鲤鱼肥胖基因的分子克隆及在大肠杆菌中的表达

为了研究鲤鱼肥胖基因的结构特点和体外表达产物的生物学活性 ,利用RT PCR技术从鲤鱼肠系膜脂肪组织中扩增出鲤鱼肥胖基因的cDNA编码序列 ,分析表明该cDNA序列由 4 38个核苷酸组成 ,编码 14 6个氨基酸组成的多肽 ,鲤鱼肥胖基因与人、猪、鼠的相比 ,核苷酸同源性分别为 :84 %、 86 %、 95 % ;氨基酸的同源性分别为 84 %、 82 %、 96 %。构建了原核表达载体 pET 2 8a li,利用IPTG在大肠杆菌中进行了诱导表达 ,并对表达产物进行了初步纯化和生物活性检测 ,结果表明 ,鲤鱼肥胖基因在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达 ,融合蛋白质分子量约为 2 0kD ,经薄层扫描分析 ,目的蛋白占菌体总蛋白的 2 0 3%。表达产物经过纯化和复性能够明显抑制小鼠的摄食和生长 ,说明表达产物Leptin具有明显的生物学活性     

幼鳖胃肠胰组织中主要消化酶活性分布

本文分析了中华鳖幼鳖胃肠胰组织中淀粉酶,蛋白酶,脂肪酶的最适ｐＨ,最适度物浓度及Ｎａｃｌ对淀粉酶的知效应,在测定的最适条件下比较了三种酶在胃肠胰不同部位组织中酶活性的分布。     

母兔配种后10小时血清中若干生理指标与子代性比的相关

测定日本大耳白兔母兔配种后１０小时血清中的１０项生理指标,并与母兔所产每窝仔兔的性比（雄性个体所占比率）进行对应分析（窝仔数＜６的数据未参与此项分析）。结果表明：母兔血清中ＦＳＨ、Ｔ（睾酮）、 Ｎａ＋和Ｍ２＋的浓度在高、低两个性比组间有显著差异, Ｔ３（三碘甲状腺原氨酸）的差异接近显著水平（Ｐ＜０．１）;并且,ＦＳＨ和Ｔ３与子代性比里显著负相关（ｒ分别为－０．５０和－０．４６）,Ｍｇ２＋与子代性比里显著正相关（ｒ＝０．３９）;同时,Ｍｇ２＋／Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋×Ｎａ＋、Ｍｇ２＋×Ｋ＋和Ｔ３×ＦＳＨ与子代性比的相关分别为０．４０、０．４３、０．３９和－０．５３（Ｐ＜０．０５）。     

泥鳅与大鳞副泥鳅正反交子代遗传变异的RAPD分析

我国利用远缘杂交方法在鱼类杂交优势利用上已经取得了不少成果1.不仅如此,不少学者还通过胚胎发育形态学、染色体组型、同工酶等生化表型的研究对远缘杂交中的核质关系、基因表达、不亲和性原理进行了广泛探索2-5.       

对亲本受孕时生理状态与子代性比关系的某些理论的检验

在亲本受孕时生理状态与代性比的关系上存在着多种理论。在１９８８－１９９２年期间，作者用实验对其中的营养理论、氧化还原理论、酸碱理论和激素假说的部分观点进行了检验。结果表明：这些理论在某种速度上均具有合理性。作者还发现：这些理论之间是相互联系的。用一系列生理指标来描述双亲受孕时影响子代性比的生理状态，对于通过调节配种时双亲的生理状态来控制子代性比具有重要意义。     

大配种前雌鼠日粮中添加葡萄糖,精氨酸和氯化钠对子代性比的影响

对配种前昆明小鼠的雌鼠日粮中添加葡萄糖、精氨酸和氯化钠以观察其对子代性比（雄性百分比）的影响。结果表明,葡萄糖具有明显降低了代性比的效应,且不降低产仔数,氯化钠也具有降低子代性比的作用,但使产仔数降低。并且发现：使子代性比降低的添加物葡萄糖使雌鼠血清睾酮含量降低。     

在配种前雌鼠日粮中添加葡萄糖、精氨酸和氯化钠对子代性比的影响

对配种前昆明小鼠的雌鼠日粮中添加葡萄糖、精氮酸和氯化钠以观察其对子代性比(雄性百分比)的影响。结果表明:葡萄糖具有明显降低子代性比的效应,且不降低产仔数;氯化钠也具有降低子代性比的作用,但使产仔数降低。并且发现:使子代性比降低的添加物葡萄糖使雌鼠血清睾酮含量降低。     

鲤鱼肥胖基因的分子克隆及在大肠杆茵中的表达

为了研究鲤鱼肥胖基因的结构特点和体外表达产物的生物学活性,利用RT-PCR技术从鲤鱼肠系膜脂肪组织中扩增出鲤鱼肥胖基因的cDNA编码序列,分析表明该cDNA序列由438个核苷酸组成,编码146个氨基酸组成的多肽,鲤鱼肥胖基因与人、猪、鼠的相比,核苷酸同源性分别为84%、86%、95%;氨基酸的同源性分别为84%、82%、96%.构建了原核表达载体pET-28a-li,利用IPTG在大肠杆菌中进行了诱导表达,并对表达产物进行了初步纯化和生物活性检测,结果表明,鲤鱼肥胖基因在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达,融合蛋白质分子量约为20 kD,经薄层扫描分析,目的蛋白占菌体总蛋白的20.3%.表达产物经过纯化和复性能够明显抑制小鼠的摄食和生长,说明表达产物Leptin具有明显的生物学活性[动物学报 51(1)95-100,2005].     

大口鲶ob基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

1994年Zhang等人利用定位克隆技术首次成功地克隆出小鼠肥胖基因(obese gene,ob基因)及人类同源序列后[1],其他动物如鸡、鸭、猪等的肥胖基因结构和部分功能相继得到了报道,但关于鱼类ob基因的结构和功能研究报道较少.