厚壳贻贝足丝盘黏附蛋白mcofp-3的重组真核表达

厚壳贻贝(Mytilus coruscus)黏附蛋白分子mcofp-3(M.coruscusfoot protein-3)主要分布于贻贝足丝盘,贻贝在水环境下的黏附过程中起到关键作用,但因其难溶于水且在贻贝足丝盘中含量极低,故妨碍了对其进行深入研究。为建立厚壳贻贝足丝蛋白mcofp-3的真核表达体系,并获得足够的mcofp-3黏附蛋白进行后续研究,采用酵母表达体系对mcofp-3进行了重组表达。通过PCR方法克隆厚壳贻贝的mcofp-3基因,构建mcofp-3的酵母真核表达载体pVT102U/α/mcofp-3,鉴定结果表明,重组表达质粒pVT102U/α/mcofp-3由真核载体pVT102U/α和mcofp-3的成熟肽DNA片段组成,插入的mcofp-3成熟肽DNA片段与预期序列完全一致;采用LiAC转化法将重组表达质粒转化到S78酿酒酵母中,经过RT-PCR分析以及1.0%的琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明,重组的mcofp-3得到了成功的转录;发酵菌液经阳离子交换柱及高效液相色谱分离,以及Tris-Tricine-SDS-PAGE检测,结果表明,重组的厚壳贻贝黏附蛋白分子mcofp-3得到了成功表达,表达...     

格尔德霉素生物合成与结构改良研究进展

格尔德霉素是以Hsp90为靶目标的安莎类抗生素,具有多种生物活性。其抗肿瘤活性使其成为目前肿瘤治疗领域的研究热点。综述了格尔德霉素生物合成及结构改良研究进展,并对其作为新型抗肿瘤药物的未来发展方向进行了讨论。     

吸附霍乱菌苗免疫后人群血清杀弧菌抗体观察

本文介绍了用霍乱杀弧菌抗体微量法,检测经Ｏ１型吸附霍乱菌苗免疫前后人群的Ｏ１型霍乱和Ｏ１３９型霍乱的血清杀弧菌抗体。结果表明,免前人群的Ｉｎａｂａ、Ｏｇａｗａ、Ｏ１３９型三种自然杀弧菌抗体很低（ＧＭＴ在５．４９以下）,免后Ｉｎａｂａ和Ｏｇａｗａ型杀弧菌抗体大幅度增加,ＧＭＴ分别达到７８２和５９２、Ｏ１３９型霍乱杀弧菌抗体免疫前后无变化     

浑球红细菌谷氨酸合酶小亚单位基因的序列分析

本文测定了浑球红细胞菌Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｒ ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ谷氨酸合酶小亚单位基因及其５’端和３‘端的序列,全长为２３８７ｂｐ。序列分析表明Ｒ．ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ ｇｌｔＤ基因全长为１２４２ｂｐ。从核苷酸序列推测其蛋白质分子量约为４４ｋＤ。Ｒ．ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ ｇｌｔＤ基因与Ａｚｏａｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ和Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ的ｇｌｔＤ基因ＤＮＡ序列有     

LuxR家族调控蛋白的结构及功能

LuxR家族调控蛋白是一类在革兰氏阴性细菌群体感应中起重要作用的调控蛋白,它们参与由酰基高丝氨酸内酯介导的多种生物学过程,调控细菌生物发光、质粒转移、生物膜形成以及多种胞外酶、毒力因子和次生代谢产物的合成。LuxR家族蛋白的研究在医学、环境监测、生物防治和微生物发酵等方面具有巨大的应用潜力。该文综述了LuxR家族调控蛋白近期的研究进展、存在问题及应用前景。     

厚壳贻贝低分子量足丝蛋白的初步鉴定(英文)

足丝蛋白是贻贝科(Mytilidae)所特有一种在水环境中也能表现出强黏附功能的蛋白,也是目前开发新型生物黏附剂的主要候选分子。厚壳贻贝(Mytilus coruscus)广泛分布于我国东部沿海,是我国具有重要经济价值的贻贝,其足丝粗硬,黏附力强,关于厚壳贻贝的足丝蛋白的研究目前尚未见报道。通过醋酸抽提结合反相高效液相色谱分离,从厚壳贻贝足丝盘中分离纯化到数种低分子量足丝蛋白,经质谱鉴定和氨基酸序列测定,其中三种足丝蛋白(分子量6 kD左右)属于贻贝足丝蛋白-3(mytilus foot protein-3,mfp-3)家族,且序列中富含DOPA,另有三种足丝蛋白为未知新型足丝蛋白。石英晶体微天平分析表明,厚壳贻贝低分子量足丝蛋白在金表面有较强的吸附能力,这与其黏附功能是直接相关的。以上工作为深入了解厚壳贻贝低分子量足丝蛋白的分子多样性以及黏附机制奠定了基础。     

浑球红细菌谷氨酸合酶大亚单位基因(gltB)的序列分析

测定了浑球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)谷氨酸合酶大亚单位基因(gltB)及其5'端和3'端的序列,全长为5510bp。序列分析表明,R. sphaeroides gltB基因全长为4636bp。从核苷酸序列推测其蛋白质分子量约为164kD。R. sphaeroides gltB基因与Azospirillum brasilense和Escherichia coli的gltB基因DNA序列有很高的同源性。其蛋白质氨基酸序列与A. brasilense gltB基因产物GltB也具有很高的同源性。此外,还对R. sphaeroides GltB的各可能功能区进行了分析,发现它们具有很高的保守性。     

基于厚壳贻贝Mytilin-1的抗菌肽设计、固相合成及抗菌谱分析

贻贝抗菌肽Mytilin是贻贝免疫系统的重要组成部分,对其结构与功能的研究表明,其序列中连接两段β-折叠的发夹区域是其抗菌功能的关键所在。为验证该区域是否具有抗菌活性,通过对厚壳贻贝Mytilus coruscus抗菌肽Mytilin进行空间结构模拟,选取其中β-发夹部分肽段,采用了固相化学合成的方法合成了两条10肽,分别命名为Mytilin Derived Peptide-1(MDP-1)和Mytilin Derived Peptide-2(MDP-2)。高效液相色谱以及质谱检测结果表明,合成是成功的。抗菌谱研究表明,MDP-1和MDP-2对革兰氏阳性菌、阴性菌以及真菌均具有明显的抑制作用,同时,合成的MDP由于序列短且有两对二硫键,因此对于温度及人血浆均表现出很强的稳定性。上述研究结果为深入了解厚壳贻贝抗菌肽Mytilin的抗菌机制以及在此基础上开发具有应用价值的新型抗菌肽奠定了基础。     

放线菌次生代谢产物合成基因组研究

简述放线菌全基因组研究概况,次生代谢产物合成基因组研究涉及的问题;重点介绍聚酮类化合物合成基因组的结构和功能;如何利用基因组筛选程序,筛选具有生物活性次生代谢产物合成基因簇的产生菌,作为新药发现的一种手段。