两种毛蚜线粒体基因组比较分析

【目的】线粒体基因组分析已被应用于昆虫系统发育研究。本研究以蚜科Aphididae重要类群毛蚜亚科物种为代表,测定并比较分析了该类蚜虫的线粒体基因组特征,探讨了基于线粒体基因组信息的蚜虫系统发育关系重建。【方法】以毛蚜亚科三角枫多态毛蚜Periphyllus acerihabitans Zhang和针茅小毛蚜Chaetosiphella stipae Hille Ris Lambers,1947为研究对象,利用长短PCR相结合的方法测定线粒体基因组的序列,分析了基因组的基本特征;基于在线t RNAscan-SE Search Server搜索方法预测了t RNA的二级结构;基于12个物种(本研究获得的2个物种和10个Gen Bank上下载的物种数据)的蛋白编码基因(PCGs)序列,利用最大似然法和贝叶斯法重建了蚜科的系统发育关系。【结果】两种毛蚜均获得了约94%的线粒体基因组数据,P.acerihabitans获得了14 908 bp,控制区为1 205 bp;C.stipae获得了13 893 bp,控制区为609 bp。两种毛蚜同时获得33个基因,包含接近完整的13个蛋白编码基因(PCGs)(nad5不完整),18个tRNA,2个rRNA基因;ka/ks值表明,C.stipae的进化速率更快。从基因组组成、基因排列顺序、核苷酸组成分析、密码子使用情况、t RNA二级结构等特征来分析,两种蚜虫线粒体基因组基本特征相似。系统发育重建结果表明毛蚜亚科、蚜亚科的单系性得到了支持,毛蚜亚科位于蚜科的基部位置。【结论】两种毛蚜线粒体基因组的基本特征相似,符合蚜虫线粒体基因组的一般特征,两种线粒体基因组的长度差异主要来自控制区长度的不同;系统发育重建支持毛蚜亚科与蚜亚科的单系性,毛蚜亚科位于蚜科较为基部的位置。研究结果为蚜虫类系统发育重建提供了参考。     

拟南芥WRKY61转录因子的转录活性与互作蛋白分析

该研究采用双荧光素酶报告系统、酵母双杂交和双分子荧光互补实验,对拟南芥AtWRKY61的转录活性及与AtWRKY61转录因子的互作蛋白进行了分析,并用qRT-PCR方法分析AtWRKY61对多种非生物逆境的响应特征,为进一步揭示AtWRKY61的功能与分子调控机制奠定基础。绿色荧光蛋白介导的亚细胞定位分析显示,AtWRKY61定位于细胞核内;基于原生质体的双荧光素酶报告系统和酵母实验发现,AtWRKY61具有转录抑制活性。qRT-PCR分析表明,AtWRKY61对多种非生物逆境的处理具有明显的响应,可能是在多条信号通路中发挥作用。酵母双杂交与双分子荧光互补分析表明,AtWRKY61与自身以及同组的AtWRKY9和AtWRKY72存在互作关系,暗示可能通过形成WRKY复合物来行使特定的转录抑制功能。     

拟南芥中WRKY31转录因子的转录活性与互作蛋白分析

为深化对AtWRKY基因家族中功能尚未被报道成员的认识,探究拟南芥中WRKY转录因子基因在非生物逆境响应中的作用与可能的机制,通过对AtWRKY31进行亚细胞定位以及转录活性分析,并利用qRT-PCR检测AtWRKY31在不同逆境处理1、3和12 h后的表达变化,通过酵母双杂交(Y2H)和双分子荧光互补(BiFC)对其互作蛋白进行了筛选与验证。发现AtWRKY31定位于细胞核,具有转录抑制作用,且表达受热害、低钾、低氮等处理显著的抑制。此外,发现WRKY31可以与WRKY31、WRKY6和WRKY42在体内发生互作。拟南芥WRKY31作为一个转录抑制子,可能通过与WRKY6和WRKY42转录因子互作来参与调控对一些非生物逆境的应答。     

