绵羊卵母细胞体外核成熟抑制及其对胚胎发育潜力的影响

本研究旨在探讨次黄嘌呤 +dbcAMP或IBMX +dbcAMP对绵羊卵母细胞体外成熟的可逆性抑制作用 ,以及这种抑制作用对卵母细胞胚胎发育潜力的影响。自绵羊卵巢分离卵丘 -卵母细胞复合物进行体外培养 ,培养基中分别加入或不加入上述抑制剂。培养 6h后各组取部分卵母细胞固定染色检查卵母细胞核成熟情况 ;将其余的卵母细胞分别移入无抑制剂的成熟培养基中继续培养 18h后 ,再次检查各组卵母细胞核成熟情况 ,并进行体外受精和胚胎培养。结果表明 :次黄嘌呤 +dbcAMP或IBMX +dbcAM都分别能使 6 0 %以上的绵羊卵母细胞抑制在GV期。这种抑制是可逆性的 ,去除抑制剂后卵母细胞能恢复减数分裂 ,并加快由GVBD到MⅡ的成熟过程。各处理组受精率、卵裂率和囊胚发育率与对照组相比无显著性差异 ,表明卵母细胞的胚胎发育潜力没有受损。上述物质对卵母细胞成熟的可逆性抑制可用于研究卵母细胞成熟及其胚胎发育潜力的调节机制。     

年龄和FSH在肉牛活体取卵过程中对卵泡和卵母细胞发育的影响

用B超活体取卵技术（TVFA）对莫累灰和婆罗门杂交肉取卵,探讨年龄和FSH诱导对青年牛,经产牛及老年牛卵泡和卵母细胞发育的影响。结果显示：青年牛（12月龄）和经产牛（7－8岁）平均卵泡数（≥2mm）及＞10mm卵泡数明显高于老年牛（≥14岁）（P＜0．01）。青年牛和经产牛平均卵母细胞数及平均COC数高于老年牛（P＜0．05）。1和2级卵母细胞比例青年牛高于或等于经产牛高于老年牛,3和4级卵母细胞比例老年牛高于经产牛高于或等于青年牛（P＜0．05）。青年牛和经产牛2级卵母细胞占优势,而老年牛3级卵母细胞居多。不同剂量外源性FSH诱导后,经产牛和老年牛平均卵泡数在各剂量组之间没有显著差异（P＞0．05）;但≥6mm卵泡数及2级卵母细胞比例明显增加,而2－5mm卵泡数相应减少及裸卵和老化卵比例降低（P＜0．05）。在10次取卵过程中,青年牛和经产牛发情当天平均卵母细胞数均以后各次的数量低（P＜0．05）。研究表明：利用TVFA可从肉牛获取卵母细胞,卵泡及卵母细胞发育受年龄的影响,这可能与生理状况有关;而适量FSH秀导可以促进牛卵泡发育,提高卵母细胞质量。     

哺乳类性别控制的实践与进展

动物的性别控制是指通过对精子或胚胎的性别鉴定以达到调控子代性别的目的。基于在人类健康及畜牧业生产上的应用价值,动物的性别控制一直是人类期望达到的目标之一。介绍了性别控制的研究历史及最新进展,并着重就不同性别控制手段的理论基础,特点,实践应用价值及未来发展进行了评述。     

绵羊卵母细胞体外核成熟和抑制及其对胚胎发育潜力的影响

本研究旨在探讨次黄嘌呤＋dbcAMP或IBMX＋dbcAMP对绵羊卵母细胞体外成熟的可逆性抑制作用,以及这种抑制作用对卵母细胞胚胎发育潜力的影响。自绵羊卵巢分离卵丘－卵母细胞复合物进行体外培养,培养基中分别加入或不加入上述抑制剂。培养6h后各组取部分卵母细胞固定染色检查卵母细胞核成熟情况;将其余的卵母细胞分别移入无抑制剂的成熟培养基中继续培养18h后,再次检查各组卵母细胞核成熟情况,并进行体外受精和胚胎培养。结果表明,次黄嘌呤＋dbcAMP或IBMS＋dbcAM都分别能使60％以上的绵羊卵母细胞抑制在GV期。这种抑制是可行性的,去除抑制剂后卵母细胞能恢复减数分裂,并加快由GVBD到MⅡ的成熟过程。各处理组肥精率,卵裂率和囊胚发育率与对照组相比无显著性差异,表明卵母细胞的胚胎发育潜力没有受损。上述物质对卵母细胞成熟的可逆性抑制可用于研究卵母细胞成熟及其胚胎发育潜力的调节机制。     

RNAi适用于小鼠卵母细胞基因Basonuclin功能的研究

RNAi适用于小鼠卵母细胞基因Basonuclin功能的研究@马峻$中国科学院昆明动物研究所!　中国 昆明650223 @季维智$中国科学院昆明动物研究所!　中国 昆明650223     

外源性双链RNA对小鼠卵母细胞basonuclin基因表达的影响

在植物及低等动物线虫中, 引入外源性双链RNA(dsRNA)会导致细胞中同源mRNA降解, 从而干扰其内源基因的表达, 这可能是有机体防范病毒或转座子诱导DNA突变的一种生理机制, 称为RNA干涉(RNA interference, RNAi). 利用RNAi研究basonuclin基因在卵母细胞发生过程中的功能. 将basonuclin特异的dsRNA导入小鼠生发泡期卵母细胞, 可有效降低其mRNA的丰度, 这种降解作用与dsRNA的浓度及作用时间成正比, 但不影响非同源基因的表达, 证明basonuclin dsRNA能特异识别、降解其内源基因的转录产物. 免疫组化实验显示, dsRNA能降低卵母细胞中basonuclin蛋白的水平, 但其效率不如RNAi对tPA及cMos基因活性的抑制, 这可能是由于basonuclin蛋白的半衰期较长, 而生发泡期卵母细胞在体外存活时间较短. 结果表明, dsRNA能阻抑卵母细胞中同源基因的表达, 其作用相当于基因敲除. 质粒表达的发夹环型dsRNA也可以有效降解basonuclin转录产物, 这为研究basonuclin在卵母细胞发育早期的功能提供了新的手段.