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1.
一个含有乳链菌肽抗性基因的乳酸乳球菌质粒pTS50的鉴定   总被引:5,自引:0,他引:5  
在添加乳链菌肽、乳糖及溴甲酚紫的M1 7选择培养基上 ,从 1 97个新鲜牛奶样品中筛选到 3株乳链菌肽抗性菌株 ,PCR扩增证实它们都含有乳链菌肽抗性基因。菌种生理生化特性鉴定及特异性 1 6SrDNAPCR扩增产物的序列测定结果表明这 3株菌都属于乳酸乳球菌乳酸亚种。质粒转化实验发现乳酸乳球菌乳酸亚种TS 1 640中的乳链菌肽抗性基因位于一个约47kb的大质粒pTS50上。BamHI、EcoRI、HindⅢ、NcoI、PstⅠ酶切分析和Southern杂交 ,进一步将乳链菌肽抗性基因定位于pTS50的一个约 1 9kbEcoRI酶切片段中  相似文献   
2.
NisinZ的定点突变及突变体性质的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
以本实验室构建的含nisZ基因的质粒pHJ2 0 1为模板 ,采用定点突变技术将乳链菌肽Z分子中B环第 8位Thr突变为Ser(T8S)、将第 2位Dhb突变为Dha和第 31位His突变为Lys(T2S H31K)以及将第 2 7位Asn突变为Lys和第 31位His突变为Lys(N2 7K H31K) ,以pMG36e为载体 ,电击转化乳酸乳球菌 (L .lactis)NZ980 0进行表达。对表达产物性质的研究结果表明 ,3个突变体的抑菌谱和溶解度未发生变化 ,其抑菌活性略有下降 ,但它们的稳定性表现各不相同 :N2 7K H31K的稳定性与NisinZ几乎一致 ,而T8S和T2S H31K的稳定性有明显提高 ,在pH9条件下10 0℃加热 5min仍不丧失抑菌活性。  相似文献   
3.
乳酸乳酸球菌AL2产生的乳链菌肽的提纯和性质   总被引:12,自引:2,他引:10  
用NaCl饱和的乳酸乳酸球菌(Lactococcus lactis subsp. Lactis)AL2发酵液经正丙醇提取和CM-Sephadex C-25柱层析,得到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的乳链菌肽组分,比活力从24427IU/mg提高到39865IU/mg,活力回收为41.7%。Α—胰凝乳蛋白酶可使乳链菌肽丧失活性;在低pH条件下,乳链菌肽对热较稳定;对许多革兰氏阳性菌有强烈抑制作用,而对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌没有作用。  相似文献   
4.
乳链菌肽的生物合成及其分子结构与功能的关系   总被引:7,自引:1,他引:6  
乳链菌肽 (Nisin)是乳酸乳球菌乳酸亚种 (Lactococcuslactissubsp.lactis)某些菌株产生的一种小肽 ,亦称之为乳酸链球菌肽或乳酸链球菌素。由于它对许多革兰氏阳性菌 ,包括葡萄球菌 (Staphylococcus)、梭菌 (Clostridium)、芽孢杆菌 (Bacillus)、利斯特氏菌 (Listeria)等造成食品严重危害的腐败菌有强烈抑制作用 ,并对人体安全无毒 ,是人们广为应用的一种天然食品防腐剂 ,已被全世界 5 0多个国家和地区用于乳制品、罐头食品、植物蛋白食品、肉制品的防腐保鲜。…  相似文献   
5.
从中国一热泉区分离到一种新的嗜热菌——嗜酸热硫球菌(Sulfosphaerellus thermoarido- philum)S-5能直接氧化元素硫(S)和黄铁矿(FcS2)等硫化物,氧化元素硫的温度范围是55—80℃,最适70℃;pH范围是1.0—5.5,最适2.5。在最适条件下,含元素硫1%,静置10天,细菌氧化元素硫溶液中的硫酸根(soi一)使浓度从1.10 g/L增加到6.56g/L,pH从2.35降到1.00。还发现嗜酸热硫球菌与中温的氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxidans)T一9以同样方式氧化黄铁矿,但是前者的氧化能力比后者的更强,而且温度范围也更广。当使用一200目黄铁矿矿粉、矿浆浓度10%、振荡氧化20天时,在接人嗜热菌的溶液中,可溶性铁浓度从1.79 g/L增加到16.40 g/L,pH从2.23降到0.85,而接人中温菌的溶液中可溶性铁浓度从1.23 g,L只增加到7.37 g,L,pH从2.23只降到1.20。  相似文献   
6.
