缺失nifH的棕色固氮菌突变种固氮酶钼铁蛋白的结晶 |
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作者姓名: | 边少敏 赵剑峰 吕玉兵 赵颖 周会娜 王耀萍 黄巨富 |
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作者单位: | 边少敏 (中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093) ; 赵剑峰 (中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093) ; 吕玉兵 (中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093) ; 赵颖 (中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093) ; 周会娜 (中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093) ; 王耀萍 (中国科学院生物物理研究所,北京,100101) ; 黄巨富 (中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093) ; |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家重点基础研究发展计划(973计划),国家载人航天工程项目 |
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摘 要: | 从限氨固氮培养基中培养的缺失nif H的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种DJ54中,分离纯化出部分纯的缺失FeMoco的钼铁蛋白(△nifH Av1).用相同纯化方法分别从DJ35和UW45突变种中纯化的△nifE Av1和NifB- Av1的纯度明显高于△nifH Av1的纯度.在合适的结晶条件下,可得到这三种蛋白的深棕色短斜四棱柱晶体.△nifH Av1与NifB- Av1一样,晶体形成所需的时间比△nifE Av1的长.而它结晶所需的沉淀剂和缓冲液最适浓度则与△nifE Av1的相同.SDS-PAGE鉴定表明,结晶的△nifH Av1与OP Av1的组成相似.这表明,在△nifH Av1溶液中形成的晶体可能就是该蛋白质的晶体.
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关 键 词: | 棕色固氮菌突变种DJ54 固氮酶△nifH钼铁蛋白 结晶 nitrogenase △nifHAv1 |
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