超声 造影剂 基因 心肌细胞 |
| 文章编号： | 1000-6834（2005）04-0371-05 |
| 收稿时间： | 2004-04-26 |
| 修稿时间： | 2004-04-262005-07-06 |
Enhanced reporter gene transfer and expression in cardiac myocytes mediated by ultrasonic destruction of the microbubbles |
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| Wang GZ,Hu SJ,Zheng ZL,Sun J,Li J,Zheng X,Zhu ZH,Yao YM.Enhanced reporter gene transfer and expression in cardiac myocytes mediated by ultrasonic destruction of the microbubbles[J].Chinese Journal of Applied Physiology,2005,21(4):371-375,i0009. |
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| Authors: | Wang Guo-Zhong Hu Shen-Jiang Zheng Zhe-Lan Sun Jian Li Jiang Zheng Xia Zhu Zhao-Hui Yao Yu-Mei |
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| Institution: | Department of Cardiology, First Affiliated Hospital of Zheiiang University Medical School, Hangzhou 310031, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ultrasound microbubbles gene transfer cardiac myocytes |
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