| RT-LAMP快速检测Norwalk病毒GⅡ型 |
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| 引用本文： | 宋克云,张如胜,欧新华,苏良,杨秋林. RT-LAMP快速检测Norwalk病毒GⅡ型[J]. 病毒学报, 2009, 25(4): 291-295 |
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| 作者姓名： | 宋克云 张如胜 欧新华 苏良 杨秋林 |
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| 作者单位： | 长沙市疾病预防控制中心,微生物检验科,湖南,长沙,410001;南华大学,医学院寄生虫学教研室,湖南,衡阳,421001 |
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| 摘 要： | 建立一种检测Norwalk病毒GⅡ型快速、敏感的一步逆转录环介导等温扩增(Reverse transcription-loop-me-diated isothermal amplification,RT-LAMP)方法。针对Norwalk病毒RNA聚合酶基因特异性序列的6个区域设计4条LAMP引物,65℃保温约120 min,完成对Norwalk病毒GⅡ的扩增,扩增产物通过肉眼观察、SYBR GreenI染色、凝胶电泳及酶切消化进行鉴定。利用RT-LAMP和RT-PCR方法同时检测48份Norwalk病毒GⅡ粪便标本和12份A组轮状病毒标本来验证RT-LAMP方法的特异性;将Norwalk病毒GⅡ RNA一系列稀释后用RT-LAMP和RT-PCR方法进行检测来比较两者敏感性。46份Norwalk病毒GⅡ粪便标本出现LAMP扩增反应:通过肉眼观察、SYBR Green Ⅰ染色和凝胶电泳均能观察到LAMP扩增产物的存在,LAMP产物的特异性通过酶切消化加以证实;2份Norwalk病毒GⅡ粪便标本和12份A组轮状病毒标本未出现RT-LAMP扩增。RT-LAMP与RT-PCR特异性符合率为100%,RT-LAMP和R...
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| 关 键 词： | 逆转录环介导等温扩增 Norwalk病毒GⅡ RNA聚合酶 检测 |
Rapid Detection of Norwalk GII with Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification |
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| SONG Ke-yun,ZHANG Ru-sheng,OU Xin-hua,SU-liang,YANG Qiu-lin. Rapid Detection of Norwalk GII with Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification[J]. Chinese journal of virology, 2009, 25(4): 291-295 |
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| Authors: | SONG Ke-yun ZHANG Ru-sheng OU Xin-hua SU-liang YANG Qiu-lin |
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| Affiliation: | 1.Center for Disease control and Prevention of Chang Sha;Changsha 410001;China;2.Department of Parasitology;Medical College;Nanhua University;Hengyang 421001;China |
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