肌注神经生长因子及血小板衍生生长因子对胫骨干闭合骨折大鼠早期骨愈合的影响及机制探究

摘要 目的：探讨肌肉注射神经生长因子（NGF）和血小板衍生生长因子（PDGF）对胫骨干闭合骨折大鼠早期骨愈合的效果及潜在机制。方法：采用随机数字表法将80只健康成年雄性SD大鼠分为模型组、NGF组、PDGF组和NGF+PDGF组，各20只。建立胫骨干闭合骨折模型后，给予NGF组大鼠肌注0.8 μg NGF；给予PDGF组大鼠肌注0.8 μg PDGF，给予NGF+PDGF组大鼠肌注0.8 μg NGF和0.8 μg PDGF；给予模型组大鼠肌注等体积生理盐水。分别在治疗第2周（T0）、第4周（T1）、第6周（T2）通过X线检查计算骨痂体积，采用酶联免疫吸附法检测血清中碱性磷酸酶（AKP）水平。颈椎脱臼法处死大鼠后采用苏木精-伊红（HE）染色观察胫骨骨折端病理学改变，采用实时荧光定量PCR法检测骨痂组织骨形态发生蛋白2（BMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）和胰岛素样生长因子-1（IGF-1）mRNA相对表达水平。结果：NGF+PDGF组大鼠在T1时骨折断端愈合，骨痂体积大于其他三组；NGF组、PDGF组大鼠在T2时骨折断端愈合，骨痂体积大小均大于模型组（P<0.05）。模型组大鼠T2时骨折断端尚未完全愈合，骨痂体积显著大于其他三组（P<0.05）。NGF+PDGF组大鼠T0~T1时血清AKP水平均显著高于其他三组，NGF组和PDGF组大鼠血清AKP水平显著高于模型组（P<0.05）。T2时4组大鼠血清AKP水平比较无显著差异（P>0.05）。T1时，NGF组、PDGF组和NGF+PDGF组大鼠均可见骨小梁形态更加粗大、致密，呈栅栏状排列，骨小梁间的间隙变小，NGF+PDGF组大鼠骨断裂处被新生骨填满，NGF组、PDGF组骨断裂处仍有少量间隙。T1时NGF+PDGF组大鼠BMP2、VEGF和IGF-1相对表达水平均显著高于其他三组（P<0.05），NGF组和PDGF组大鼠各指标mRNA相对表达水平比较无显著差异（P>0.05），但均显著高于模型组（P<0.05）。T2时各组大鼠骨痂组织中BMP2、VEGF和IGF-1 mRNA相对表达水平比较无显著差异（P>0.05）。结论：NGF和PDGF对胫骨干闭合骨折大鼠早期骨愈合有协同促进作用，可能与促进BMP2、VEGF和IGF-1表达上调有关。

Effect of Intramuscular Injection of Nerve Growth Factor and Platelet-derived Growth Factor on Early Bone Healing in Rats with Closed Tibial Shaft Fracture and Its Mechanism