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1.
选取H5、H9、H7亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)血凝素(hemagglutinin,HA)基因保守序列,利用PrimerExpress2.0软件设计了各自亚型的特异性引物和Taqman MGB探针,利用实时荧光RT-PCR一步法建立了H5、H9、H7亚型禽流感灭活疫苗的鉴别检测方法,该方法特异性好,重复性佳,对其他疫苗无交叉反应。结果表明实时荧光PCR方法为禽流感灭活疫苗提供了一种特异、敏感、快速和简洁的鉴别检测方法。  相似文献   
2.
选取H5、H9、H7亚型禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)血凝素( hemagglutinin, HA) 基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计了各自亚型的特异性引物和Taqman MGB探针,利用实时荧光RT-PCR一步法建立了H5、H9、H7亚型禽流感灭活疫苗的鉴别检测方法,该方法特异性好,重复性佳,对其他疫苗无交叉反应。结果表明实时荧光PCR方法为禽流感灭活疫苗提供了一种特异、敏感、快速和简洁的鉴别检测方法。  相似文献   
3.
4.
套式RT-PCR检测猪繁殖和呼吸综合征病毒的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
参照ATCC VR-2332株及LV株保守区段设计了3条引物,以此建立了检测猪繁殖和呼吸综合征病毒的套式RT-PCR方法。利用其分别对ATCC VR-2332株、LV株及B13株进行套式RT-PCR,结果从3个不同地区分离的毒株中均能特异性的扩增出相应的片段,大小分别约为430bp(预期片段为430bp)、410bp(预期片段为413bp)及410bp(预期片段为413bP),而3个非PRRSV的病毒(猪瘟病毒、细小病毒及伪狂犬病毒)均未扩增出相应的片段。其敏感性可达到10-2TCI  相似文献   
5.
研究了Papain及Trypsin裂解小鼠抗天花粉蛋白IgE单抗的条件及Fab的制备。Papain和Trypsin两者都可产生F(ab′)_2,分子量在150~160kD左右;经Papain裂解的主要产物中还有Fab,分子量72kD,可通过凝胶过滤获得纯的Fab。而Trypsin裂解物经DTT还原、碘乙酰胺烷化虽然也可得到Fab′(t),但不易纯化;可见,要制备Fab以采用Papain裂解为好,而制备F(ab′)_2则可采用Trypsin裂解。这二个酶的裂解速度是Trypsin大于Papain。  相似文献   
6.
中国不同年代食品动物大肠杆菌耐药性调查研究   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
收集到20世纪70,80,90年代和2000年食品动物大肠杆菌共326株,对不同年代的大肠杆菌进行耐药性、整合子/基因盒测定,结果表明在过去的30多年里,食品动物大肠杆菌耐药性呈逐渐增长的趋势.从1970~2000年,对青霉素类的耐药率从19.0%增长到81.3%;对四环素类药的耐药率从61.9%~63.5%增长到89.5%~93.1%;对氨基糖甙类的耐药率从0-9.5%增长到5.0%~63.1%,对氟喹诺酮类的耐药率从0%增长到50.2%-53.0%;对磺胺类药的耐药率从11.7%~57.1%增长到77.7%~79.7%;对氯霉素的耐药率从39.7%增长到51.8%.整合子的携带率从20世纪70年代的17.5%增长到2000年的79.1%,其中大多数为I型整合子,也有少数Ⅱ型整合子(90年代为4.4%,2000年为11.8%).在20世纪70和80年代,大多数I型整合子的基因盒编码aadAI基因,比例分别为72.7%和70.0%.20世纪90年代和2000年基因编码dfrA—aadA的占多数,分别为80.0%和74.7%.近4个世纪以来,细菌的多重耐药谱也逐渐增宽.本项研究给兽医从业者滥用抗菌药提出了警示,同时提出中国动物源细菌耐药性的监测和控制是必要的.  相似文献   
7.
采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术,研究了5种高温和中温白酒大曲细菌群落结构,通过优势条带切胶鉴定确定了大曲中优势细菌种属信息。结果表明,Weissella cibaria、Lactobacillus helveticus、L.fermentum、L.panis等乳酸菌普遍存在于5种大曲中,Ther-moactinomyces sanguinis仅存在于高温曲酱曲中,同时DGGE检测到了传统方法未能分离鉴定的Staphylococcus xylosus、Klebsiella oxytoca。不同工艺大曲细菌群落结构存在明显差异,随着制曲温度的升高,大曲细菌多样性指数有下降趋势。PCR-DGGE技术是一种能够快速有效地研究白酒大曲细菌群落结构的技术。  相似文献   
8.
 天花粉蛋白与CibacronBlueF_3GA结合特性的研究何贤辉,柯一保,孙汛,聂慧玲(中国科学院上海细胞生物学研究所,上海200031)天花粉蛋白(Trichosanthin,简称TC8)是从葫芦科植物栝楼(Tbehosantheskirilow?..  相似文献   
9.
用马来酸酐及环己二酮分别对天花粉蛋白上的Lys、Arg残基侧链进行修饰,并以竞争性酶免疫测定检查了化学修饰对TCS与小鼠抗TCS单抗TE-1(IgE型)反应活性的影响。两种修饰均使TCS与单抗TE-1反应活性下降。推测Lys残基可能直接参予了与单抗TE-1的结合。热变性实验提示TCS上单抗TE-1识别部位需要一定的空间构象。  相似文献   
10.
RT-PCR和酶切方法区分猪瘟疫苗毒与野毒的研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
建立了套式RT-PCR与限制性内切酶酶切相结合的区别猪瘟兔化弱毒疫苗株与猪瘟病毒田间分离株的诊断方法。通过对猪瘟兔化弱毒疫苗株与猪瘟石门株E2基因主要抗原编码区序列进行限制性内切酶酶切位点分析,分别找出猪瘟兔化弱毒疫苗株与猪瘟石门株各自独有的限制性内切酶酶切位点,结果二者分别有10和16个独有的限制性内切酶的酶切位点;分别对17株猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区序列进行这26个限制性内切酶酶切位点分析,结果表明有3个限制性内切酶(HgaI、Hin8I及Hsp92I)的酶切位点在HCLV株序列是独有的;利用HgaI限制性内切酶分别对HCLV、HCVSM及5株不同基因群的猪瘟病毒田间分离株进行酶切鉴定,结果只有HCLV株能够被HgaI酶切成2个片段,而其它的毒株则不能被切开。同时测定了套式RT-PCR方法的敏感性及特异性,结果其敏感性可达到0.2MLD,而对BDV以及BVDV均不能特异扩增。本方法的建立无疑对猪瘟在我国的控制和消灭具有重要的意义。  相似文献   
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