Kras突变基因真核表达载体的构建及在不同肝细胞株中的表达

目的：构建携带突变Kras基因,以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因的重组真核表达载体,并导入两种不同的肝细胞株中表达。方法：PCR扩增突变Kras目的基因,将该全长基因定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体。并利用脂质体转染人肝癌细胞株Huh7．5和鸡肝癌细胞株LMH,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察Kras-EGFP融合蛋白在细胞中的表达;用WesternBlotting方法验证Kras蛋白水平的表达。结果：酶切和测序证实pEGFP—N1-Kras重组质粒构建正确,将EGFP报告基因融合在突变的Kras基因的3’端;在Huh7．5和LMH中均观察到了绿色荧光,转染率分别为19％和53％;WesternBlott—ing也检测到融合蛋白的表达。结论：通过基因克隆方法成功构建了pEGFP—N1-Kras重组质粒载体,并且在Huh7．5和LMH中均稳定表达,为下一步筛选针对突变Kras基因的靶向药物奠定了基础。     

BsC3-41杀蚊幼制剂对蚊幼虫毒杀效果研究

通过以BsC3-41杀蚊幼制剂对3种蚊幼虫进行生物活性测定和野外灭蚊试验,结果表明:该制剂对致乏库蚊Culex fatigans Wiedemann的毒杀效果最好、对中华按蚊Anopheles sinensis Wiedemann次之、对白纹伊蚊Aedes albopictus Skuse的效果较差,24小时LC50值分别为0.2025μg/ml、2.5363μg/ml和59.7302μg/ml.野外水体灭蚊使用3ml/m2的浓度防治淡色库蚊效果可达98.88%～100.00%,使用10ml/m2的浓度防治中华按蚊效果可达96.81%～100.00%,使用200ml/m2的浓度防治白纹伊蚊效果达到90.64%以上.     

环境因子对SeNPV杀虫剂防治效果的影响

本文研究了不同的温度、不同的日照时间和不同的雨淋时间对甜菜夜蛾Spodoptera exigua Hubner核多角体病毒(SeNPV)杀虫剂的防治效果的影响,结果表明:温度在22℃时的LC50值为20.4242μg/ml,防治效果最好,低于或高于22℃的LC50值都增大;秋季日照对防治效果的影响不大,日照在4小时之内,防治效果在97.42%以上,而夏季日照对防治效果的影响则较较为明显;在降雨强度为5mm/hr的条件下,雨淋1小时后其防治效果仍为100%,雨淋4小时内防治效果为89.80%,但当雨淋6小时和雨淋8小时后,防治效果降低为83.67%和81.63%.     

圆斑弯叶毛瓢虫对湿地松粉蚧捕食作用研究

在室内试验条件下,研究了圆斑弯叶毛瓢虫Nephus ryuguus(Kamiya)对湿地松粉蚧Oracella acuta(Lobdell)的捕食功能反应和干扰反应,结果表明瓢虫的捕食功能反应符合Holling-Ⅱ型模型,捕食量随猎物密度的增加而增大;1～4龄幼虫和成虫理论最大捕食量分别为13.63头/d、21.57头/d、55.07头/d、66.39头/d和93.40头/d;对猎物的寻找效应随自身密度的增大而下降.在猎物密度不变的情况下,捕食率随自身密度的增加而减少,成虫个体之间的干扰反应经检验,符合Hassell-Varley干扰反应模型.     

德国小蠊肠道细菌抗真菌的初步研究

初步研究表明来自德国小蠊Blattella germanica Linnaeus肠道的细菌能产生广谱的抗真菌活性物质,对白色念珠菌Candida albican、深红酵母Rhodotorula rubra(Demme)Lodder、丝核菌Rhixoctonia solani Huhn.、黄萎轮枝孢菌Verticillium alboatrum Reinke、镰刀菌Fusarium solani(mart.)Sacc.、黄曲霉Aspergillus flavus Link、黑曲霉Aspergillus niger VanTieghem都有明显的抑制作用.推测蜚蠊肠道细菌有助其抵抗病原真菌,同时也为开发用于医药、农业的广谱抗真菌的活性物质提供新途径.     

内脏利什曼病鼠动物模型建立之探讨

内脏利什曼病是威胁病人生命的人兽共患病。近年来,全世界内脏利什曼病的发病人数约为每年50万,患病人数约250万。在我国,虽然解放后此病流行得到了很好的控制,但是甘肃、四川、新疆等地的新发病例从未间断,并且近年来又有扩大蔓延的趋势。在对内脏利什曼病治疗和预防的研究中,动物模型是不可缺少的实验工具,但其建立有一定的难度。在此,我们将建立内脏利什曼病动物模型的资料进行了整理,以供参考。     

利用斯氏线虫防治甜玉米玉米螟的大田示范总结

随着农村种植结构改变 ,产量高、经济效益好的甜玉米发展很快。但甜玉米易受玉米螟为害 ,早造甜玉米的被害株达 1 8.1 8% ,中、晚两造被害更为严重。为了解决日趋严重的化学农药污染问题 ,我们采用广东省昆虫研究所产业化生产的昆虫病原线虫 ,进行了玉米螟大田防治试验。斯氏线虫ＳｔｅｉｎｅｒｎｅｍａｃａｒｐｏｃａｐｓａｅＡ2 4防治玉米螟采用悬液喷施方法。试验处理面积约0 .5ｈｍ2 。常规施药区约 3.3ｈｍ2 。空白对照 (清水 )为 6 6 .7ｍ2 。线虫试验剂量分别为 1 .5× 1 0 9头 /ｈｍ2 和 1 .1 3× 1 0 9头 /ｈｍ2 ,并分别设 80 %敌…