艾滋病—1（HIV—1）的性传播

艾滋病—１（ＨＩＶ—１）的传播途径有性接触、血液接触和母婴传播,性传播是ＨＩＶ—１流行性传播的主要途径。ＨＩＶ—１经性接触传播占全球３３４０万ＨＩＶ—感染者的７５％以上。对ＨＩＶ—１的性传播的研究,为预防ＨＩＶ—１经性接触传播有重要意义。本文分析了Ｈ...     

聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子的药效学研究

比较研究聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)与重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)升高环磷酰胺所致外周血白细胞降低的Blab/c小鼠的白细胞效果.结果显示一次注射聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子与多次注射重组人粒细胞集落刺激因子的药效作用相当,且各剂量间呈良好的量效关系.     

聚乙二醇修饰重组人生长激素的初步研究

目的 探讨聚乙二醇(MW20kD)修饰重组人生长激素(rhGH)的反应条件以及修饰产物的纯化方法。方法在不同条件下,将聚乙二醇活性酯与rhGH反应,以单个PEG-GH的比例为指标,用SDS-PACE和薄层扫描方法,确定其在反应产物中所占的比例;采用CM-Sepharose FF离子交换和Sephacry 1S-200分子筛凝胶层析法对修饰产物进行分离纯化。结果聚乙二醇修饰rhGH的反应条件为pH8．0、rhGH与聚乙二醇的比例1：2(mg：mg)、反应时间2．0h;反应产物经两步纯化,所得的单个PEG-GH纯度大于95％。结论 初步确定了聚乙二醇修饰rhGH的反应条件和修饰产物的纯化方法。     

脂质体——一种理想的抗HIV药物载体

脂质体——一种理想的抗ＨＩＶ药物载体戎隆富秦德安（华东师范大学生物系,上海２０００６２）关键词脂质体抗ＨＩＶ药物针对ＡＩＤＳ的致病病毒ＨＩＶ（Ⅰ型和Ⅱ型）复制周期中的不同阶段,已研制出多类抗ＨＩＶ药物,如：阻断ＨＩＶ与靶细胞（ＣＤ＋４Ｔ细胞、神经胶质...     

盐酸米托蒽醌聚乙二醇化脂质体的制备及包封率考察

目的:制备盐酸米托蒽醌聚乙二醇化(PEG化)脂质体,建立包封率测定方法.方法:采用乙醇注入结合高压均质法制备空白PEG化脂质体;以铵根离子梯度法进行主动载药制备盐酸米托蒽醌PEG化脂质体;采用G-25葡聚糖凝胶色谱分离脂质体和游离药物;使用紫外-可见分光光度法测定脂质体的包封率.结果:空白脂质体平均粒径为88.7nm,载药后粒径为95.3nm;在所建立色谱条件下,脂质体与游离米托蒽醌分离良好;盐酸米托蒽醌在0.5～10μg·ml-1范围内线性关系良好(R 2=0.9997),精密度高;脂质体的平均包封率大于96％.结论:乙醇注入-高压均质法结合铵根离子主动载药法适用于制备盐酸米托蒽醌PEG化脂质体;所建立分析方法简单快捷、准确可靠,可用于盐酸米托蒽醌长循环脂质体包封率的测定.     

不同方法测定聚乙二醇化天花粉蛋白的修饰度

目的:建立测定PEG化天花粉蛋白修饰度的方法.方法:利用电泳法初步确定PEG-TCS的分子量、用质谱法进行验证;通过TNBS法和荧光胺法测定其修饰度.结果:从质谱法和电泳法可知PEG-TCS的理论修饰度为9.0909%,TNBS法测得的修饰度为9.8613%%,荧光胺法所测得值为8.5955%.TNBS法测定结果尽管偏大,但是操作简单,不需要专门的仪器;荧光胺法需要荧光分光光度计,且丙酮易挥发.结论:TNBS法可作为测定PEG-TCS修饰度的方法.     

不同方法测定聚乙二醇化重组人干扰素α-2b注射液的纯度

目的:建立聚乙二醇化重组人干扰素α-2b(PEG.rhIFNα-2b)注射液纯度测定方法.方法:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE),对凝胶银染并扫描;采用体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC),使用TSK G3000SW(7.8mm× 300mm)凝胶柱,流动相:0.2 mol·L-1PB-0.2 mol·L-1NaCl-异丙醇(48.5/48.5/3,v/v);流速:0.6 ml·min-1;检测波长:280 nm;采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),使用C8(4.6mm×250mm)色谱柱,流动相:A液:0.1%三氟乙酸溶液;B液:95%乙腈的A液,梯度:0%～100%B(30min);流速:1mL·min-1;检测波长:214nm.结果:三种方法测得PEG-rhIFNα-2b的纯度分别为100%、100%、98.90%.结论:三种方法均适用于PEG.rhIFNα-2b注射液纯度测定,检测结果符合生物制品质量控制规定.     

重组人生长激素——一种新的治疗艾滋病的药物

自１９９６年第１１届世界艾滋病大会美籍华人何大一教授提出：“鸡尾酒疗法”治疗艾滋病（ＡｃｑｕｉｒｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙＳｙｎｄｒｏｍｅ,ＡＩＤＳ）以来,在临床治疗艾滋病上取得了明显的疗效。高效抗病毒治疗（ＨｉｇｈｌｙＡｃｔｉｖｅＡｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉａｌＴｈｅｒａｐｙ,ＨＡＡＲＴ）,即逆转录酶抑制剂加蛋白酶抑制剂可以在很大程度上抑制病毒的复制,使病人血浆中病毒载量降低到检测不到的程度。１９９８年第１２届世界艾滋病大会报告表明,高效抗病毒治疗不可能彻底清除体内的病毒,在病毒潜伏感染…     

聚乙二醇化重组人干扰素α-2b体外抗乙肝病毒作用的研究

研究聚乙二醇化重组人干扰素α-2b（PEG-IFN）和重组人干扰素α-2b（IFN）的体外抗乙型肝炎病毒作用。以HepG2.2.15为细胞模型,采用MTT法考察两种药物对细胞的毒性作用;分别以高、中、低剂量的PEG-IFN和IFN每隔一日反复作用细胞,连续8d,采用ELISA法测定细胞上清液中的HBsAg来考察两种药物对病毒的抑制作用;将相同剂量的PEG-IFN和IFN模拟临床给药频率作用细胞一周,即PEG-IFN给药1次,IFN给药3次,观察细胞HBsAg的分泌情况,评价药效。PEG-IFN和IFN的TC50均〉20000IU/mL,IC50分别为559.88、478.71IU/mL;反复给药时,高、中、低3个剂量组的PEG-IFN对病毒的抑制作用略低于同剂量的IFN;模拟临床给药一周后发现,PEG-IFN与IFN对病毒的抑制作用无明显差异。PEG-IFN和IFN在体外均可抑制HepG2.2.15细胞乙肝病毒的表达。     

重组人粒细胞集落刺激因子的表达、纯化以及PEG修饰

重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)经大肠杆菌温度诱导表达后,其表达产物以包涵体形式存在,包涵体经过变性、复性和分离纯化等步骤处理后得到纯化的rhG-CSF.在一定的实验条件下用单甲氧基聚乙二醇活性酯(mPEG20k-NHS)对rhG-CSF进行化学修饰,所得修饰产物经分离纯化后获得PEG20K-rhG-CSF偶联物.与修饰前的rhG-CSF相比较,尽管修饰后的rhG-CSF体外生物学活性下降至修饰前的20%左右,但其在体内的作用时间能够得到显著的延长,药效有了明显提高.