拟南芥信号肽AtRALF1的表达、纯化及活性分析

利用RT-PCR扩增获得拟南芥At RALF1基因的全长cDNA序列,将其构建入携带His标签的原核表达载体p ET28b中,获得重组表达载体p ET28b-At RALF1,并将其转入到大肠杆菌BL21(DE3)中。随后在不同的IPTG浓度、温度和诱导时间条件下,进行At RALF1蛋白的表达研究,建立了At RALF1融合蛋白的高效表达体系。结果表明,在30℃、1 mmol/L IPTG的条件下诱导4 h,At RALF1融合蛋白的表达量最大。进一步用获得的At RALF1融合蛋白处理苗龄5 d的野生型拟南芥(Col-0)植株,发现其根的生长受到了抑制,表明我们获得了具有活性的At RALF1小肽,为进一步研究该小肽奠定了基础。     

植物钾吸收基因及其遗传转化的研究进展

综述了近年来已分离和克隆的与植物钾离子吸收有关的基因及其在遗传转化方面的研究进展,对应用生物工程技术改良植物的钾营养性状进行了讨论。     

农业生物信息数据库发展现状及应用

农业生物信息数据库是农业科学研究者的基础工具,利用数据库中的大量信息,便于进行农业生物的改良与保护。本文介绍了农业生物信息数据库的发展状况及其应用,并讨论了目前农业生物信息数据库存在的问题。     

拟南芥赤霉素受体AtGID1a原核表达条件的优化研究

运用均匀设计法,对影响Rossetta(DE3)/pGEX-KG/AtGID1a表达水平的因素进行了优化,摸索出了对可溶性蛋白进行诱导表达的最优条件,即蛋白胨16 g/L,酵母粉5 g/L,葡萄糖4g/L,IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导温度23 ℃,IPTG诱导时间4 h.在此条件下,目的蛋白的平均密度从0....     

芸苔素对陈化水稻种子萌发和幼苗生长的影响

以杂交早稻品种株两优819的陈化种子为试材,探讨芸苔素对水稻种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,芸苔素内酯处理对恢复陈化种子活力有一定的效果,芸苔素内酯浸种与催芽处理均能显著提高陈化水稻种子的发芽势和发芽率,缩短萌发所需时间;芸苔素内酯浸种能显著促进胚芽发生和胚根伸长,促进齐苗;芸苔素内酯催芽处理对胚根伸长也有促进作用,但对胚芽生长有一定的抑制作用。     

超级杂交稻乙烯反应元件结合蛋白cDNA的生物信息学分析与克隆

目的：从超级杂交稻中克隆乙烯反应元件结合蛋白（EREBP）的cDNA。方法：利用模式植物拟南芥中编码乙烯反应元件结合蛋白的cDNA,对现有的水稻基因组数据库进行搜索,获得一条高同源的未知序列。对这条未知序列的核酸序列蛋白质序列及其结构、性质、功能等进行生物信息学分析后,以超级杂交稻为材料,用未知序列设计一对简并引物,用RTPCR技术扩增后进行T-A克隆。结果：生物信息学分析结果表明,这个未知序列应为水稻中编码EREBP的cDNA;克隆后经测序获得一条915bp的cDNA,BLAST表明这条cDNA序列与未知序列的部分核酸序列的同源性达到了99％;提NCBI的GenBank后被接受,登录号为EF507537。结论：以生物信息学分析为基础,结合RT-PCR和T-A克隆技术,成功地从超级杂交稻中克隆了EREBP cDNA。