多重定量PCR检测PDX模型小鼠细胞浸润比例的构建

摘要 目的：建立一种快速、灵敏的方法检测人源异种移植模型(Patient-Derived tumor Xenograft，PDX)中小鼠细胞的浸润比例，以确保PDX模型的保真性。方法：选择人和小鼠的特异性基因PSMB2、Ren 2的部分区段设计引物和探针，利用多重荧光定量PCR（TaqMan探针法）在单管中检测PDX模型中小鼠-人细胞的相对量。另外，构建了不同浸润比例的标准品作为阳性对照，根据标准曲线进行样本比例计算。结果：建立了一种多重荧光定量PCR检测PDX模型小鼠细胞浸润比例的检测方案，该方案显示，PDX模型中不同比例的人鼠混合样本与△Ct值（Ct（小鼠）-Ct（人））之间线性关系良好，相关系数r²为0.9998。利用该方法对14个样本进行检测，结果表明在绝大部分样本中小鼠细胞的比例低于30.00%，平均小鼠细胞比例为13.38%。结论：本研究建立的多重定量PCR检测PDX模型中小鼠细胞浸润比例的方法能够根据△Ct值快速、准确推断PDX模型中人、小鼠细胞的比例。该方法操作简单、耗时短、结果可靠，是一种快速、灵敏的PDX模型的质控方案。

Detection of the Proportion of Mouse Cell Infiltration in PDX Model by Multiplex Quantitative PCR