脊椎动物线粒体DNA的基因重排

将GenBank上已公布的321种脊椎动物mtDNA全序列,按纲整理归类,绘制基因排布图并进行比对。比对结果表明：81个物种的mtDNA中观察到基因重排现象,涉及脊椎动物各纲,其中9个物种同时存在基因顺序变化和基因倒置现象,所有的基因重排都涉及tRNA的变化。脊椎动物mtDNA基因顺序变化可分为3类：1)邻接的基因或片段的位置交换;2)接近于控制序列或轻链起始位点的基因或片段的位置变化,有时还伴随着控制序列的倍增;3)I-Q-M区域的变化。所有鸟类、蛇类、鳄类和有袋类的mtDNA具有各自独特的基因排列顺序。基因倒置现象常见于鱼类和哺乳类,且多表现为tRNA从轻链往重链上迁移。本文就这些基因重排现象、发生重排的机制和mtDNA基因重排在系统发生研究中的应用做一简要概述。     

AAV-ITR单链DNA微载体在小鼠骨骼肌中的表达

AAV-ITR单链DNA微载体是一种基于腺相关病毒(AAV)倒置末端重复序列(ITR)的基因表达载体(AAV-ITR ss DNA mini vector)。前期研究已证明AAV-ITR单链DNA微载体在HEK 293T细胞中具有较高的转染、表达效率。本文中将相同拷贝数的AAV-ITR单链DNA微载体、3?-ITR末端错配的AAV-ITR单链DNA微载体(AAV-ITRmm ss DNA mutant vector)、AAV-ITR双链DNA和质粒分别用Turbo Fect转入小鼠骨骼肌中,比较检测AAV-ITR单链DNA微载体与其他基因表达载体在小鼠体内1周、1个月及3个月的表达效率。组织切片经荧光显微镜观察及荧光灰度值分析表明,相同分子摩尔数的AAV-ITR单链DNA微载体比AAV-ITR双链DNA和质粒在不同时期表达效率都要高且更稳定。提取注射3个月后的肌肉组织的DNA,用荧光定量PCR分析比较各载体的存留分子数。RT-PCR的结果显示AAV-ITR单链DNA微载体在注射3个月后的存留分子数较其他载体高。综合结果显示AAV-ITR单链DNA微载体在动物体内具有表达效率高和长久稳定的优势,有可能开发为基因治疗的一种高效、稳定的新型载体。     

杆状病毒转导不同哺乳动物骨髓来源间充质干细胞

杆状病毒作为一种新型基因载体,若能有效转导不同哺乳动物骨髓来源间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs),将会成为干细胞基因修饰研究领域中更理想的一种基因载体.本文探讨了重组杆状病毒(BacV-CMV-EGFP)对不同哺乳动物BMSCs的转导效率.体外原代培养小鼠、大鼠、猪、恒河猴及人的BMSCs.用培养3代以上的哺乳动物BMSCs进行病毒转导实验,转导2d后用倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在不同哺乳动物BMSCs中的表达,并用流式细胞仪检测重组杆状病毒对不同哺乳动物BMSCs的转导效率.结果显示:原代培养的小鼠、大鼠、猪、恒河猴及人的BMSCs于体外传代3次以上后,细胞呈现较均一的梭形,漩涡状生长;倒置荧光显微镜观察显示,与小鼠、大鼠、猪的BMSCs相比,恒河猴及人有更多BMSCs表达绿色荧光蛋白,且荧光强度较强;杆状病毒对小鼠、大鼠、猪、恒河猴及人的BMSCs的转导效率分别为(21.21±3.02)%、(22.51±4.48)%、(39.13±5.79)%、(71.16±5.36)%及(70.67±3.74)%.上述结果表明,重组杆状病毒对不同哺乳动物BMSCs的转导效率不同,对恒河猴及人的BMSCs转导效率较高,说明重组杆状病毒可作为人或灵长类动物BMSCs基因修饰研究领域中更理想的基因载体.     

