流感疫苗单向免疫扩散试验中抗血清制备新方法的研究

流感疫苗血凝素含量检测方法为单向免疫扩散试验,其抗血清通常由WHO参比实验室提供,通过纯化病毒、蛋白酶切获得血凝素主要抗原片段,然后再免疫动物获得抗血清。该方法制备时间较长,是制约流感疫苗研发及检测的主要因素。以RT-PCR方法获取甲型H1N1流感病毒血凝素中主要抗原片段基因,构建重组质粒并在大肠杆菌中表达,表达产物经纯化、复性后,以蛋白电泳及免疫印迹方法进行了鉴定。以纯化蛋白免疫家兔,制备了相应的抗体,初步证明可用于常规的单向免疫扩散试验。以该法可以快速获得抗血清,尤其是在大流行流感疫苗的研发中,加快疫苗研发进程。     

单向放射免疫扩散法测定流感灭活疫苗血凝素含量的研究

为改进流感灭活疫苗血凝素含量的测定方法 ,将待测样品经去污剂处理后 ,用WHO标准品作对照进行免疫扩散测定 10个流感灭活疫苗样品血凝素含量。在血凝效价相同的情况下 ,疫苗中三价 (A1,A3,B)血凝素含量存在不同程度的差异。可见 ,单向放射免疫扩散法较血球凝集法更适用于流感灭活疫苗血凝素含量的测定。     

用免疫单扩散法测定低pH静注丙球lgG含量及其影响因素初探

本文报道了低 pH静注丙球IgG含量测定免疫单扩散法的建立 ,并对其影响因素进行了初步试验。结果表明 ,该试验方法较为稳定 ,简单易行。在低pH静注丙球IgG含量检测时 ,进口Sigma琼脂糖效果优于国产琼脂糖(P <0 .0 1) ,国产 (东海 )琼脂糖不适于IgG含量的定量检测 ;应先将静注丙球pH调至中性后再进行IgG含量测定(P <0 .0 5 ) ;样品中含有的 10 %麦芽糖对试验结果无影响 (P >0 .0 5 )。