大鼠肾脏组织cDNA文库的制备和葡萄糖转运蛋白cDNA克隆的筛选

 大鼠的肾脏组织经匀浆后,提取纯化总RNA和mRNA合成cDNA,进行甲基化,加人工接头,最后连入载体(λgt11)和外壳蛋白包装步骤制成肾脏组织的cDNA文库。插入载体的cDNA长度为0.5kb到8kb之间。经反复稀释,测定出该文库的效价为1.5×10~7pfu/mL。     

番茄属(Lycopersicon)四个种的过氧化物酶同工酶分析

本文报告了应用连续浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳对番茄属Lyco-persicon的四个种:秘鲁番茄L.peruviaunm Mill.,多毛番茄L.hirsutum Humb.et Bonp,醋栗番茄L.pimpinellifolium(Jusl)Mill和普通番茄L.esculentum Mill.的86份材料,15个不同生育时期,不同器官以及同一器官的不同部位的过氧化物酶同工酶的分析结果。结果表明:L.Peruvianum的各个生育期和不同器官的过氧化物酶同工酶谱带叠加共有28条带,L.hirsutum有29条带,L.pimpinellifolium有28条带,L.esculentum有27条带。种间过氧化物酶同工酶谱型差异明显,种内不同生育期叠加总酶谱基本一致。在根、茎和叶中,这四个种的过氧化物酶同工酶酶谱和活性具有相似的生育期变化规律和器官分布规律.在果实发育过程中,种间过氧化物酶同工酶酶谱、活性及变化律规都不相同。 本文还就同工酶谱型相似值的意义,野生资源及同工酶分析技术在番茄育种中的应用等问题进行了讨论。     

人参总皂苷对K562细胞促红细胞生成素受体的作用

目的:研究人参总皂苷(TSPG)对人红白血病细胞株(K562)促红细胞生成素受体(EpoR)的作用.方法:以50、100、200、300、500mg/L TSPG刺激K562细胞24h,采用流式细胞仪检测细胞膜EpoR表达的变化;Elisa检测K562细胞膜、细胞浆EpoR表达量的改变;激光共聚焦显微镜观察K562细胞EpoR表达的分布.结果:以不同剂量,TSPG作用K562细胞24h,流式细胞仪检测显示K562细胞膜表面EpoR呈剂量依赖性下降;细胞Elisa实验结果也显示K562细胞膜表面EpoR表达呈剂量依赖性下降,而细胞浆内EpoR表达呈剂量依赖性增加;激光共聚焦显微镜观察可见K562细胞经200mg/L TSPG作用24h后其膜上的EpoR数量明显减少,荧光强度明显减弱.结论:TSPG可使K562细胞浆EpoR的表达增强,且随着剂量的加大更加明显,而使细胞膜中EpoR的表达减少,这可能是,TSPG抑制K562细胞增殖的作用机制之一.     

广西黄冕林场次生常绿阔叶林生物量及净第一性生产力

应用相对生长法和样方收获法,测定了广西黄冕林场天然次生常绿阔叶林的地上、地下生物量及林分净第一性生产力．阔叶林总生物量为99．96t·hm^-2,其中地上部分占69．41％,地下部分(根系)占30．59％．林分叶面积指数为6．50．全林净第一性生产力为24．65t·hm^-2·年^-1,其中地上部分占44．54％。根系占55．46％．     

番茄芽期过氧化物酶同工酶与杂种优势的关系

同工酶结构的差异主要反映了基因的差 异,所以,同工酶分析方法成为现代遗传学研究 的一个有力工具。自1959年Markert和Mo1- ler^[8]首先提出了同工酶概念后,至今这一工作 已得到广泛开展^[1,2,7,9-11]     

IPsaur-ipt基因转化番茄的过氧化物酶同工酶分析

将整合在Ｔｉ质粒上的Ｐｓａｕｒ基因（生长素调节基因和细胞激动素合成酶基因的融合基因）通过花粉管通道法导入番茄品种中蔬四号、强力米寿、粉红甜肉、ＵＳ—Ⅰ、ＵＳ—Ⅱ中。对Ｄ１代转基因番茄用聚丙稀酰凝胶电泳方法进行过氧化物酶同工分析。结果表明,转基因番茄与对照植株的过氧化物酶同工酶谱带有明显差异,谱带多少和强弱都有所不同,而且相应地出现了植株形态学上的差异。间接验证了外源ＤＮＡ的导入。说明同工酶分析方法和田间形态学检测可作为转基因植株早期筛选的有效方法     

用反义技术解决番茄保鲜的研究进展

目前发现20多种与果实发育有关的酶和蛋白,其中14种mRNA在果实成熟过程中增加,8种受乙烯诱导,相关的基因已被克隆、测序并在染色体上定位．利用反义技术抑制这些酶和蛋白的表达,一方面可研究它们在果实成熟过程中的作用,另一方面从分子水平上解决了番茄保鲜问题．已将7种反义基因导入番茄,反义果实在离体条件下可保鲜90～120d．     

番茄苹果酸脱氢酶同工酶分析

植物细胞内存在着苹果酸脱氢酶(MDH)的同工酶,催化苹果酶草酰乙酸反应。目前认为,MDH同工酶存在于不同的亚细胞结构中,参与不同的代谢途径。细胞质中的可溶性MDH与丙酮酸羧化支路相联系,与非自养性的二氧化碳固定有关;线粒体中的MDH催化三羧酸循环的一个步骤;微体中的MDH则与光呼吸或乙醛酸循环有关;而叶绿体中的MDH(其辅酶是NADP)和光合作用有关。可见MDH与植物生理代谢的多条重要途径密切相关。因此,分析MDH同工酶对于探讨植物的正常生理和病理是必要的。菠菜、玉米、小麦等植     

分子克隆中使用的其他酶(续)

除限制性内切酶外,还有许多其他酶在分子克隆中被广泛应用,其性质将在下面给出。对有些酶,我们给出其详细的反应步骤与条件,而另一酶,我们给出文献,请读者自己找出其反应条件。为完整起见,在这里还介绍了分子克隆中几种不常见酶的性质,     

广东车八岭

车八岭生物圈保护区位于广东省始兴县,总面积161平方公里,以保护中亚热带常绿阔叶林及珍稀动植物为主。2007年加入联合国教科文组织世界生物圈保护区网络。驾车路线：京珠高速→韶关北站→粤赣高速→始兴县城→省道343→县道346→车八岭保护区。