| 高粱抗丝黑穗病SSR-PCR反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 牛楠,陆丹,李玥莹. 高粱抗丝黑穗病SSR-PCR反应体系的优化[J]. 生物技术, 2010, 20(1): 42-44 |
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| 作者姓名： | 牛楠 陆丹 李玥莹 |
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| 作者单位： | 沈阳师范大学,化学与生命科学学院,辽宁,沈阳,110034 |
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| 基金项目： | 辽宁省教育厅重点实验室资助项目，沈阳市科技局国际合作项目，辽宁省自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 目的:找到一种可用于高粱抗丝黑穗病SSR-PCR扩增最适宜的反应体系。方法:利用单因素体系优化的方法,对SSR-PCR反应体系中Taq酶、dNTPs、MgCl2、模板DNA以及引物用量进行了优化,并且用不同引物、不同模板DNA对该优化结果进行验证。结果:实验表明,Taq酶、dNTPs、MgCl2、模板DNA以及引物的不同用量均对PCR反应结果有显著的影响。最适宜高粱抗丝黑穗病20μl SSR-PCR的反应体系为1U/μl Taq酶2.5μl,10mmol/L dNTPs 1.0μl,25mmol/L MgCl21.5μl,模版DNA2.0μl(50ng),10μmol/L引物1.5μl,10×Buffer 2.0μl。验证结果表明,该体系扩增出的条带清晰且稳定。结论:该结果为今后利用SSR-PCR标记技术研究分析高粱抗丝黑穗病奠定了基础。
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| 关 键 词： | 高粱 抗丝黑穗病 SSR—PCR 体系优化 |
Optimization of SSR-PCR System on Sorghum Resistance to Head Smut |
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| NIU Nan,LU Dan,LI Yue-ying. Optimization of SSR-PCR System on Sorghum Resistance to Head Smut[J]. Biotechnology, 2010, 20(1): 42-44 |
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| Authors: | NIU Nan LU Dan LI Yue-ying |
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| Affiliation: | NIU Nan,LU Dan,LI Yue-ying(Shenyang Normal University,College of Chemistry , Life Science,Shenyang110034,China) |
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| Abstract: | Objective: To find a conformable SSR-PCR reaction system of Sorghum Head Smut.Method: In this study,SSR-PCR reaction system was optimized on Sorghum resistance to Head Smut in Taq polymerase,dNTPs,MgCl2,genomic DNA templates and primers,respectively.Different random primers and template DNA were used to validate the result.Result: The results showed that the five main factors in different levels had the marked influence on the result of PCR.The optimal PCR reaction system for Sorghum resistance to Head Smut... |
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| Keywords: | SSR-PCR Sorghum head smut SSR system optimization |
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