羟基喜树碱抑制人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的实验研究

目的:研究羟基喜树碱(HCPT)对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞(Human Tenon’s capsule fibroblasts,HTFs)增殖、移行的影响。方法:取正常供体新鲜的Tenon囊组织,采用组织块培养法,进行成纤维细胞的体外培养,并用光镜、免疫荧光法观察鉴定;MTT法、划痕法检测不同浓度的HCPT(0、0.031、0.062、0.125、0.25、0.5、1、2、4mg/l)对HTFs增殖、移行的影响,并与MMC对比。结果:HTFs体外生长良好,经光镜和免疫荧光法观察鉴定为成纤维细胞;与空白对照组比较,HCPT(0.031-4mg/l)、MMC(0.0031-0.4mg/l)均能有效抑制HTFs的增殖,且呈一定的剂量、时间依赖性,HCPT作用24h、48h、72h的IC50分别为2.24mg/l、0.76mg/l、0.39mg/l,MMC作用24h、48h、72h的IC50分别为0.34mg/l、0.24mg/l、0.07mg/l;与空白对照组比较,HCPT(0.031-4mg/1)、MMC(0.0031-0.4mg/l)均能抑制HTFs迁移,呈剂量依赖性,而与时间无显著相关。结论:HCPT、MMC均能有效抑制HTFs的增殖和移行,其效应MMC约为HCPT的10倍。     

羟基喜树碱抑制人眼Tenon囊成纤维细胞增殖的实验研究

目的：研究羟基喜树碱（HCPT）对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞（Human Tenon＇s capsule fibroblasts,HTFs）增殖、移行的影响。方法：取正常供体新鲜的Tenon囊组织,采用组织块培养法,进行成纤维细胞的体外培养,并用光镜、免疫荧光法观察鉴定;MTT法、划痕法检测不同浓度的HCPT（0、0．031、0．062、0．125、0．25、0．5、1、2、4mg／1）对HTFs增殖、移行的影响,并与MMC对比。结果：HTFs体外生长良好,经光镜和免疫荧光法观察鉴定为成纤维细胞;与空白对照组比较,HCPT（0．031-4mg／1）、MMC（0．0031-0．4mg／1）均能有效抑制HTFs的增殖,且呈一定的剂量、时间依赖性,HCPT作用24h、48h、72h的IC50分别为2．24mg／1、O．76mg／1、0．39mg／1,MMC作用24h、48h、72h的IC50分别为0．34mg／1、0．24mg／1、0．07mg／1;与空白对照组比较,HCPT（0．031-4mg／1）、MMC（O．0031-0．4mg／1）均能抑制HTFs迁移,呈剂量依赖性,而与时间无显著相关。结论：HCPT、MMC均能有效抑制HTFs的增殖和移行,其效应MMC约为HCPT的10倍。     

聚苹果酸- 羟喜树碱前药的合成和性质初探

目的:化学全合成聚苹果酸(poly(β-malic acid),PMLA),将其作为高分子药物载体,制备聚苹果酸-羟喜树碱前药(PMLA-HCPT)。研究其体外释药特点和体外细胞毒性。方法:以L-天冬氨酸为原料,通过化学方法全合成PMLA,通过酰胺键键合羟基喜树碱(HCPT)。通过红外光谱、核磁共振光谱表征该前药的结构,利用体外动态透析的方法模拟体外释药特点,用高效液相色谱法测定不同pH值聚合物药物中前喜树碱的释药特性。采用人卵巢癌HO-8910细胞系研究该前药的体外毒性。结果:①经核磁共振表征PMLA-HCPT前药合成完成。②在pH 5.6、pH 6.8及pH 7.4的PBS缓冲体系16 h中,羟喜树碱药物累积释放率分别为76.8%,47.2%和18.1%,证实PMLA-HCPT中羟喜树碱的释放具有pH依赖性。③细胞实验证实PMLA-HCPT的细胞毒性和游离的HCPT相比没有降低。结论:PMLA是一种良好的药物载体材料,PMLA-HCPT有望成为具有pH敏感性的聚合物前药。     

10-羟基喜树碱对人膀胱癌细胞增殖、侵袭的抑制作用及诱导凋亡的研究

探讨10-羟基喜树碱(10-HCPT)对人膀胱癌细胞T24增殖、侵袭和诱导凋亡的作用.0.25μmol/L和0.50μmol/L10-HCPT处理T24细胞4d后,用细胞增殖抑制试验、软琼脂集落形成试验、侵袭试验、趋化运动试验、黏附试验和组织蛋白酶B活性测定细胞增殖和侵袭能力的变化;药物处理2d后,采用吖啶橙/溴乙啶荧光双染法和末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP-地高辛缺口末端标记法检测细胞凋亡.结果0.25μmol/L和0.50μmol/L10-HCPT分别使T24细胞增殖下降66.1%和74.8%;对细胞侵袭、运动、黏附及组织蛋白酶B分泌均有明显的抑制作用,并使T24细胞凋亡率显著升高,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05或0.01).提示10-HCPT有抗T24增殖和侵袭作用,并有诱导凋亡的作用.其抗侵袭机制是对侵袭的多个基本环节起抑制作用.