应用正交法观察影响钙调素依赖环核苷酸磷酸二酯酶活性的因素

 应用正交法观察影响钙调素依赖环核苷酸磷酸二酯酶活性的因素杨东丽,顾熊飞,马涧泉（中山医科大学生化教研室,广州５１００８９）（皖南医学院生化教研室,芜湖２４１００１）钙调素（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ,ＣａＭ）是一种广泛存在于生物界的重要钙受体蛋白,当它与Ｃ...     

巨噬细胞源性神经营养因子的纯化和鉴定

应用Sephacryl S-100-HR凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)和反相高效液相色谱(R-HPLC)分析,从巨噬细胞条件培养基中纯化了巨噬细胞源性神经营养因子(MΦDNF)。该因子在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现一条单一蛋白带,其分子量为60.5kD,等电点约5.1。其氨基酸组成含有较高比例的天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸。纯化的MΦDNF能支持体外培养的小脑皮质神经元的存活,增强其活性及促进神经元突起的生长。其最大效应浓度为500—1000ng/ml。     

巨噬细胞源性神经营养因子的纯化和鉴定

Macrophage-derived neurotrophic factor (M phi DNF) is purified from macrophage conditioned medium by a procedure consisting of column chromatography with Sephacryl S-100-HR, high-performance liquid chromatography (HPLC), and a final step using reverse-phase HPLC. The product shows a single protein band in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel. It has a molecular weight of 60.5 kD and an isoelectric point of pI 5.1 and contains more leucine, lysine, glutamine and aspartic acids in its amino acid composition. Purified M phi DNF can promote the survival, activity, and neurite outgrowth of cultured cerebellar cortical neurons and that this effect reaches maximal levels with concentrations of the M phi DNF ranging from 500-1000 ng/ml.     

心室成纤维细胞分泌心肌营养活性蛋白的分离提纯及其作用

收集FCGM,用0.2μm微孔滤膜除去细胞碎片,再经Diaflo-YM-10滤膜超滤浓缩,截留分子量大于10 KD的FCGM,行Sephadex-G75凝胶层析,得到Ⅰ、Ⅱ两个洗脱峰。经生物学鉴定,证明Ⅰ峰洗脱液具有明显的心肌营养活性。将凝胶层析Ⅰ峰洗脱液透析、浓缩,行PAK200SW高效液相色谱分析,结果得到五个不同的洗脱峰。经生物学鉴定,第Ⅰ峰具有生物活性。将已行半制备高效液相色谱分析Ⅰ峰洗脱液透析、浓缩,再行高效液相色谱分析,结果获单一峰。用该单一峰物质行SDS-PAGE电泳,以标准蛋白质作对照,可知该单一峰中含有数种物质,分子量在25-35 KD。     

狼毒大戟三萜类和酸类化合物的分离鉴定

用溶剂提取和硅胶柱色谱方法,从狼毒大戟中分得两个三萜化合物和一个酸类化合物,经物理常数和色谱分析鉴定为羽扇豆酮、羽扇豆醇乙酯和没食子酸。     

小鼠组织相容性抗原的提取与纯化

以建立方便、大量纯化组织相容性抗原的方法为目的。用０．５％Ｔｒｉｔｏｎ／Ｔｒｉｓ抽提小鼠组织相容性抗原（Ｈ－２）抗原,利用抗Ｈ－２抗原抗体制备的亲和柱,特异性结合Ｈ－２抗原,再用０．５％ＤＯＣ、０．６５ＭＮａＣｌ洗脱结合Ｈ－２抗原。结果显示：电泳显示纯化物为４５ｋｄ（重链）,１２ｋｄ（轻链）两条带,纯化物具有明显的血清学及生物学活性;这种亲和层析法可大量纯化组织相容性抗原,用于器官移植研究及组织相容性抗原的免疫功能研究。     

哈慈五行针对链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠模型疗效的研究

根据生物电磁场激活酶活性促进胰岛素分泌的理论,应用哈慈五行针双极针法做大白鼠试验观察.实验检测诱发糖尿病大白鼠的空腹血糖1850,用哈慈五行针针灸后血糖平均降至588,尿糖(-);对照组血糖为1822,没有下降.进一步对胰腺调节功能进行测定,胰脏钙调素及肝、肾糖原均获理想疗效.在光镜下观察到诱发糖尿病大白鼠萎缩的胰岛经哈慈五行针治疗明显增大,胰岛素分泌增加.