小苍兰种质遗传多样性的ISSR分析

利用ISSR(Inter Simple Sequence Repeat)分子标记对12份小苍兰(Freesia refracta)种质进行了遗传多样性分析研究。从34条ISSR引物中筛选出了12条适宜的引物。这12条引物中每条引物可扩增出5~11条DNA片段,共扩增了96个条带,其中多态性片段62条,平均每条引物可产生5.2条多态性片段,多态性条带比率(PPB)为64.6%。经NTSYS-pc分析,12份小苍兰种质间的遗传距离(GD)的变化范围为0.123~0.907,平均为0.442。根据Nei’s相似系数建立了UPGMA聚类图,在相似系数为0.56时,可将紫色花系的小苍兰种质与其它种质分开,形成两个组。结果表明,ISSR分子标记可有效地分析小苍兰种质资源的遗传多样性和亲缘关系,为小苍兰的杂交育种和新品种保护提供理论基础。     

小苍兰试管球茎的低温诱导

LowTemperatureInductionofFreesiaCormsinVitroHUANGMin－Ling,ChENShi-Lin（OrnamentalHorticulturalLaboratory,GujianAcademyofAgriculturalSciences,Fuzhou350013）1植物名称小苍兰（Freesiahybrida)品种“Aurora”2材料类别茎尖。3塔共条件将萌芽的球茎剥去外皮,用70％洒精消毒5min,再用0．l％HgCI。加入数滴吐温一80溶液消毒10min,无菌水冲洗3次,切取0．5～0．8cm的茎尖。以MS为基本培养基,（互）例芽诱导及增殖培养基为MS＋BA3～4mg／L（单位下同）＋NAA0．2～0．4,光强1000！X,温度24士ZC。（2）诱导试…     

利用正交设计优化小苍兰ISSR-PCR反应体系

通过L₁₆(4⁵)正交试验，研究了镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度这5个因素在4个水平上对ISSR-PCR的影响，建立了适合于小苍兰ISSR-PCR的反应体系。优化体系为：25 μL PCR反应体系中含有1×Taq酶缓冲液(10 mmol·L^-1 KCl，8 mmol·L^-1(NH₄)₂SO₄，10 mmol·L^-1 Tris·HCl，pH 9.0，0.05% NP-40)，2 mmol·L^-1 MgCl₂，0.06 U·μL^-1 Taq酶，0.4 μmol·L^-1引物，4.0 ng·μL^-1模板DNA，dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.6 mmol·L^-1。利用温度梯度PCR，确定了最适宜的退火温度为51.5℃。该优化体系的建立为下一步对小苍兰进行ISSR分子标记奠定了基础。     

小苍兰ACC合成酶FhACS1基因的克隆与序列分析

以小苍兰品种“上农金皇后”为研究对象,利用PCR技术和染色体步移技术首次克隆到了ACC合成酶FhACS1基因的全长序列和编码序列。结果表明：FhACS1基因全长为2 576 bp,包含长为433 bp的5′端非编码区序列（5′-UTR）以及长为373 bp的3′端非编码区序列（3′-UTR）;开放读码框（ORF）长度为1 371 bp,推定编码457个氨基酸。分析表明,该基因包含3个内含子和4个外显子。序列分析结果显示,FhACS1推导蛋白具备ACS蛋白的7个保守结构域;在氨基酸水平上,FhACS1与小果芭蕉的同源性最高（85%）;系统进化分析表明,FhACS1与孟宗竹BaACS（BAC56949.1）、水稻OsACS1（AAA33888.1）、小果芭蕉MaACS1（AAQ13435）的亲缘关系最近。在其已知启动子区域,发现有多个对脱落酸、赤霉素、细胞分裂素等激素响应的顺式元件,以及对干旱和低温等逆境胁迫响应的顺式元件。     

15个小苍兰品种的花粉形态研究

以15个小苍兰品种为试材,利用场发射扫描电镜（SET）对其进花粉形态观察,通过对花粉形状、大小、外壁纹饰及萌发器官等特征,分析不同品种间花粉形态之间的异同。结果表明：15个小苍兰品种的花粉均呈单粒存在且两侧对称,具远极单沟萌发孔,花粉外部形态均呈椭球形,极面观为舟形或心形,赤道面观除Castor外均为超长球形。花粉外壁纹饰均有小刺状凸起,多数品种表面有小穿孔和圆形斑纹。进一步聚类分析表明,15个小苍兰品种根据花粉形态特征可以分成3大类。本文首次报道了小苍兰的花粉形态,并且发现,不同品种间花粉形态特征具有一定差异,尤其是外壁纹饰细部特征和萌发器官的差别,体现了不同小苍兰品种间存在一定的遗传多样性和遗传分化,可为今后分析品种间亲缘关系及种质创新等提供有价值的科学依据。     

小苍兰试管球茎诱导及开花研究

小苍兰茎尖在含３．０ｍｇ／ＬＢＡ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基上,可诱导出许多侧芽。侧芽转移至０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．５％活性炭的ＭＳ培养基,在１３＋２℃温度下培养１个月能诱导成小球茎。经电泳鉴定,试管球茎的可溶性蛋白质谱带与常规球茎的谱带完全相同。试管球移栽后约经７个月即可开花,其观赏性状完全稳定,花后成熟的大球达到商品球标准,可直接用于切花生产。     

小苍兰褪绿条纹花叶病毒的分离鉴定

从表现褪绿条纹花叶症状的小苍兰(Freesia hybrida)上分离得到一种棒状病毒,能感染茄科、藜科、苋科、玄参科和葫芦科的部分植物。病毒粒子长500—575nm,直径13nm。外壳蛋白由一种分子量17500dalton的蛋白亚基组成。纯化的病毒制剂具有典型的核蛋白紫外吸收,A260/A280为1.39。稀释终点10~(-7),致死温度约为95℃,在4℃下体外保毒期大于6个月。排蚜不能传毒。病毒与PVX有血清学关系。实验表明,该病毒属于马铃薯X病毒群,不同于已报道的感染小苍兰的其它病毒。本文还讨论了小苍兰褪绿条纹花叶病毒的控制和检测问题。     

Volatile Compounds in the Flowers of Freesia Parental Species and Hybrids

For centuries, freesia has been one of the most important crops in the floriculture industry. Here, aqua-space samples collected from entire flowers of diploid Freesia refracta, three tetrapioid freesia cuitivars, and interspecific hybrids of three tetraploid freesia cultivars were analyzed using gas chromatograph coupled with mass selective detector, in all, 75 different compounds were identified. The compounds were mainly terpenes, hydrocarbons, alcohols, fatty acid esters and aromatic class compounds. Among these, iinalool was detected from all the sweet-scented flowers except for scentless white tetraploid F. hybrida. Stable inheritance of linalool between F. hybrida and their Ft progeny was observed. Based on the present analyses, the relationship between the aroma of freesia and iinalooi was discussed.