| 中华鳖孵化一周胚胎的肾脏/尿生殖嵴混合组织的cDNA文库构建与特征 |
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| 引用本文： | 郑济芳,朱睦元. 中华鳖孵化一周胚胎的肾脏/尿生殖嵴混合组织的cDNA文库构建与特征[J]. 动物学报, 2005, 51(6): 1156-1161 |
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| 作者姓名： | 郑济芳 朱睦元 |
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| 作者单位： | 1. 南华大学生命科学与技术学院,湖南衡阳,421000
2. 浙江大学生命科学学院,杭州,310012 |
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| 基金项目： | 浙江省湖州市自然科学基金 |
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| 摘 要： | 为克隆到与胚胎发育有关的新基因,以孵化一周的中华鳖(Trionyxsinensis)胚胎的肾脏及尿生殖嵴混合组织为原始材料,采用SMART和长距离PCR技术,构建了一个中华鳖cDNA表达文库。分析结果表明,该未扩增的cDNA文库大约含有4.134×105个克隆。任意挑取了192个克隆,提取质粒后用SfiⅠ酶切鉴定表明没有插入片段的克隆为9个,插入了cDNA片段的克隆为183个,插入的cDNA片段大小范围为0.4-3.8kb。其中,插入片段在0.4-1.0kb之间的克隆为19个,在1.1-2.0kb之间的克隆为53个,在2.1-3.0kb之间的克隆为92个,大于3.1kb的克隆为19个。另外,任意挑选45个克隆,提取质粒后,从5′端进行测序,Blast分析表明,除了21个序列在GenBank中找不到同源序列外,其余24个序列在GenBank中均被证实有各自相应的同源序列,这些序列代表6种类型的基因核糖体蛋白基因、代谢酶基因、组织特异性表达的基因、转录因子基因、受体蛋白基因及其它基因。该发育阶段特异性cDNA文库可以进一步用于中华鳖胚胎发育过程中相关基因的鉴定分离、结构功能分析、以及表达调控机制等研究。
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| 关 键 词： | cDNA文库 克隆 爬行动物 龟 |
| 收稿时间： | 2005-04-26 |
| 修稿时间： | 2005-04-262005-08-12 |
Construction and characterization of a cDNA library from kidney/urogenital complex tissues of one-week-old embryos of the soft-shelled turtle Trionyx sinensis |
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| ZHENG Ji-Fang,ZHU Mu-Yuan. Construction and characterization of a cDNA library from kidney/urogenital complex tissues of one-week-old embryos of the soft-shelled turtle Trionyx sinensis[J]. Acta Zoologica Sinica, 2005, 51(6): 1156-1161 |
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| Authors: | ZHENG Ji-Fang ZHU Mu-Yuan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cDNA library Cloning Reptile Turtle |
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