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为了寻求SARS-CoV-2 IgM抗体阳性血清质控品的替代品,本研究成功表达纯化出抗SARS-CoV-2 S蛋白IgM单克隆抗体。研究确定了IgM单克隆抗体最佳表达载体为含增强子sp163和信号肽2的组合以及第5d为目的蛋白收获的最佳时间。此外在研究J链的作用时发现转染细胞时不添加J链(nCoV-163-IgM3)的表达量明显高于添加J链(nCoV-163-IgM3 J)时的表达量,J链对蛋白稳定性也无明显影响,且nCoV-163-IgM3和nCoV-163-IgM3 J抗原结合活性之间的差别无统计学意义(P>0.05),nCoV-163-IgM3和nCoV-163-IgM3 J对本研究所检测的WTS1、Alpha-S1、Beta-S1、Delta-S1、Omicron-S1、BA.2-S1、BF.7-RBD、XBB.1-S1、BQ1.1-S1等九种抗原均有结合活性,只有一株(BA.2.75-RBD)逃逸。纯化后的目的蛋白经还原剂(β-ME)还原后显示重链分子量大小为70kD左右,轻链分子量大小为25kD左右。目的蛋白均可与新型冠状病毒抗体检测试剂盒(胶体金,INNOVITA)... 相似文献
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SHRsp内脏阻力血管平滑肌钙通道动力学特征 总被引:3,自引:0,他引:3
用膜片箝全细胞钡电流方式比较成年雄性卒中易感型自发性高血压大鼠(SHRsp)及正常大鼠(Wistar)肠系膜动脉A4-A5分支阻力血管平滑肌电压依赖性钙通道的动力学特性。结果发现:1)两种大鼠该段均存在有L型与T型钙通道。2)峰值电流(peakIBa2+)幅度和密度SHRsp均大于Wistar大鼠。3)通道激活时间常数(τa)SHRsp小于Wistar大鼠,失活时间常数(τi)于箝制电压(HP)=-40mV时,两种大鼠无区别,HP=-80mV时,SHRsp显著大于Wistar。4)和Wistar大鼠相比较,SHRsp的稳态激活曲线(D∞)与稳态失活曲线(F∞),均呈现左移。SHRsp肠系膜动脉阻力血管平滑肌电压依赖性钙通道的如此特征更有利于胞外钙离子进入胞内。而关于内脏阻力血管的实验结果迄今鲜有报道。 相似文献
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摘要 目的:观察吡拉西坦联合黄芪颗粒对老年痴呆大鼠学习能力、认知功能的影响,并探讨其可能机制。方法:采用双侧海马CA1区注射1 μg β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)建立老年痴呆大鼠模型。取40只建模成功的SD大鼠随机分为模型组、吡拉西坦组、黄芪颗粒组和联合组,每组10只。另取10只双侧海马CA1区注射1 μL生理盐水和10只未经任何处理的同龄SD大鼠分别作为假手术组和对照组。建模成功7 d后给予吡拉西坦组、黄芪颗粒组、联合组大鼠分别灌胃吡拉西坦溶液、黄芪颗粒溶液、吡拉西坦+黄芪颗粒混合溶液,给予对照组、假手术组、模型组大鼠灌胃等剂量生理盐水,所有大鼠均连续灌胃治疗30 d。采用Morris水迷宫测试评价大鼠学习和认知功能。处死大鼠后采用TUNEL法检测海马组织神经元凋亡情况,采用比色法检测海马组织天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)和caspase-9活性。结果:(1)6组大鼠第1~5 d的逃避潜伏期均呈显著减少趋势,同组不同时间点比较有显著性差异(P<0.05)。模型组大鼠第1~5 d逃避潜伏期均显著长于其余5组,联合组第1 d的逃避潜伏期显著长于对照组和假手术组(P<0.05),但第2~5 d时的逃避潜伏期与对照组和假手术组比较无差异(P>0.05)。(2)对照组、假手术组和联合组大鼠,吡拉西坦和黄芪颗粒组大鼠平台穿越次数比较无差异(P>0.05)。联合组大鼠平台穿越次数显著多于吡拉西坦组和黄芪颗粒组(P<0.05)。