塑料胆道支架引流术治疗复杂性胆总管结石的临床研究

目的:探讨内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)下塑料胆道支架引流术治疗复杂性胆总管结石的临床疗效和安全性。方法:回顾性分析2011年9月至2013年9月在我院经ERCP下胆道支架引流术治疗的32例复杂性胆总管结石患者的临床病例资料。结果:32例患者塑料胆道支架引流术全部成功,平均手术时间15-30分钟。术后,2例发生高淀粉酶血症,经禁食72小时后恢复正常,无穿孔、消化道大出血等ERCP严重并发症发生。术后1周,患者腹痛、发热消失,转氨酶及胆红素水平明显下降,平均住院时间6-15天。3个月复查B超,发现结石缩小19例,结石碎裂1例,支架脱落1例。术后7天、术后3个月的肝功能指标与术前比较均显著改善,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:ERCP下塑料胆道支架引流术是一种复杂性胆总管结石安全有效的治疗方法,具有创伤小、风险较低、操作时间短、患者易耐受及手术成功率高等优点。     

舒芬太尼联合地塞米松对肺癌患者气管拔管时血流动力学的影响

目的：观察联合应用舒芬太尼和地塞米松对肺癌患者双腔支气管拔管时血流动力学的影响。方法：选择在全麻下行肺癌根治术的患者60例,ASA分级Ⅰ-Ⅱ级,随机分为三组,舒芬太尼组（s组）、舒芬太尼联合地塞米松组（SD组）和生理盐水组（N组）,每组20例。SD组于麻醉诱导前静脉推注10 mg地塞米松,手术结束前30 min静脉推注0.15μg/kg舒芬太尼;S组、N组分别于手术结束前30 min静脉推注0.15μg/kg舒芬太尼和2 mL生理盐水;记录麻醉诱导前（T0）、拔管即刻（T1）、拔管后3 min（T2）及拔管后5 min（T3）时的心率（HR）,平均动脉压（MAP）,并计算心率与收缩压的乘积（RPP）;术毕后麻醉恢复时间：自主呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间。结果：与麻醉诱导前（T0）相比,S组、SD组在手术拔管期各时间点的MAP,HR,RPP变化幅度明显低于N组（P〈0.05）;SD组较S组血流动力学更加平稳（P〈0.05）。S组、SD组虽然自主呼吸恢复时间和睁眼时间与N组比较有所延长,但拔管时间并无显著性差（P〉0.05）,且S组、SD组比较无统计学差异（P〉0.05）。结论：应用舒芬太尼联合地塞米松可以使双腔支气管导管拔管时的血流动力学更加平稳。     

利多卡因对老年胃癌根治术患者术后认知功能障碍的影响

目的:观察利多卡因对老年胃癌患者术后认知功能障碍的预防作用。方法:选择择期胃癌手术患者80例,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,性别不限,年龄大于等于60岁,BMI20-25 kg/m~2,随机分为2组(利多组和对照组):利多组40例,麻醉诱导前静脉给予利多卡因1.0 mg/kg,然后以1.5 mg/kg/h速率静脉输注至术毕前30 min;对照组40例,给予同等剂量和同等用法的生理盐水。术中维持BIS值在40-60。术后两组均行经静脉患者自控镇痛(patient controlled intravenous analgesia,PCIA),PCIA镇痛泵配法:两组均为芬太尼20μg/kg+生理盐水总量300 mL。观察并记录入室时刻(T_0)、气管插管即刻(T_1)、手术开皮即刻(T_2)、开皮后半小时(T_3)以及出手术室时刻(T4)的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脉搏氧饱和度(SpO_2)。记录术前1 d及术后6 h、1 d、2 d、3 d、7 d简易智能量表(mini-mental state examination,MMSE)评分并进行比较,术后评估并记录术后6 h、1 d、2 d、3 d及7 d静息和活动时视觉模拟评分(visual analogue scales,VAS)评分。结果:1与对照组比较,利多组术后6 h、1 d、2 d和3 d静息和活动时VAS疼痛评分均明显降低,差异有统计学意义(P0.05);2利多组4例发生认知功能障碍(10.0%),对照组13例发生认知功能障碍(32.5%),利多组认知功能障碍的发生率和持续时间较对照组明显降低(P0.05),差异均有统计学意义(P0.05)。结论:围术期静脉输注利多卡因可以预防老年胃癌根治术患者术后认知功能障碍,有利于减轻术后疼痛。