嗜酸乳杆菌产生的广谱抗菌肽AP311的分离和鉴定   总被引:7,自引:0,他引:7  
分离、鉴定了乳酸菌素片生产菌嗜酸乳杆菌 (Lactobacillusacidophilus)产生的热稳定性抗菌多肽AP31 1。浓缩的AP31 1对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制作用。AP31 1对枯草杆菌蛋白酶、凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K敏感。AP31 1的抑菌活性随pH升高而降低 ,在酸性pH(pH2~ 4)条件下可经 1 0 0℃加热 30min活性不变。正丁醇可使AP31 1沉淀 ,当沉淀溶解于pH2的酸溶液时 ,活性恢复。氯仿、甲苯、乙酸乙酯、丁酮等有机溶剂对AP31 1活性没有影响。基于AP31 1可被蛋白酶酶解 ,具有广谱的抑菌活性 ,认为这种生物活性物质是一种抗菌肽。  相似文献   
7.
乳链菌肽产生菌的定向筛选及发酵产物的鉴定   总被引:9,自引:0,他引:9  
利用乳链菌肽产生菌中nip^+nis^rsuc^+紧密连锁的原理,在添加乳链菌肽、蔗糖及溴甲酚紫的选择培养基上,从牛奶样品中定向筛选乳链菌肽产生菌。对筛选到的L. lactis1409菌株发酵产物的分析鉴定结果揭示:该产物对多种革兰氏阳性菌有强烈抑制作用,而对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌无效,在pH值低的条件下对热稳定,对α—胰凝乳蛋白酶敏感,具有生物活性的蛋白质的分子量与乳链菌肽相当,而1409菌株的质粒分布与L. laclisATCC11454和L. lactis 7962不同,说明筛选到的L. laclis 1409菌株确是一株新的乳链菌肽产生菌。  相似文献   
8.
用本实验室获得的乳链菌肽高产菌株乳酸乳球菌AL2总DNA为供体,以λ EMBL3为载体,构建了该菌株的基因文库,共获得3900多个噬斑。通过Southern杂交、PCR扩增及DNA序列测定,证实从该文库中筛选到一个含有完整乳链菌肽生物合成基因簇的重组噬菌体λHJ\|3。  相似文献   
9.
嗜酸乳杆菌发酵代谢产物分析   总被引:23,自引:3,他引:20  
气相色谱分析表明,乳酸菌素片生产菌的发酵上清液及药品成品—乳酸菌素粉和乳酸菌素片含有大量乳酸及一定量的丁酸( 或异丁酸) 、乙酸、正反丁烯二酸、六碳脂肪酸、微量丙酸、琥珀酸及微量抗菌多肽。它们不仅对革兰氏阳性菌,而且对革兰氏阴性菌有不同程度抑制作用。乳酸菌素片医治某些肠胃病的机理正是发酵产生的这些有机酸等代谢产物及发酵后的乳酸菌死菌体及其碎片的作用。  相似文献   
10.
探讨HCV准种在NS2区的基因结构特征及变异状况。利用逆转录-巢式PCR从1份HCV慢性携带者的阳性血清及1份丙肝患者的血清中获得HCV NS2全长cDNA,将其克隆于T载体,各随机挑取5个阳性克隆进行序列测定,结果显示克隆到HCV NS2全长基因,所测克隆在核苷酸水平和氨基酸水平互不相同。该慢性携带者HCV NS2区序列以完整读码框架(ORF)为主,一个于HCV多聚蛋白第835位氨基酸的位置出现终止信号,而该丙型肝炎患者以NS2N端发现终止信号的序列为主,其中三个于第835位氨基酸的位置出现终止信号,一个于第887位氨基酸的位置出现终止信号,仅一个克隆的序列为完整ORF。对ORF完整的序列进行比较,发现丙型肝炎患者氨基酸变异主要集中于N端,蛋白二级结构模拟显示丙肝患者NS2与慢性携带者的优势二级结构类似,研究表明从我们选择的两种感染者的HCV NS2序列看,不同临床类型的HCV病人体内的HCV准种在NS2区存在差异,这种差异可能与病毒存在于机体的状态一定的一致性。  相似文献   
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