人外周血单个核细胞与脐带间充质干细胞共培养的AFM研究

采用原子力显微镜与倒置显微镜在细胞层次上观察了人外周单个核细胞(PBMCs)与同种异源脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)共培养的过程,并在单细胞水平上分析了共培养前后人外周单个核细胞的形貌和生物物理性质。结果发现:共培养后贴壁人外周单个核细胞的形态发生了很大的改变,并且表面分布着大小不一的颗粒状聚合物。利用AFM高空间分辨的力位移曲线测量系统,发现共培养72h后培养上清中人外周单个核细胞、贴壁的人外周单个核细胞的粘滞力分别是单纯培养72h的人外周单个核细胞的2倍、5倍,而细胞的硬度分别是单纯培养人外周单个核细胞的1.5倍、2倍。CCK-8检测提示,共培养过程中,干细胞的生长与外周血单个核细胞的生长出现了竞争作用。通过AFM探测人外周单个核细胞与脐带间充质干细胞共培养的可视化数据,有助于更好地了解间充质干细胞与外周血单个核细胞的相互作用。     

举证责任倒置对医生影响的调查分析

目的:了解举证责任倒置实施以来,该政策对医生的影响及实施中存在的问题。方法:应用自制问卷,对青岛、西安两地9家三甲综合性医院共256名医生进行问卷调查,运用spss16.0进行统计分析。结果:举证责任倒置一方面给医生的医疗行为带来了积极影响,另一方面也给医生带来了较大的心理压力,尤其是发生过纠纷、被起诉的医生,对其以后的行为产生了消极影响。结论:医院除应加强对医生医疗技术、法律知识培训外,还应成立专门的机构来缓解医生的心理压力,解除其心理问题。     

IEEE批量上传解析PDF方案设计

为使编辑部系统的投稿步骤从"两步走"转化为"一步到位",本文主张将提取PDF文件信息的技术从PDF阅读器领域移植进IEEE Xplore投稿系统领域,并与批量上传巧妙结合,使编辑人员能够在一次性批量上传1GB左右的PDF文件后,计算机从中自动提取这些供日后检索的论文标题、作者、地址、邮箱、摘要和关键字等信息,为编辑部节省大量人力、物力、财力。     

Induction of chromosomal inversion by integration of T-DNA in the rice genome

Transfer DNA (T-DNA) of Agrobacterium tumefaciens integration in the plant genome may lead to rearrangements of host plant chromosomal fragments,including inversions.However,there is very little information concerning the inversion.The present study reports a transgenic rice line selected from a T-DNA tagged population,which displays a semi-dwarf phenotype.Molecular analysis of this mutant indicated an insertion of two tandem copies of T-DNA into a locus on the rice genome in a head to tail mode.This insertion of T-DNA resulted in the inversion of a 4.9 Mb chromosomal segment.Results of sequence analysis suggest that the chromosomal inversion resulted from the insertion of T-DNA with the help of sequence microhomology between insertion region of T-DNA and target sequence of the host plant.     

关于新形势下病案管理的几点法律思考

病案是处理医疗纠纷的重要法律依据。2002年开始实施的《医院事故处理条例》和《医疗机构病历管理规范》,对依法治档、规范病案管理工作提供了重要保障。但是,面对医疗纠纷的“举证责任倒置”原则,医护人员应增强病案管理的法律意识。本探讨了病案管理中法律观念与行为的内涵,分析了病案管理中法律问题表现形态和病案管理的内在需求,提出了病案管理法律观念与行为的培育途径。     

解剖学工作者的职业病在工作环境中举证责任倒置的探讨

甲醛可引起机体一系列异常反应,针对解剖工作者所处的工作环境,可以通过改善工作环境、使用检测仪器和定期进行体检来预防甲醛对机体的危害,在防治职业病的发生的基础上,认识到职业病在工作环境中的举证责任倒置问题,可以对疾病进行早发现和早治疗,并对职业病的法律维权有所帮助。     

急性心肌梗死PCI术后早期T波倒置与左室功能的关系

目的:探讨急性ST段抬高心肌梗死直接PCI术后早期T波倒置与左心室功能的关系.方法:对急性ST段抬高心肌梗死直接PCI术后78例患者,以24小时抬高的T波是否倒置分组,采用超声心动描记术检测左室射血分数、心肌活动指数,评价早期T波倒置与左室功能的关系.结果:早期T波倒置组左心功能优于T波未倒置组(P＜0.01),T波深倒置组左心功能优于浅倒置组(P＜0.05).结论:急性ST段抬高心机梗死早期T波倒置可早期评估左心功能、判断预后.