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1.
孙建和  陆苹  蒋静  赵渝 《病毒学报》2003,19(2):138-143
分离、纯化了鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)上海株(SH95)的病毒核酸dsRNA,应用随机引物将RNA反转录成cDNA,以此为模板一步扩增出全长基因组B片段,将其克隆入pGEM—T载体,并进行序列分析。克隆的B片段全长2827个核苷酸,其编码的氨基酸与超强毒株HK46的同源性达98.18%(863/879)。分子系统进化树分析表明,SH95超强毒株与美国变异株E的亲缘关系最近,但与基于基因组A片段的系统进化分析完全不同,表明该毒株在发生过程中基因重配比基因重组发挥了更重要的作用。通过对14株IBDV编码氨基酸序列的分析、比较,推测B片段上11个独特的氨基酸位点可能与毒力相关。  相似文献   
2.
禽细胞因子的新功能——免疫治疗和疫苗佐剂   总被引:2,自引:0,他引:2  
许多国家已明令禁止在饲料中使用抗生素类饲料添加剂和化学抗菌药物 ,从而使得肉品生产者急于寻求新的替代产品。细胞因子是一种在感染或免疫接种后产生的蛋白质 ,能够影响免疫应答的类型和水平 ,因此是一种绝佳的天然替代产品。随着更多的禽细胞因子基因的发现 ,临床应用细胞因子成为可能。由于禽类的免疫系统与哺乳动物的相似 ,因此相关工作也为研究细胞因子在控制家畜疾病上提供了颇具前景的动物模型。这里综述了禽细胞因子的最新研究进展 ,并侧重阐明了细胞因子作为治疗制剂和疫苗佐剂的功能与前景。  相似文献   
3.
真菌毒素的微生物脱毒技术   总被引:10,自引:0,他引:10  
尽管可采用不同的物理或化学方法去除粮食或饲料中污染的真菌毒素 ,然而 ,具有实用价值的方法却很少。最新研究认为最佳的脱毒方法是通过筛选微生物 ,在温和条件下降解真菌毒素 ,无须使用有害的化学试剂、不影响适口性且无营养价值的重大流失。文中综述了该领域的最新研究进展.  相似文献   
4.
一步法扩增克隆IBDV上海超强毒VP2-4-3基因   总被引:1,自引:0,他引:1  
孙建和  蒋静  陆苹  赵渝 《中国病毒学》2002,17(4):358-361
分离、纯化了鸡传染性法氏囊病病毒超强毒 (vvIBDV) 上海株SH95的病毒核酸dsRNA,应用随机引物将RNA反转录成cDNA,以此为模板一步扩增出A片段前体融合蛋白基因即VP2-4-3基因,将其克隆入pGEM-T载体,并进行序列分析,其与超强毒株HK46的核苷酸序列的同源性达98%,整个基因有5个氨基酸差异,同源性达99.51%(1007/1012).  相似文献   
5.
DNA疫苗的分子佐剂应用研究进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
赵渝  赵冰  陆苹 《生物技术通报》2002,(5):10-12,16
DNA疫苗因在动物尤其是大型动物与人类中诱发较低的免疫反应而严重影响其推广应用。介绍提高与调节DNA疫苗诱导反应的策略:(1)以细胞因子表达质控为佐剂;(2)以质粒编码的趋化因子与共刺激分子为佐剂;(3)以CPG ODN为佐剂。  相似文献   
6.
孙建和  蒋静  陆苹 《中国病毒学》2004,19(3):232-236
将IBDV上海超强毒株的多聚蛋白基因(vp2-4-3)克隆入真核表达载体pALTER-MAX,构建成功pALTER-MAX-VP2-4-3真核表达质粒,经纯化后,pALTER-MAX-VP2-4-3在LipofectamieTM 2000介导下转染Vero细胞、11日龄鸡胚的绒毛尿囊膜(CAM)和肌肉注射2日龄的雏鸡,1周后,分别提取细胞或组织中的总DNA或总RNA,用DIG标记探针均可检测到阳性杂交信号;转染的Vero细胞飞片和肌肉冰冻切片,进行免疫荧光检测均呈现阳性结果;转染的鸡胚CAM匀浆上清,用兔抗IBDV超强毒的高免血清,经Dot-ELISA检测呈现阳性.表明转染后基因获得表达,表达的蛋白具有免疫反应性.  相似文献   
7.
一种实用的筛选病毒抗原表位方法的建立(英)   总被引:4,自引:0,他引:4       下载免费PDF全文
采用基因分段克隆、表达结合蛋白质印迹, 筛选到了口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC上高结合力、保守的感染相关线性表位,分别位于3ABC蛋白上第106~155和156~190位氨基酸.这两个表位可与感染不同血清型口蹄疫病毒动物康复血清反应,但不与来自健康免疫动物和未接触病毒动物的血清发生反应.实验表明,用基因工程表达的多肽筛选抗原表位的方法是可行的.  相似文献   
8.
DNA疫苗的分子佐剂   总被引:1,自引:0,他引:1  
在揭示体内注射DNA可转染细胞后 ,进一步研究发现 ,注射编码抗原的质粒DNA能诱导免疫应答反应。由此兴起了一种新的疫苗研究领域 ,这就是以接种编码各种抗原的裸露质粒DNA为基础的DNA疫苗[1] 。尽管DNA疫苗的免疫接种技术已取得很大进展 ,但与小鼠相比 ,应用于大动物和非人灵长类的DNA疫苗的免疫原性依然相对较弱[2 ] 。在大多数情况下 ,免疫原性强弱通过检测抗体水平来衡量 ,因此并不能完全反映保护性免疫的水平。事实上 ,DNA疫苗诱导初次免疫应答特别有效 ,其诱导的免疫记忆通常足以保护动物 ,DNA疫苗的这些特征 …  相似文献   
9.
鸡传染性法氏囊病上海超强毒株NH99的分离与鉴定   总被引:12,自引:3,他引:9  
孙建和  陆苹  李晖  赵渝 《中国病毒学》2002,17(3):252-256
通过对上海近郊某鸡场数群10日龄左右的病鸡的临床症状、病理变化、病毒分离、纯化、动物回归、血清学检测及病毒核酸纯化、VP2基因序列的测定与分析,确认上海地区以发病日龄早,发病率、死亡率高为特征的鸡传染病为超强毒型鸡传染性法氏囊病,病原具有鸡传染性法氏囊病病毒超强毒 (vvIBDV)的分子特征,为vvIBDV.  相似文献   
10.
通过对上海近郊某鸡场数群 10日龄左右的病鸡的临床症状、病理变化、病毒分离、纯化、动物回归、血清学检测及病毒核酸纯化、VP2基因序列的测定与分析 ,确认上海地区以发病日龄早 ,发病率、死亡率高为特征的鸡传染病为超强毒型鸡传染性法氏囊病 ,病原具有鸡传染性法氏囊病病毒超强毒 (vvIBDV)的分子特征 ,为vvIBDV。  相似文献   
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