III型分泌系统抑制剂对铜绿假单胞菌PAO1毒性因子的影响

【目的】进一步研究III型分泌系统(Type III secretion system, TTSS)抑制剂对条件致病菌Pseudomonas aeruginosa PAO1的TTSS相关蛋白、鞭毛和纤毛等主要毒性因子的影响,评估TTSS抑制剂的防治效果及潜在风险。【方法】构建TTSS效应蛋白合成基因exoY和exoT转录报告质粒pAT-exoY、pAT-exoT,并将其转入菌株PAO1中。菌株PAO1(pAT-exoY)、PAO1(pAT-exoT) 与TTSS抑制剂共同培养后,检测exoY和exoT的表达。通过SDS-PAGE检测TTSS抑制剂对鞭毛结构蛋白FliC的影响。将PAO1单菌落穿刺接种于含有TTSS抑制剂的1%琼脂糖平板,观察细菌纤毛介导的蹭行运动(Twitching motility)。【结果】转录报告实验结果表明4个TTSS抑制剂可显著抑制exoY和exoT的转录;化合物TS52、TS53和TS94虽不影响胞内TTSS针状顶端结构蛋白PcrV的产量,但可抑制PcrV蛋白的胞外运输。化合物TS53可降低鞭毛结构蛋白FliC的产生。另外,化合物TS52、TS53和TS88可降低菌株PAO1的蹭行运动能力,但TS94可提高菌株PAO1的这种运动能力。【结论】TTSS抑制剂除通过抑制TTSS表达外,还可能通过影响其它毒性因子如鞭毛的合成、IV型分泌系统介导的蹭行运动等方式影响菌株PAO1致病性。     

不同反应条件对壳聚糖性能的影响

本文研究了不同脱乙酰化条件,如碱浓度、反应温度及时间和不同处理方法对壳聚糖的脱乙酰程度及粘度的影响。结果表明：50％的碱浓度、反应温度为90℃并采用间歇法可制得高脱乙酰度及高粘度的壳聚糖。     

海洋中海藻糖产生菌的筛选及发酵条件优化

从180余份海水、海泥样品中筛选得到60株产海藻糖较高的菌株,编号为2-14的菌株海藻糖产量最高,为127.9mg/g cell。对2-14菌株进行形态特征、培养特征及生理生化试验,鉴定该菌株为红酵母属(Rhodotorula sp.)。研究摇瓶发酵条件对红酵母海藻糖产量的影响,结果为:初始pH5.5,发酵温度28℃,装液量75mL(250mL三角瓶中)。采用优化后发酵条件红酵母海藻糖产量为193.3mg/g cell,优化前对照值为132.1mg/g cell,优化后的结果是优化前的1.46倍。在5L发酵罐中培养得到最佳发酵时间为54h,发酵罐培养发酵液中海藻糖含量最高达2.5g/L,为摇瓶培养的1.6倍。     

DCE-MRI定量参数联合NLR、MLR对脑胶质瘤患者预后的预测价值

摘要 目的：研究动态对比增强扫描-核磁共振检查（DCE-MRI）定量参数联合中性粒细胞计数/淋巴细胞计数比（NLR）及单核细胞计数/淋巴细胞计数比（MLR）对脑胶质瘤患者预后的预测价值。方法：选择从2020年1月到2022年6月在我院接受治疗的脑胶质瘤患者130例作为观察对象。患者均实施脑胶质瘤切除术后放疗,根据预后评价分为预后良好组（n=48）与预后不良组（n=82）。比较两组DCE-MRI定量参数、NLR、MLR;单因素和多因素分析患者预后不良的影响因素;采用受试者工作特征（ROC）曲线分析DCE-MRI定量参数联合NLR、MLR对预后不良的预测价值。结果：随访1年无失访,预后不良组的转运常数（Ktrans）、血管外细胞间隙体积百分数（Ve）、NLR及MLR较预后良好组明显更高（P＜0.05）。预后不良组年龄和肿瘤分级为Ⅲ～Ⅳ级、低分化及术后放疗的比例均分别高于预后良好组（P＜0.05）,卡氏（KPS）评分低于预后良好组（P＜0.05）。单因素及多因素Logistic回归分析发现,Ktrans、Ve、NLR及MLR升高是预后不良的危险因素（P＜0.05）。ROC曲线分析发现,DCE-MRI定量参数Ktrans、Ve联合NLR、MLR对预后不良患者的预测价值最高,其曲线下面积（AUC）为0.874,灵敏度为95.21%,明显高于其他各项单独检测的结果。结论：脑胶质瘤预后不良患者的NLR、MLR与DCE-MRI定量参数异常升高,且三项联合有助于提升脑胶质瘤患者预后的预测价值。     

Ⅲ型分泌系统抑制剂对铜绿假单胞菌PAO1毒性因子的影响

【目的】进一步研究Ⅲ型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,TTSS)抑制剂对条件致病菌Pseudomonas aeruginosa PAO1的TTSS相关蛋白、鞭毛和纤毛等主要毒性因子的影响,评估TTSS抑制剂的防治效果及潜在风险。【方法】构建TTSS效应蛋白合成基因exo Y和exo T转录报告质粒p AT-exo Y、p AT-exo T,并将其转入菌株PAO1中。菌株PAO1(p AT-exo Y)、PAO1(p AT-exo T)与TTSS抑制剂共同培养后,检测exo Y和exo T的表达。通过SDS-PAGE检测TTSS抑制剂对鞭毛结构蛋白Fli C的影响。将PAO1单菌落穿刺接种于含有TTSS抑制剂的1%琼脂糖平板,观察细菌纤毛介导的蹭行运动(Twitching motility)。【结果】转录报告实验结果表明4个TTSS抑制剂可显著抑制exo Y和exo T的转录;化合物TS52、TS53和TS94虽不影响胞内TTSS针状顶端结构蛋白Pcr V的产量,但可抑制Pcr V蛋白的胞外运输。化合物TS53可降低鞭毛结构蛋白Fli C的产生。另外,化合物TS52、TS53和TS88可降低菌株PAO1的蹭行运动能力,但TS94可提高菌株PAO1的这种运动能力。【结论】TTSS抑制剂除通过抑制TTSS表达外,还可能通过影响其它毒性因子如鞭毛的合成、IV型分泌系统介导的蹭行运动等方式影响菌株PAO1致病性。