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SpyTagr和SpyCatche可通过自发反应形成共价键,产生稳定的分子自组装体。酶分子自组装体因具有高效有序的催化特性在合成生物学和纳米技术领域具有重要的应用价值。为探索SpyTag/SpyCatcher在大肠杆菌胞内多酶复合体系形成有序自组装分子能力,将SpyTagr和SpyCatche分别与P450BM3m单加氧酶和葡萄糖脱氢酶GDH进行融合表达,以期产生具有辅酶再生循环系统、高效生物合成靛蓝分子的SpyTag/SpyCatcher双酶自组装复合体。首先,通过电泳及质谱对重组工程菌表达蛋白进行分析,证实SpyCatcher-P450BM3m与SpyTag-GDH在胞内成功形成了自组装多酶复合体;然后,系统分析不同培养条件下组装体合成靛蓝的能力。结果发现,经0.5mmol/L IPTG诱导后,菌体在16℃继续培养18h后,工程菌对吲哚(2mmol/L)与葡萄糖(4mmol/L)的全细胞催化能力最强,靛蓝产量最高达258mg/L,是未组装多酶系统的1.9倍,比P450BM3m单酶表达系统高约2.4倍;反应70min后达到反应平衡,转化率为52%。成功实现了SpyTag/SpyCatcher介导的多酶体系在大肠杆菌细胞中的自组装和高效转化体系,为胞内多酶复合物组装体的设计提供了新思路。 相似文献
2.
以上海市中心城区典型排水区域为研究对象,基于SWMM模型连续模拟2009—2011年降雨径流,分析区域235场降雨及地表径流特征.结果表明: 该区域发生频率较高的降雨具有雨量小、强度低的特点,雨量为0~10 mm、平均降雨强度为0~5 mm·h-1、降雨峰值为0~10 mm·h-1的降雨发生频率最大,分别占所有研究降雨场次的66.4%、88.8%和79.6%,这对于该区域应用低影响开发措施削减小雨量或低强度降雨下的径流和面源污染具有重要意义;径流量总体随着降雨量增大而增大,区域降雨产流临界值不仅与降雨量有关,还与平均降雨强度和降雨历时有关,2 mm以下的降雨基本不产流;2~4 mm的降雨如降雨强度在1.6 mm·h-1以下,产流量不到1 mm,当降雨量在4 mm以上、平均降雨强度大于1.6 mm·h-1时,区域基本产流.基于SWMM径流模拟结果,建立适合该区域的径流量与降雨因子的回归方程,其调整R2均大于0.97,能较好反映该区域径流量与降雨因子的关系.研究结果可为该区域更好地规划低影响开发措施和削减排水系统溢流污染提供计算基础,并为类似区域的径流研究提供参考. 相似文献
3.
目的:研究超声骨刀开窗术联合正畸牵引治疗上颌唇侧埋伏阻生尖牙的临床疗效。方法:选取2013年7月到2015年4月我院收治的上颌唇侧埋伏阻生尖牙患者110例,按照随机数字表法将患者分为研究组和对照组,每组55例,研究组给予超声骨刀开窗术联合正畸牵引治疗,对照组给予传统开窗联合正畸牵引治疗,比较两组临床疗效。结果:研究组总有效率92.7%,对照组总有效率90.9%,两组比较差异无统计学意义(P0.05);研究组一次粘结成功率85.5%显著高于对照组的52.7%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05);研究组术后疼痛和肿胀程度均显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:超声骨刀开窗术联合正畸牵引治疗上颌唇侧埋伏阻生尖牙疗效良好,且能显著降低术后反应。 相似文献
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张璐萍阚氏海刘洪付周帅赵冬梅冯国营黄飞 《现代生物医学进展》2012,12(16):3093-3094
随着科学技术的发展,研究生教育在教学工作中的地位日渐突出。为了提高研究生培养质量,充分发挥研究生主观能动性,达到促进交流、活跃学术、培养研究生创新能力的目的,开展丰富多彩的研究生学术论坛活动势在必行。本研究通过问卷调查的方式对我校研究生学术论坛开展现状进行了分析,从结果可以看出大部分研究生对待研究生论坛的态度是积极的,同时,大多数研究生对研究生论坛的期望值是很高的,但是,仍有少部分研究生对待研究生论坛存在消极态度,我们应该清醒的认识到目前研究生论坛存在的不足,及时调整研究生学术论坛活动内容和形式,充分调动每一位研究生的积极性和创造性。 相似文献
5.
