有机化梨园节肢动物群落时间动态的聚类分析

对北京顺义地区有机化梨园中2个不同栽培区节肢动物总群落、害虫及天敌亚群落分别进行时间动态的系统聚类。结果表明,在同一园区内,稀植区和密植区均以木虱为优势种类,相对丰盛度分别达0.3801、0.3300。总群落的24次调查结果稀植区可聚为5类,D=1.87,密植区聚为3类,D=1.80;害虫亚群落调查结果,当两区D=1.80时,稀植区可聚为3类,密植区可聚为4类;天敌亚群落调查结果稀植区聚为4类,D=2.12,密植区聚为5类,D=1.75。在早春的密植区和入秋的稀植区木虱发生量大,应加强监测,及时防治。     

斑蝥素对草地贪夜蛾Sf9细胞膜完整性和膜电位的影响

为明确斑蝥素对昆虫细胞膜的作用及其机理, 本研究利用草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的卵巢细胞系Sf9细胞作为实验材料, 采用透射电子显微技术(transmission electron microscope , TEM)、 激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope, LSCM)结合荧光探针FDA/PI及DiBAC4(3)技术研究斑蝥素(cantharidin, CTD)对Sf9细胞膜完整性及膜电位（membrane potential, MP）的影响。结果表明： 32 μmol/L CTD处理6 h和12 h后, 电镜观察均未发现细胞膜结构破损; FDA/PI染色后, 32 μmol/L CTD处理0.5 h后细胞FDA荧光强度比对照显著降低(P<0.05), 碘化丙啶（propidium iodide, PI）染色的细胞比例与对照无显著性差异(P≥0.05)。32 μmol/L CTD处理140 s后即引起MP发生显著性去极化(P<0.05); 64 μmol/L CTD处理瞬时MP发生显著性去极化(P<0.05); 32 μmol/L CTD处理3 h内及64 μmol/L CTD处理2 h 内MP仍保持显著性去极化(P<0.05), 之后去极化程度降低; 32 μmol/L CTD处理6 h及64 μmol/L CTD处理3 h时MP去极化与对照组相比已无显著性差异(P≥0.05)。结果说明, CTD处理短时间内可引起Sf9细胞膜电位去极化并维持一段时间, 同时导致细胞活性发生不可逆下降, 但未对细胞膜结构完整性产生破坏。     

斑蝥素与去甲斑蝥素对昆虫细胞Sf9抑制作用比较

为探索斑蝥素的类似物去甲斑蝥素对昆虫的毒杀机理,本研究利用草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢细胞系Sf9细胞作为实验材料,采用CCK-8法和AO/EB荧光染色法比较了斑蝥素(CTD)和去甲斑蝥素(NCTD)对细胞的增殖抑制和抑制方式。结果显示,3.125μg/mL的CTD处理细胞抑制率6h为20.00±1.10%,24h为66.33±0.81%;50μg/mL的CTD处理细胞抑制率6h为42.69±6.34%,24h为74.60±1.51%。3.125μg/mL的NCTD处理细胞抑制率6h为10.03±1.72%,24h为21.75±6.22%;50μg/mL的NCTD处理细胞抑制率6h为40.79±1.32%,24h为66.08±3.32%。结果表明,CTD与NCTD均能有效抑制Sf9细胞增殖和诱导细胞凋亡,且抑制率呈现出时间、剂量依赖性,较高剂量NCTD可以替代CTD达到相同效果。     

斑蝥素对小菜蛾体壁组织结构的影响

为探究昆虫天然产物斑蝥素(cantharitin,CTD)对鳞翅目昆虫小菜蛾Plutella xylostella(L.)的触杀机制,利用透射电子显微镜观察了该物质处理小菜蛾4龄幼虫体壁组织结构的变化。斑蝥素亚致死剂量0.15μg/头和半致死剂量0.3μg/头点滴处理试虫前胸背板,中毒试虫反映结果类似。处理12h后中毒试虫虫体发黑,陆续死亡。处理12h后,体壁细胞细胞核固缩并且边极化,线粒体扭曲,内脊模糊出现空泡化,线粒体和粗面内质网数量下降;处理24h后,体壁细胞出现的类似处理12h后的症状,且症状更为明显。结果表明CTD对小菜蛾体壁表皮层组织结构无显著破坏作用,但对体壁细胞有明显的致毒作用。