(3)吡拉西坦组、黄芪颗粒组和联合组大鼠海马组织神经元细胞凋亡比例均低于模型组,联合组大鼠海马组织神经元细胞凋亡比例低于吡拉西坦组、黄芪颗粒组(P<0.05)。(4)吡拉西坦组、黄芪颗粒组和联合组大鼠海马组织caspase-3和caspase-9活性均低于模型组,联合组大鼠海马组织caspase-3和caspase-9活性均低于吡拉西坦组、黄芪颗粒组(P<0.05)。结论:吡拉西坦联合黄芪颗粒能够有效改善老年痴呆大鼠学习和认知功能,效果优于单药,其机制可能与两药联合更能有效抑制神经元细胞凋亡信号通路,减轻海马组织神经元损伤有关。 相似文献
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一株纤维素分解菌的分离与筛选 总被引:33,自引:0,他引:33
以新华滤纸为唯一碳源,从垃圾堆肥中筛选能够分解纤维素的菌株共39株,采用刚果红鉴别培养基进行识别,获取透明圈较大的菌株10株,在此基础上,进行液体培养,测定酶活,得到1株酶活较高的曲霉B-6(Aspergillus sp)。将B-6与绿色木霉(Trichoderma sp)AS3.3711进行了参比试验,比对筛选工作进行评定,经过固体,液体发酵对比试验,发现B-6与AS3.371有相近的产酶性能,B-6在固,液发酵中酶活分别达到39.2IU,14.9IU,而S3.3711则分别为16.6IU与15.7IU,且B-6较AS3.3711有更强的液化CMC的能力,B-6在24h内即能使3%CMC完全液化,而S3.3711则需96h。 相似文献
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平茬密度对荒漠草原人工柠条林间生境的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
合理平茬对柠条林更新复壮及科学利用具有重要意义。以宁夏荒漠草原6 m带距人工柠条林(中间锦鸡儿,Caragana intermedia)林间草原为研究对象,研究了全平(QP)、隔一带平茬两带(G1P2)、隔一带平茬一带(G1P1)、隔两带平茬一带(G2P1)、未平茬(WP)五种密度(间距)平茬后柠条林间植被和土壤性状、小气候和土壤风蚀特征等变化。结果表明:(1)G2P1处理下林间植被物种总数、密度、高度和地上生物量最高,物种丰富度、多样性指数以G1P1、G2P1较高。(2)0-40 cm土壤容重以G1P1、G2P1较低,但机械组成无明显变化规律;土壤有机质、速效钾、全氮和速效氮以G2P1最高,但速效磷G1P1最高;土壤平均含水量以G2P1较高,达到8.33%,G1P2和WP最低,WP水分垂直变异系数最大。(3)处理间气温和风速无显著差异;风蚀量以QP、G1P2和WP较高,G1P1与G2P1较小。研究认为,适宜的密度平茬对人工柠条林间生境有改善作用,宁夏荒漠草原人工柠条林平茬时可采取隔两带平茬一带的方式。 相似文献
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摘要 目的:探讨鼠神经生长因子联合神经节苷脂钠注射液对癫痫大鼠认知功能、血清NSE及海马神经元的影响。方法:选择SD雄性大鼠50只,随机分为5组,包括空白组、模型组、A组、B组、C组。空白组大鼠腹腔注射等容量的生理盐水,其余组使用腹腔注射氯化锂-毛果芸香碱的方法建立癫痫大鼠模型。空白组、模型组大鼠用微量注射器注射20 μL无菌生理盐水,A组同时间点给大鼠腹腔注射2000 AU/kg鼠神经生长因子;B组同时间点给大鼠腹腔注射20 μL神经节苷脂钠;C组给大鼠腹腔注射2000 AU/kg鼠神经生长因子联合20 ?滋L神经节苷脂钠。进行Morris水迷宫试验、空间探索试验,检测血清NSE水平与海马神经组织的神经元,检测血清NSE水平、海马神经组织的神经元存活率及核因子kB p56、TLR-4、MyD88蛋白水平。