滇桂石斛的离体培养和植株再生

1 植物名称滇桂石斛(Dendrobium guangxiense S.J.Cheng et C.Z.Tang). 2 材料类别成熟种胚. 3 培养条件种胚萌发培养基:(1)MS+NAA 0.5mg·L-1(单位下同);(2)MS+NAA 0.5+0.5%～1.0%酵母提取物.     

箭羽竹芋的离体培养和快速繁殖

1 植物名称 箭羽竹芋（Calathea lancifolia Boom），又称披针叶竹芋。 2 材料类别地下分蘖芽。3培养条件芽诱导培养基：（1）MS＋6．BA5．0mg．L。（单位下同）＋NAA0．05：增殖与继代培养基：（2）MS＋6．BA3．0＋NAA0．05;生根培养基：     

萼脊兰的组织培养和快速繁殖

1 植物名称萼脊兰[Sedirea japonica(Linden et Rchb.f.)Garay et Sweet]. 2 材料类别授粉后120 d成熟蒴果内的种子. 3 培养条件(1)无菌播种培养基:1/4MS+KT 0.5mg·L-1(单位下同)+2 g·L-1蛋白胨+10%椰乳(W/V+15 g·L-1蔗糖+1 g·L-1活性炭;(2)增殖及分化培养基:1/3MS+6-BA 5+NAA 0.5+10%椰乳+2 g·L-1蛋白胨+20 g·L-1蔗糖+3 g·L1-活性炭;(3)壮苗及生根培养基:1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.5+2 g·L-1蛋白胨+2 g·L1-活性炭.     

水栒子的组织培养与快速繁殖

1 植物名称 水枸子(Cotoneaster multiflorus Bunge). 2 材料类别 茎尖和茎段. 3 培养条件 基本培养基为MS.诱导培养基:(1)MS+6-BAl.0 mg-L-1(单位下同)+NAA 0.2;继代培养基:(2)MS+6.BA 0.5+NAA 0.5,(3)MS+6-BA0.1+NAA 0.1;生根培养基:(4)1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.1.     

HIV-1 Gag蛋白在大肠杆菌表达系统中诱导和纯化条件的优化

为探讨诱导温度对于HIV-1 Gag在大肠杆菌中表达产物状态以及尿素浓度对蛋白纯化效果的影响, 将30oC和37oC诱导表达的包涵体分别溶于不同浓度的尿素, 比较溶解性的差异, 并比较复性的不同。将30oC诱导的目的蛋白分别用2 mol/L和8 mol/L尿素溶解后做层析分离, 比较两者的分离效果。结果发现, 与37oC相比, 30oC诱导表达的蛋白能有效溶于低浓度尿素, 并且更容易复性。与8 mol/L尿素溶解相比, 30oC诱导的包涵体用2 mol/L尿素溶解后通过凝胶过滤和离子交换层析纯化能得到更好的分离效果。这提示低温诱导的Gag包涵体中可能含有更多类似天然态构象的蛋白, 而低浓度尿素有利于保持包涵体中蛋白的天然态构象。从而为包涵体蛋白的诱导表达和分离纯化提供了参考。     

质粒pRSET-A前导肽串联多聚体的构建及其多克隆抗体制备*

质粒pRSET-A是一个常用的高效原核表达载体，编码一N端含组氨酸标签（6×His）的34aa前导肽序列，以方便利用抗组氨酸标签抗体鉴定或纯化所表达的重组蛋白。本实验设计一对两侧含编码疏水性氨基酸密码子的引物，经过扩增前导序列10~34aa基因序列，并重新克隆入质粒pRSET-A构建串联二聚体后，再利用质粒pRSET-A的BamH I / Bgl II同尾酶克隆位点，经一系列简单的酶切和连接，快速构建这一前导肽中不含组氨酸标签序列的串联多聚体基因，并成功表达其六聚体重组蛋白。将此重组蛋白主动免疫山羊，获得了能够特异地识别pRSET-A编码的N端前导肽序列的抗体。结果显示，所制备的羊抗10~34aa前导肽抗体能够识别pRSET-A指导表达的含有完整前导肽的重组蛋白，但不能识别不含10~34aa序列的重组蛋白；同时，利用同位酶技术可以快速高效构建短肽的串联多聚体以制备具有高免疫原性的亚单位疫苗或免疫调控物质。     

三叶青的离体快速繁殖

1植物名称 三叶青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg），别名三叶崖爬藤、金钱吊葫芦等。 2材料类别 茎段腋芽、试管不定芽。 3培养条件 腋芽萌发培养基：（1）1／2MS＋6．BA0．03mg．L^-1（单位下同）；（2）1／2MS＋6．BA0．05；（3）1／2MS＋6-BA0．1；（4）1／2MS＋6-BA0．2；（5）1／2MS＋6．BA0．5；（6）1／2MS＋6．BA1．0。腋芽光照培养条件：（A）23gm01．m^-2．s^-1；     

药用植物蛇足石杉研究新进展

蛇足石杉[Huperzia serrata（Thunb．）Trey．]是石杉科石杉属多年生小型草本植物，土生、附生或生于苔藓层中，喜阴凉潮湿环境。蛇足石杉含石杉碱甲，为目前治疗老年痴呆等疾病的特效药。对蛇足石杉的分类学、生物学特性（形态学、生态学、生理学与共生真菌研究）、繁殖与栽培、药用成分及含量测定等方面的研究新进展进行综述。并对其应用与保护前景进行展望。     

组胺H3受体激活剂高通量筛选细胞模型的研究

摘 要 目的 建立基于报告基因的组胺H3受体（H3R）激活剂的高通量筛选模型，用此模型对收集到的中草药化合物组分进行筛选，以发现新的组胺H3R激活剂。 方法 将H3R基因质粒（H3R/pCDNA3.1-hygro）与报告基因质粒（3XCRE-LUC）按3：1的比例共转染入HEK293细胞，建立了稳定的H3R配体的报告基因筛选细胞株。激活剂与细胞表面H3R结合后，激活相应的信号通路，调节Forskolin刺激后的报告基因的表达，通过测定荧光素酶报告基因表达水平的变化，评估激活剂影响H3受体的生物活性。 结果 通过对筛选条件，如激活剂孵育时间、Forskolin终浓度、化合物溶剂的选择、溶剂DMSO终浓度等的优化，建立了可靠的筛选方法，并对多种中草药萃取物进行了筛选，找到了两种对H3R有活性的中药组分。结论 建立的细胞模型可以有效的应用于以组胺H3受体为靶点的高通量药物筛选。     

植物病原真菌过氧化物酶体的发生机制及功能

过氧化物酶体（peroxisome，P）是真核细胞中普遍存在的细胞器，参与多种重要的代谢过程。P的产生、增殖及降解是细胞器发生机理研究的重要部分。到目前已知的P发生相关基因有30多个，但其机制仍不完全清楚。作为一种多细胞真核生物，丝状真菌在P发生机制的研究中有重要价值。近年来，随着基因组序列的应用和真菌生物技术的进展，丝状真菌中P功能及发生机制的研究取得了较大进展。同时，作为丝状真菌真菌中的重要类群，植物病原真菌P在致病过程中的作用也引起关注。本文对P发生机制、在丝状真菌中的研究概况，以及与植物病原真菌致病性的关系进行了 综述。