| 人β_2m转基因小鼠的制备及鉴定(英文) |
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| 引用本文： | 陈占昆,吕厚山,艾京,蒋东芳,丁海明,王东,冯传汉,王申五.人β_2m转基因小鼠的制备及鉴定(英文)[J].中国生物化学与分子生物学报,2001,17(6). |
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| 作者姓名： | 陈占昆 吕厚山 艾京 蒋东芳 丁海明 王东 冯传汉 王申五 |
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| 作者单位： | 1. 北京大学人民医院,关节病研究所,
2. 北京大学人民医院,中心实验室, |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No .394786 94)~~ |
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| 摘 要： | 制备人 β2m转基因小鼠 ,研究HLA B2 70 4基因的表达 .应用显微注射将人 β2m基因注入C5 7BL 6×昆明鼠和昆明鼠×昆明鼠F1代受精卵 .出生动物及其后代经PCR筛选 ,采用斑点杂交和Southern杂交对阳性鼠基因组DNA标本进行进一步鉴定和测定整合拷贝数 ,利用RT PCR检测阳性鼠中人 β2m转基因的表达 .6只原代仔鼠及 7只它们的下一代鼠 (F1)带有人 β2m基因 .由微注射基因后移卵出生的 86只小鼠中 ,C5 7BL 6×昆明鼠杂交仔鼠 35只 ,其中 4只阳性 (11 4 % ) ,昆明鼠×昆明鼠杂交仔鼠 5 1只 ,其中 2只阳性 (3 9% ) ,含有人 β2m基因的原代鼠×昆明鼠杂交仔鼠 2 0只 ,其中 7只阳性 .整合的转基因均为单拷贝 .Southern杂交证实上述阳性鼠确有转基因整合 .阳性鼠的皮肤、结肠、睾丸和脾脏组织中均有人β2m转基因mRNA的表达 .在转基因动物制备中 ,C5 7BL 6×昆明鼠F1代明显优于昆明鼠×昆明鼠F1代 .与人HLA B2 70 4基因相比 ,人 β2m基因不易整合 ,其整合率与整合拷贝数均较低 .得到的人 β2m转基因小鼠能够将人 β2m基困传给下一代 ,并可与人HLA B2 70 4转基因鼠交配 ,研究它的致病性
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| 关 键 词： | 微注射 转基因 人β2m基因 小鼠 制备与鉴定 |
Production and Characterization of Human Microglobulin Transgenic Mice |
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