结果:模型组第1、2、3、4、5 d时的游泳总距离、逃避潜伏期较其他四组高,空白组较A组、B组、C组高,B组、A组较C组高(P<0.05),B组、A组对比无差异(P>0.05);模型组的平台穿越次数、探索有效时间比率较空白组、A组、B组、C组低,空白组较A组、B组、C组低,B组、A组较C组低(P<0.05),B组、A组对比无差异(P>0.05);模型组的血清NSE水平、核因子kB p56、TLR-4、MyD88蛋白水平较空白组、A组、B组、C组低,海马组织中神经元存活率较高,空白组较A组、B组、C组低,海马组织中神经元存活率较高,B组、A组较C组低,海马组织中神经元存活率较高(P<0.05),B组、A组的NSE水平、海马组织中神经元存活率、核因子kB p56、TLR-4、MyD88蛋白水平对比无差异(P>0.05)。结论:鼠神经生长因子联合神经节苷脂钠注射液可改善癫痫大鼠的认知功能,减轻海马组织炎症反应,可能与其可降低血清NSE及海马组织核因子kB p56、TLR-4、MyD88水平有关。 相似文献
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目的:探讨胃癌组织中微小核糖核酸(mi R)-203、mi R-4317的表达情况及其临床意义。方法:选择2014年1月至2016年12月我院收治的胃癌患者92例,应用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测患者胃癌组织及其相应癌旁组织中mi R-203、mi R-4317的表达情况,分析mi R-203、mi R-4317表达与胃癌患者临床病理参数的关系,所有患者随访3年,根据mi R-203、mi R-4317在胃癌组织中的中位表达量将患者分为mi R-203高表达组(49例)、mi R-203低表达组(43例)、mi R-4317高表达组(51例)、mi R-4317低表达组(41例)。分析mi R-203、mi R-4317与预后的关系及预后的影响因素。结果:胃癌组织中mi R-203、mi R-4317相对表达量显著低于癌旁组织(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤大小胃癌患者胃癌组织中mi R-203、mi R-4317相对表达量比较无统计学差异(P>0.05),中低分化、TNM分期为III~IV期、有淋巴结转移胃癌患者胃癌组织中mi R-203、mi R-4317相对表达量显著低于高分化、TNM分期为I~II期、无淋巴结转移胃癌患者(P<0.05)。mi R-203高表达组3年生存率显著高于mi R-203低表达组(P<0.05),mi R-4317高表达组3年生存率显著高于mi R-4317低表达组(P<0.05)。COX多因素分析显示,中低分化、TNM分期为III~IV期、有淋巴结转移、mi R-203低表达、mi R-4317低表达是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:胃癌组织中mi R-203、mi R-4317异常低表达,其水平与胃癌预后密切相关,且胃癌患者预后与分化程度、临床分期、淋巴结转移等相关。 相似文献
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线粒体在细胞死亡中占有中心地位,但其他细胞器影响线粒体启动细胞死亡的机制仍不十分明确. 近几年来,随着对溶酶体功能的不断了解,Alexei等提出了溶酶体线粒体轴理论.这一理论阐述了溶酶体与线粒体的相互作用,并最终导致细胞死亡的机理. 各种致凋亡因素作用于溶酶体,导致溶酶体膜通透性改变.溶酶体膜通透性改变能通过铁依赖的方式、脂褐素相关的方式、Bcl-2家族依赖的方式和Rho/ROCK途径-JNK信号通路的方式影响线粒体,造成线粒体膜通透性改变,进而启动细胞死亡.而线粒体膜通透性改变能通过ROS依赖的方式和Bcl-2家族依赖的方式引起溶酶体通透性改变,最终导致细胞死亡. 溶酶体线粒体轴理论还能用于解释非酒精性脂肪肝和溶酶体贮积症的发病机制.本文将对溶酶体线粒体轴理论及其与疾病的关系两方面进行阐述. 相似文献