马尾松花粉醇提物降脂作用与预防肥胖的实验研究

本实验通过观察马尾松花粉醇提物对小鼠脂质代谢的影响来探讨其抑制肥胖的初步机制.实验采用随机分组对照方法,对不同组的小鼠进行不同的干预处理.实验结果显示与高脂组(FC)组相比3个醇提物组在终体重、体重净增加和体重增加率方面都有明显降低(P＜0.01);体脂含量也有不同程度降低但未出现显著性差异;血脂中总胆固醇(TC)水平有不同程度的降低,并且甘油三酯(TG)都有明显降低(P＜0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平都有显著性升高(P＜0.01);瘦素(LEP)和脂联素(ADP)水平都有不同程度升高;肝脏和脂肪组织中的肉碱棕榈酰转移酶(CPT-I)酶含量水平都得到显著升高(P＜0.01).上述结果证明马尾松花粉醇提物可以明显控制小鼠的体重增长以及改善体内脂质代谢水平,证明松花粉醇提物在抑制肥胖方面具有重要作用.     

新型冠状病毒亚单位疫苗研制及其高效免疫增强剂的筛选

旨为推动新型冠状病毒（2019-nCoV）亚单位疫苗的开发并探索筛选适用于该疫苗的高效免疫增强剂,本试验分别诱导表达2019-nCoV- S和2019-nCoV- N两个蛋白,经纯化后测定目的蛋白含量,并分别加入不同浓度的松花粉多糖（PPPS）（200、400、800 mg/mL）作为佐剂制备基因工程亚单位疫苗,黄芪多糖佐剂作为对照。选取100只SPF级BALB/c小鼠随机分为10组,每种亚单位疫苗使用5组,免疫疫苗后检测各组小鼠免疫指标,探讨PPPS对2019-nCoV- S和2019-nCoV- N两种亚单位疫苗的免疫增强效果。结果显示,重组表达并纯化的目的蛋白分别在55.68 kD和45.64 kD处出现单一条带,经鉴定表达正确,蛋白质量浓度分别为1.12 mg/mL和0.66 mg/mL。用制作成的含佐剂亚单位疫苗免疫小鼠后发现400 mg/mL PPPS对两种疫苗的免疫效果均有显著的提升效果,并且效果优于黄芪多糖佐剂。综上所述,两种重组蛋白均能诱导较高的抗体水平,PPPS可以作为2019-nCoV亚单位疫苗的候选佐剂。     

松花粉的研究

松花粉包括黑松及马尾松花粉,它属于风媒花粉。本文研究了（１）松花粉形态的电镜观察;（２）松花粉对皮肤及胃肠道的刺激试验;（３）分析了松花粉的的营养组成。研究结果（１）松花粉表面似多孔绒毡,并有一对耳廓形突起,生发孔位于耳廓内侧;（２）松花粉对皮肤及胃肠道无刺激及致敏作用;（３）松花粉的营养组成比较完全,含有丰富的蛋白质、核酸、磷脂、维生素及八种必需氨基酸,因此说明松花粉具有一定的保健作用。     

松花粉黄色素的超声/微波协同提取工艺及其稳定性研究北大核心CSCD

本文以东北野生马尾松松花粉为原料,研究超声/微波协同提取松花粉黄色素的工艺和松花粉黄色素的溶解性以及p H值、温度、光照、食品添加剂和6种常见金属离子对其稳定性的影响。结果表明:超声/微波协同提取松花粉黄色素的最佳工艺参数为微波功率351.4 W,液料比25.4 m L/g,提取时间11.9 min;松花粉黄色素在酸性条件下稳定性较好,碱性环境对其有增色作用,对光和热有较好的耐受性,K+、Mg2+、Ca2+和Al3+的影响小,Cu2+和Fe3+对其有一定的影响,食盐、葡萄糖、蔗糖、苯甲酸钠的影响较小,碳酸钠和苯甲酸钠对色素稍有增色作用,维生素C和柠檬酸稍有减色作用。试验结果表明松花粉黄色素稳定性良好,本研究结果为开发应用松花粉黄色素奠定了基础,为松花粉黄色素的提取加工及工业应用提供了依据。     

马尾松花粉多糖中单糖组分的HPLC分析

目的：从马尾松花粉中分离得到40％、60％、80％浓度乙醇沉淀的三种多糖,对其单糖组成进行比较分析。方法：多糖经H2SO4水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生,KH2PO4（pH5．6）-乙腈梯度洗脱,高效液相250nm紫外检测,其中单糖的色谱峰分离清晰,达到基线分离。结论：实验结果显示松花粉多糖中单糖系以葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸为主的杂多糖。并通过峰面积计算得到各单糖含量的摩尔比。     

硫酸酯化马尾松花粉多糖对小鼠脾脏B淋巴细胞免疫调节作用的研究

研究60％乙醇提取的马尾松花粉多糖组分D（PPM60-D）及其硫酸酯化物（SPPM60-D）对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖、细胞内游离钙离子浓度（[Ca2＋]i）及抗体生成的影响。水煮醇沉法提取得到粗多糖,乙醇分级沉淀得到60％乙醇沉淀多糖PPM60,SephacrylS-400HR分离纯化得到多糖组分D,用氯磺酸-吡啶法对组分D进行硫酸酯化,尼龙毛法分离B淋巴细胞,MTT法测定其增殖,荧光分光光度计测定B淋巴细胞[Ca2＋]i,溶血空斑实验（PFC）和定量溶血分光光度（QHs）法测定B细胞抗体生成情况。结果显示,SPPM60-D相对于PPM60-D能更显著地提高B淋巴细胞的增殖以及[Ca2＋]i（P〈0．011：经TAK-242、LY294002、U73122、低分子肝素、维拉帕米和2-APB抑制剂作用后,均可抑制SPPM60-D和PPM60-D所致的[Ca2＋]i）升高（P〈0．05或P〈0．01）;PFC和QHS检测证实,SPPM60-D对于促进B淋巴细胞的分化及抗体的生成有显著作用,而PPM60-D的作用较弱。以上研究表明,PPM60-D经过硫酸酯化改性后,活性明显提高,推测SPPM60-D可与B淋巴细胞上TOLL样受体4（TLR4）结合,通过TLR4-P13K-PLC—IP3R信号通路使钙库释放激活的钙通道（CRAC）打开,从而使[Ca2＋]i）升高来激活B淋巴细胞,进而提高其体外增殖和抗体生成能力。     

马尾松花粉多糖及其酯化物对离体蟾蜍心肌生理特性的影响

利用常规离体蟾蜍心脏灌流法,通过生理记录仪经张力换能器系统描记心脏活动,观察了60%马尾松花粉多糖及其硫酸酯化多糖对离体蟾蜍心肌收缩力及心率的影响,并用普萘洛尔、氯化镉、维拉帕米等药物对心肌上的特异受体进行阻断,初步探讨了酯化多糖对心肌的作用机制.结果表明:60%多糖有降低离体蟾蜍心肌收缩力的作用,酯化60%多糖则有增强心肌收缩力的作用,两者对心率都没有影响;酯化60%多糖可以逆转普萘洛尔、氯化镉对心肌的抑制作用,而在维拉帕米存在的情况下,其正性肌力作用受到抑制,说明酯化多糖的正性肌力作用可能是通过胞膜上的L-型钙通道介导完成,而与β1受体无关.因而,加深研究酯化多糖影响心脏生理活动的的分子机制,对治疗相关疾病和开发松花粉多糖具有双重意义.