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青霉素酶发酵液的预处理和酶学特性 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了在发酵液中添加絮凝剂对发酵液进行预处理,对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)产生青霉素酶的影响与酶学特性。实验结果表明,发酵液膜处理的难易程度与芽孢释放程度成正相关,在发酵液中添加0.02g/mL自制絮凝剂进行预处理,过滤效率提高10倍,而酶活损失仅5%;酶学特性研究结果表明,该酶最佳反应温度55℃时,酶的最适反应pH值7.0,金属离子锌、锰、镁对酶有激活作用,其浓度为0.25moL/L;酶热稳定性研究结果表明,在75℃下保温30min时,酶活损失85%。该酶在过量青霉素底物下,酶促反应为0级反应。 相似文献
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以获得大量青霉素酶并将其用于分解牛奶中残留青霉素为目的,通过PCR方法从蜡样芽孢杆菌ATCC10987基因组中获得了青霉素酶基因,将该基因克隆至表达载体pET28a( )中,并转化到E. coli BL21中;在IPTG诱导下对目的蛋白进行SDS-PAGE和酶活分析,结果显示最大酶活力可达到480.0 U/mL;利用Ni2 亲合层析柱纯化目的蛋白,纯化后的目的蛋白纯度超过90%;采用高碘酸钠氧化法制备固定化的青霉素酶,并利用该固定化酶将牛奶(含0.5 u青霉素G/mL)中的青霉素分解到浓度小于4 ppb程度. 相似文献
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将sos型H+-ISFET与戊二醚交联的牛血清蛋白-青霉素酶膜组合成单管输出式青霉素酶-H+-ISFET传感器的探头(以下简称青霉素-酶FET),并用于测定溶液中的青霉素含量。青霉素-酶FET在0.005mol/L、O.Olmol/L、0.02mol/L磷酸缓冲液中的响应灵敏度分别为11—12mV/m mol/L、7.5—8.0mV/m mol/L以及3.7—4.OmV/m m01/L;响应时间为30s,在0.02mol/L磷酸缓冲液中的标定曲线线性范围为O.5—25mmo】/L’相关系数为O.9976。该青霉素·酶FET在青霉索浓度为10mmol/L的0.01mo1/L磷酸缓冲液中重复测定8次的标准偏差sD为1.67mv,变异系数cv为2.1%;贮存寿命大于4个月,使用寿命在1个月以上(每天测试一次)。 相似文献
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目的了解广州地区淋球菌对抗生素耐药性的变化及PPNG和TRNG的流行趋势。方法用琼脂稀释法测定头孢曲松、大观霉素、环丙沙星、阿奇霉素和四环素的最低抑菌浓度(MIC);用纸片碘量法检测β-内酰胺酶。结果83株淋球菌检出PPNG24株(28.9%)、TRNG50株(60.2%)、环丙沙星耐药率高达98.8%,高度耐药株(MIC≥16mg/L)43株(51.8%),而76株淋球菌中阿奇霉素耐药株11株(14.5%),均未出现对头孢曲松、大观霉素耐药的菌株,抗菌活性强。结论合理规范使用抗生素及动态监测淋球菌耐药性变迁是临床减少淋球菌耐药菌株出现的有效办法。 相似文献
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产青霉素酶枯草芽孢杆菌发酵条件的优化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:对一株产青霉素酶的重组枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis DB104/pWB-pemp)的摇瓶发酵条件进行优化.方法:利用单因素实验及正交实验等方法考查重组菌摇瓶发酵条件,研究不同浓度的碳源、氮源、金属离子、磷酸盐及不同pH、接种量、装液量和温度等条件对产青霉素酶的影响.结果:重组菌株摇瓶最适发酵条件为pH 7.0、接种量3%、装液量14%、发酵温度37℃,培养基成分为2%蔗糖、3.5%酵母膏、0.1mmol/L镁离子、0.4%磷酸盐.结论:最优条件下,发酵36h,产酶活力达到2227.8U/mL,为先前研究结果(1 580 U/mL)的1.41倍,为重组菌的大规模发酵生产奠定了基础. 相似文献
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以获得大量青霉素酶并将其用于分解牛奶中残留青霉素为目的, 通过PCR方法从蜡样芽孢杆菌ATCC10987基因组中获得了青霉素酶基因, 将该基因克隆至表达载体pET28a(+)中, 并转化到E. coli BL21中; 在IPTG诱导下对目的蛋白进行SDS-PAGE和酶活分析, 结果显示最大酶活力可达到480.0 U/mL; 利用Ni2+亲合层析柱纯化目的蛋白, 纯化后的目的蛋白纯度超过90%; 采用高碘酸钠氧化法制备固定化的青霉素酶, 并利用该固定化酶将牛奶(含0.5 U青霉素G/mL)中的青霉素分解到浓度小于4 ppb程度。 相似文献