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乙肝病毒(HBV)引起的乙型肝炎是人们普遍关注的传染病,目前一般采用血清学方法进行临床检测。中国科学院武汉病毒研究所分子病毒室用α~(32)P—dCTP标记克隆化的HBVDNA片段作分子杂交探针,制备检测药盒,研究HBVDNA在人血清、体液和组织中存在的状态。以HBVDNA作为传染性的指标比血清学方法更为直接可靠。该药盒不需特殊试剂和设备,能在一般科研、医疗、卫生和防疫等部门应用。两年 相似文献
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采用缺口转移(Nick-translation)方法标记克隆化的乙型肝炎病毒(HBV)DNA制备探针,能特异地与HBV DNA杂交,在本实验条件下,其最低检测量为0.2pg,同位素参入率为23.5—67.0%,使用100μCi ~(32)P dCTP,比放射活性为10~8cpm//μg DNA左右。临床血清检测统计分析表明:HBV DNA与HBsAg、HBeAg、HBcAg、DNAP的阳性符合率分别为53.3%、69.7%、78.6%、81.7%,其灵敏性和特异性均比免疫学检测法高。 相似文献
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用限制性内切酶HindⅢ将斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA切割为A、B、C、D_1、D_2、E、F七个片段,与载体pUC18体外连接后转化大肠杆菌TG_1。通过“三明治“杂交法鉴定,分别获得七个片段的克隆株。但A片段克隆株中外源DNA片段发生了缺失。 相似文献
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草鱼出血病病毒的生长特性及高滴价培养 总被引:1,自引:0,他引:1
草鱼出血病病毒感染鱼肾(Clk)单层细胞后,产生明显的细胞病变,其繁殖周期为2—3天。病毒增殖的上升期在感染后的12—48小时。28℃下,当感染复数(Multiplicityof Infection简称MOI)为0.05PFU/cell时,病毒滴价可达1.78×10~(11)PFU/ml,不同温度(25℃、28℃、30℃)下通气培养,测定病毒滴价略有差异。感染病毒的细胞培养液经ELISA检测和电子显微镜观察均为阳性结果,并且能感染健康草鱼。 相似文献
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采用聚合酶链式反应(PCR)技术,对HPV-18序列中引物HP_1、HP_2之间的片段(F)进行扩增,通过两组阴、阳性对照实验证明扩增片段的特异性。用不同Mg浓度的缓冲系统进行PCR反应发现,缓冲系统中Mg浓度高低是影响HPV-18/HP_1、HP_2特异扩增的重要因素,高浓度Mg导致扩增特异性降低。对17例宫颈癌组织DNA进行PCR检测,有9例检出F片段,其检出率是53%,为HPV-18与宫颈癌的相关性提供证据。 相似文献
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本实验采用一种非放射性物质——碱性磷酸酶标记乙肝病毒HBV DNA制备分子探针。碱性磷酸酶在苯醌作用下与单链DNA联结,形成DNA和酶的共价复合物,即酶标探针。此探针通过分子杂交与待测DNA结合,与酶的底物作用显色,几小时内可观察结果,其最低检测量约为10pg。用此探针检测乙肝病人血清中的HBV DNA,与~(32)P标记的探针比较,酶标探针可检测出~(32)P标记探针检出率的95.7%。结果表明,所合成的酶标探针具有准确、简便、快速、安全而经济的优点,具有应用前景。 相似文献