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本文研究了无血清培养高密度猪肝细胞的形态和功能变化。将分离的肝细胞以高密度(1×10~7/ml)培养在含激素、多种生长因子和营养成分的无血清培养基中,动态观察培养7天中肝细胞形态、活率、蛋白质合成功能、G-6-Pase活性、安定转化功能及LDH含量;同时以无血清培养低密度(5×10~5/ml)肝细胞作为对照组。研究结果表明:高密度培养的 肝细胞各项功能较低密度培养的肝细胞为低;高密度培养的肝细胞的形态、蛋白质合成功能在培养7天中保持稳定;活率随着培养时间的延长而下降,但均高于90%;安定转化功能在培养第2、3天最强;G-6-Pase活性在培养1天后明显下降,然后维持在较低水平;LDH含量在第1、2、3天较高。 相似文献
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探讨望江南总蒽醌苷(CSAG)的抗肿瘤作用及其作用机制.利用MTT法检测望江南总蒽醌苷对肝癌细胞HepS、肺癌细胞(A549)、小鼠肉瘤(S180)腹水型肿瘤细胞等肿瘤细胞和人正常肝细胞L-02增殖的影响;实体瘤称重法测定CSAG对肝癌(HepS)实体瘤的抑制情况,将接种肿瘤的小鼠分成5组,每组6只小鼠,雌雄各半,给药12 d,停药后24 h处死动物,秤鼠体重,剥离出肿瘤,秤瘤重,测定生化指标.结果显示,CSAG对以上肿瘤细胞的增殖均有抑制作用,对肝癌细胞荷瘤小鼠肿瘤生长具有明显的抑制作用;同时可增加胸腺指数和脾指数.因此,CSAG具有明显的抗肿瘤效果,其抗肿瘤作用可能与提高机体免疫力和诱导细胞凋亡有关. 相似文献
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猪胸腺激素对淋巴细胞DNA复制和转录的刺激作用 总被引:1,自引:0,他引:1
胸腺激素可促进T细胞成熟分化,调节免疫细胞功能,因而在免疫中起重要作用。T细胞在成熟过程中,将出现Lyt 1,2,3及绵羊红血球受体等表面标志和TDT。本研究以~3H-TdR和~3H-Leu掺入试验观察猪胸腺激素PTH和DNA复制及蛋白质合成的关系,以玫瑰花结及TDT为标志研究PTH在T细胞成熟中的作用。 相似文献
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小牛类表皮生长因子活性肽(c-EGF)的分离纯化及性质 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道小牛颌下腺通过酸抽提、CM52、DE52柱层析、SephadexG75凝胶过滤及HPLC等步,分离纯化到一个分子量为6kD,等电点为4.6的小肽。该小肽类似人重组表皮生长因子(rh—EGF)的生物活性,具有刺激NRK细胞的增殖及刺激新生小鼠的睁眼、萌牙,并具有增加A431细胞膜蛋白质磷酸化的功能。氨基酸组成缺少苯丙氨酸及苏氨酸残基。我们命名它为小牛类EGF样活性肽(calfEGF-likeactivepeptide,简称c-EGF)。 相似文献
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本文对乳猪肝细胞短期培养后冻存法和直接冻存法进行比较。采用改良原位两步胶原酶灌注法分离乳猪肝细胞,将肝细胞接种到含10%DMSO、激素、生长因子和10%NBS的RPM1 1640培养基中,用阶段性冻存法保存肝细胞,分别对直接冻存和培养后冻存10天、20天复苏的肝细胞进行培养,动态观察其活率和功能。研究结果表明各组复苏后的肝细胞均保持较高的活率;短期培养后冻存组肝细胞活率、G-6-Pase活性、白蛋白和葡萄糖合成功能及安定转化能力均较直接冻存组为高;LDH活性低于直接冻存组;冻存时间的长短对其白蛋白、尿素和葡萄糖合成功能有一定影响。因此,短期培养后冻存法较直接冻存法为好。 相似文献
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海滨锦葵块根皂苷及多糖的分离、纯化及对细胞增殖活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道了海滨锦葵块根中皂苷及多糖的分离、纯化方法,以及皂苷的体外抑制肿瘤细胞增殖活性、多糖的免疫活性的检测.采用超声波法对块根中的皂苷和多糖进行粗提;通过大孔树脂柱层析法对得到的皂苷粗提取物进行纯化;皂苷经酸解得到皂苷元部分;采用DEAE-纤维素柱层析对粗多糖溶液进行提纯.利用MTT比色法测定皂苷对肿瘤细胞HepS增殖的影响以及多糖对胸腺淋巴细胞、脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明,海滨锦葵块根皂苷提取率为0.089%,粗多糖提取率为5.10%;海滨锦葵块根皂苷及皂苷元有抑制HepS增殖的作用,皂苷元效果更好;海滨锦葵块根多糖能显著促进淋巴细胞体外增殖,增强体液免疫力. 相似文献
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胸腺激素可促进T淋巴细胞的成熟,因此在细胞免疫功能中起着十分重要的作用,本文报道了以~(125)Ⅰ-胸腺激素T_1的放射受体测定法研究猪胸腺激素T_1受体的初步结果。结果指出胸腺淋巴细胞的表面有胸腺激素受体,在pH6.0,37℃条件下,激素与淋巴细胞孵育60~90分钟,特异性结合可达最高。向结合系统中加入胰岛素、皮质激素或甲状腺素,不影响胸腺激素T_1与受体的结合,证明这种结合是专一的。但在胸腺激素各个组分间,这种专一性并不是很严格,例如胸腺激素E_1的性质与T_1有很大差别,但可以和T_1竞争受体。E_1和T_1可以竞争同一受体是否暗示它们作用于同一T细胞亚群,有待证实。胸腺激素与受体的结合能力与它的生物活力是相关的,T_1的活力随胰蛋白酶的消化而逐渐丧失,相应的T_1与受体结合的能力亦逐渐降低至零。所以用放射受体的方法测定的胸腺激素是代表有生物活力的部分,它的测定范围一般在10~1000毫微克之间。 相似文献
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用正常人胎肺细胞体外培养,从其培养液中分离纤溶酶原活化物(PA),通过CM-SephadexC-50层析,硫酸铵沉淀和Fibrin-Sepharose,Lysine-Sepharose亲和层析及SephadexG-50凝胶过滤等步骤,从10.5l条件培养液中分离纯化得到两种类型的纤溶酶原活化物,t-PA90μg,u-PA800μg.在还原条件下SDS-PAGE均显示单带,分子量t-PA为72kD,u-PA为54kD,纤溶比活分别为156000IU/mg蛋白和106000IU/mg蛋白. 相似文献
10.
从猪胸腺分离到一种低分子量T淋巴细胞抑裂素,经凝胶过滤测定分子量约为1200;等电聚焦显示二条带,等电点分别为6.6和7.2,此抑制素不是多胺类物质;蛋白酶处理可使之丧失抑制活性,核糖核酸酶处理不影响活性,证明为多肽物质;抑裂素在体外具有抑制淋巴细胞转化及刺激白介素-2产生的能力;这种抑制作用证明不是由于细胞毒所引起的;抑制是可逆的.体内试验此抑裂素可以抑制多种免疫反应,是一种有希望的免疫抑制剂 相似文献