DELLA蛋白属于植物特异性GRAS家族,是植物生长的负调控因子。为揭示橡胶树DELLA基因在橡胶树生长发育中的分子调控机制,本研究从橡胶树热研7-33-97中克隆HbRGL1的cDNA全长序列,含1 851 bp的ORF,编码616个氨基酸。生物信息学分析表明HbRGL1属于不稳定的亲水蛋白,定位在细胞核上,含有DELLA和GRAS保守结构域。系统进化关系分析表明HbRGL1与橡胶树HbGAIL、木薯MeGAIL、蓖麻RcGAI、麻风树JcGAI聚为一类。qRT-PCR分析表明HbRGL1在橡胶树不同组织中的表达量差异显著,在花中的表达量最高。在生长素(IAA)、乙烯利(ET)和脱落酸(ABA)等不同激素处理叶片中HbRGL1表达量均呈现显著上调趋势,尤其对赤霉素(GA3)的应答具有反应快速且上调表达倍数最高。本研究为进一步阐明HbRGL1在橡胶树生长发育中的功能奠定理论基础。 相似文献
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土壤与大气双重胁迫下苋菜幼苗对铅的累积与生理响应 总被引:1,自引:0,他引:1
土壤污染被普遍认为是农作物Pb的主要来源,但是针对大气沉降与土壤对作物胁迫效应的研究相对较少。通过喷洒Pb溶液和Pb污染土壤盆栽试验,模拟研究大气和土壤不同Pb污染源胁迫对苋菜幼苗生长发育和生理生化特征的影响,以及Pb在其体内的累积和化学形态。结果表明,大气和土壤Pb胁迫都能显著提高苋菜幼苗Pb含量,其中土壤影响占62.64%,大气影响占32.89%。不溶性磷酸盐和果胶、蛋白结合态是Pb的主要化学形态。单独大气Pb胁迫促进了苋菜幼苗的生长和可溶性蛋白质的合成,而土壤Pb胁迫则为抑制作用,主要表现为H2O2和MDA含量增加,造成细胞膜系统损伤。抗氧化酶(SOD、POD、CAT)和抗氧化剂(AsA、GSH)对土壤和大气Pb胁迫均表现出积极有效的响应。研究结果可为大气和土壤重金属共同胁迫地区农作物的环境风险评价以及污染防治提供重要的科学依据。 相似文献
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以受1对显性基因控制的单显性细胞核雄性不育油菜为材料,运用蛋白双向电泳技术对初花期不育花蕾和可育花蕾中蛋白质表达差异进行分析.结果表明,可育花蕾中表达的蛋白质总点数高于不育系.不育花蕾和可育花蕾中共有的蛋白点为223个,不育花蕾特有的蛋白质点数为103个,而可育花蕾中特有的蛋白质点数为160个.可育花蕾中表达的特有蛋白质分子量主要分布在60kD以下的小分子量区域,30kD尤为丰富;不育花蕾中表达的特有蛋白按分子量分布相对均匀.两者表达特有蛋白都相对集中在pI6.0~7.5区域,多为中性蛋白. 相似文献
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颞下颌关节紊乱病是慢性面部疼痛最常见的诱因,常常与躯体和心理主诉症状密切联系,包括疲劳,睡眠失调,焦虑和抑郁等。即使未发现任何能够合理解释疼痛原因的时候,健康专业人士也常常忽略疼痛感受的主观性。从严格的生物医学角度来讲,对疼痛的这种理解是不科学的。本文的主要目的是通过查阅近年来大量的研究文献资料,发现应激引起疼痛感觉的生物学途径以及导致颞下颌关节紊乱的原因。研究发现下丘脑-垂体-肾上腺轴、5-羟色胺和阿片样物质通路都与颌面部疼痛的发病密切相关,同时也提出了未来可能使用的治疗方法。同时,也希望本文能把与疼痛学科差别较大的口腔医学融入到需要多学科合作的颞下颌关节紊乱的诊断和治疗中,从科学角度提高对该病的临床诊疗效率。 相似文献
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目的:比较2种不同的纤维桩粘接剂在桩-核-冠修复方法修复前牙残冠残根的临床疗效.方法:对近2年内的78名96例经过完善根管治疗的上前牙残冠、残根的患者,选用2种不同的粘接材料(3M ESPE RelyX Unicem粘接剂和Panavia F粘接剂)对PD(Produits Dentaires SA)纤维桩进行粘接、3M ESPE Kiltek Z350树脂等材料修复,并经过2年的随访观察,评估2种治疗方法的疗效.结果:经过2年的随访调查发现,96例患牙中仅在半年时出现了1例修复体折断(使用Panavia F粘接法),其余95例均未出现纤维桩的松动、脱落,无根折、桩折现象.结论:纤维桩修复残冠、残根是一种操作简便、省时、临床疗效好的修复方法;3Municem和PanaviaF粘接剂均可以有效防止纤维桩在修复上前牙残冠、残根中的松动、脱落现象,均是有效的粘接手段. 相似文献
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目的:掌握大型医院神经内科医疗服务半径基本情况及变化趋势,为科室健康发展、合理配置医疗资源提供科学依据,以此为基础建立一个临床科室服务半径的分析模型。方法:对神经内科2007年1月1日-2010年12月31日住院病人的基本信息分类统计分析。结果:在2007-2010年收治的26528例地方患者中,男性患者多于女性;60岁以上老年人居多;本市住院病人数量呈逐年下降的趋势,而距离西安市较远的地区和外省病人数量呈逐年上升趋势。结论:分析住院患者人群分布特点,合理有效的配置卫生资源,为制定科室未来发展决策提供科学依据。 相似文献