酵母双杂交系统的发展及其衍生系统的比较

酵母双杂交及其衍生系统是鉴定及分析蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用的最常用、最有效的工具之一。本文系统介绍了该技术的背景、发展过程,以及由Fields和Song初次描述的由酵母双杂交系统衍生而来的几种主要的双杂交系统的特点,并简要比较了各系统的优缺点。     

“基因”概念的发展

叙述了基因概念的产生和发展简史,并在此基础上从不同角度讨论了基于当前科学认知水平的基因概念,以达到提高教师的生物学教学水平、对科学理解文献有所帮助的目的,同时对研究课题的设计也有所启发。     

旅游生态补偿研究现状及趋势

近年来,旅游活动带来的环境问题日益受到关注,旅游领域的生态补偿研究也不断升温。旅游生态补偿作为一种系统化的制度安排,其主要目的是保护旅游生态系统、调和旅游业发展与生态保护之间的矛盾,以促进旅游业可持续发展。因此,旅游生态补偿的研究引起国内外研究者的重视。本文对旅游生态补偿的相关内容包括概念梳理、主客体界定、标准核算、补偿途径4个方面进行述评,阐述了国内外旅游生态补偿的研究现状,并通过国内外研究现状对比分析,寻找我国旅游生态补偿研究存在的问题,为完善我国旅游生态补偿理论研究和实践探索提供借鉴;提出旅游生态补偿应深化研究的方向,如旅游生态补偿的绩效考核、时空分配、等级区划及政策等问题。     

C1—抑制物缺乏的分子生物学

C1－抑制物（C1－INH）是含478个氨基酸的单链糖蛋白,为补体经典激活途径主要调节因子,C1－INH与靶酶相互作用时,反应中心关键的P1和P11位点为Arg^444-Thr445,C1－INH遗传性和获得性缺乏可引起血管神经性水肿,其分子发病机制各不相同,其它多种疾病包括系统性红班狼疮（SLE）,遗传性C4缺乏症等也与C1－INH缺乏或功能障碍有关,IFN－γ,TNF＜L-6,M-CSF,糖皮质激素有增强C1－INH基因表达的作用。     

抗人Cl-INH McAb可变区基因的克隆及序列结构分析

近年来迅猛发展的基因工程抗体研究,已成为抗体应用研究的核心。构建重组抗体的前提是从杂交瘤细胞、免疫脾细胞或外周血淋巴细胞中分离免疫球蛋白(Ig)的重链和轻链可变区(VL和VH)基因,PCR技术为可变区基因     

脆性组氨酸三联体基因小干扰RNA的构建及干扰效果检测

目的:构建脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的小干扰RNA(siRNA),并检测其对293T细胞内源性FHIT基因表达的干扰效果。方法:根据FHIT基因序列,通过生物信息学网站预测可能的siRNA,从中筛选出2条合理的FHIT-siRNA,将其克隆到siRNA表达载体pSilencer2.1-U6Hygro中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆进行测序鉴定;将构建成功的FHIT-siRNA重组载体转染人胚肾细胞293T,Western印迹检测siRNA对293T内源性FHIT表达的干扰效果。结果:构建了2个FHIT-siRNA重组质粒,2条siRNA都有干扰作用,其中一条的作用效果可达50%以上。结论:构建的FHIT-siRNA为进一步研究FHIT的功能提供了有利的工具。     

Taq DNA聚合酶结构改造与功能改进及其在医药领域的应用前景

TaqDNA聚合酶（ThermusaquaticusDNApolymerase）是重要的生物技术工具酶，广泛应用于疾病诊断与治疗、传染病检测、药物作用机理等医药领域。TaqDNA聚合酶在结构上由三部分构成：DNA聚合酶区、3’核酸外切酶区和5’核酸外切酶区。由于3’核酸外切酶区的氨基酸序列的变化而使其失去了3’-5＇的外切校读功能，因此TaqDNA聚合酶有错误复制倾向。利用特定位点的突变、与其他酶互换功能区和删除N末端的5’核酸外切酶区等方式可以改进TaqDNA聚合酶的性能，使它的忠实性、热稳定性和聚合性能得到提高。本文介绍了TaqDNA聚合酶的结构与功能改造的研究现状，并展望了TaqDNA聚合酶在医药领域的应用前景。     

帕金森病α-Synuclein转基因小鼠模型中G蛋白偶联受体激酶5的表达

目的观测G蛋白偶联受体激酶5（G protein-coupled receptor kinase,GRK5）在帕金森病α-synuclein转基因小鼠模型中的表达变化情况,了解GRK5在帕金森病中的可能作用,为发现帕金森病发病机制和探索更好的治疗方法提供新的方向。方法采用Western blotting和实时荧光定量PCR技术对具有不同的人alpha synuclein（hα--syn）表达水平的帕金森病α-synuclein转基因模型小鼠以及3月龄,6月龄以及9月龄A53T突变型帕金森病α-synuclein转基因模型小鼠脑组织进行GRK5的RNA和蛋白水平检测,与同窝阴性对照小鼠进行比较。结果各组帕金森病α-synuclein转基因小鼠与阴性对照小鼠相比,GRK5蛋白表达水平均有不同程度的增加,并且随着转入的hα--syn蛋白表达水平的高低而有所变化。3月龄和6月龄帕金森病转基因模型小鼠与同月龄阴性对照组小鼠相比,GRK5的mRNA和蛋白水平没有变化;而9月龄帕金森病转基因模型小鼠与同月龄阴性对照组小鼠相比,GRK5的mRNA和蛋白水平都有所增加。结论帕金森病α-synuclein转基因模型小鼠具有更高表达水平的GRK5。     

隐形义齿对基牙龈沟内菌群的影响

目的将隐形义齿与传统卡环固位式可摘局部义齿进行对比,探寻隐形义齿对基牙龈沟内菌群的影响,从而指导活动义齿的选择和设计。方法下颌第一磨牙缺失的患者随机分成3组。分别戴用弯制卡环式可摘局部义齿、铸造卡环式可摘局部义齿和隐形义齿。定时对基牙龈沟进行取样并行细菌培养,并统计细菌总量、专性厌氧菌检出率以及G-菌检出率。结果戴牙后同期相比,隐形义齿组与传统卡环固位式可摘局部义齿相比,基牙龈沟内细菌总量更大,专性厌氧菌检出率及G-菌检出率更高,差异具有统计学意义。结论上述研究结果说明:相较于传统卡环固位式可摘局部义齿,隐形义齿对基牙龈沟内菌群的影响更大。对于牙周状况不佳的患者应当谨慎使用隐形义齿作为修复方式。     

多效唑调节水稻植株生长的作用机理

多效唑处理水稻植株后使株高降低和分蘖增加,植株体内的GA类物质和IAA含量相应下降,乙烯释放率显著增加;用外源GA_3和氮肥能逆转多效唑的抑制作用而使株高增加,同时GA类物质含量也明显增加。因此,多效唑不仅调节体内的GA类物质含量,还能通过调节IAA含量和乙烯释放率而影响植物生长。