麦长管蚜唾液蛋白C002的基因克隆与RNA干扰研究

【目的】蚜虫唾液相关蛋白C002是一种水溶性唾液蛋白,在蚜虫取食过程中发挥着重要作用。本研究探讨了蚜虫唾液相关蛋白基因C002在麦长管蚜Sitobion avenae(F.)取食过程中的作用和功能。【方法】根据豌豆蚜基因C002序列,同源克隆了麦长管蚜C002基因,并应用荧光定量PCR和RNA干扰(RNAi)技术分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。【结果】结果表明:麦长管蚜C002基因c DNA开放阅读框长663 bp,编码220个氨基酸,命名为Sv C002。转录水平的表达时序分析发现,Sv C002在蚜虫各个时期都有表达,在2龄若蚜时期表达量最高。ds RNA饲喂结果显示,麦长管蚜取食ds C002 4 d和6 d后,C002基因的表达量分别下降54%和69%,差异极显著(P<0.01),麦长管蚜存活率较对照组下降了32.2%和53.3%。将饲喂ds C002的麦长管蚜接种到感蚜小麦(北京837),蚜虫在短时期内出现大量死亡现象,第6天和第8天存活率分别为44.4%和35.6%,低于对照组并达到极显著水平。【结论】C002基因在麦长管蚜的取食行为中发挥着重要作用,可以作为麦长管蚜防治的潜在RNAi靶标基因。     

基于高遗传转化率及低幼苗玻璃化率的黑果枸杞叶片组合培养体系

摘要：为了建立高效稳定的黑果枸杞遗传转化体系,有效降低其再生幼苗玻璃化率,促进其基因功能研究和提高遗传改良效率,以黑果枸杞叶片作为外植体,利用农杆菌（LBA4404、EHA105）介导的遗传转化法,通过调整基础培养基类型并添加相应浓度的植物激素,筛选出最适愈伤组织诱导培养基、分化和选择培养基、生根诱导培养基,将黑果枸杞遗传转化率提高到65%以上,同时降低幼苗玻璃化率至10%以下,该高效组合培养体系将为黑果枸杞分子育种奠定重要基础。结果表明,（1）黑果枸杞叶片高效组合培养体系中最佳农杆菌侵染浓度（OD600）为0.6,侵染时间为25 min,在此条件下侵染叶片抗性愈伤诱导率达78.2%～96%;（2）黑果枸杞遗传转化中最适分化和选择培养基为：MS+肌醇50 mg/L+烟酸0.25 mg/L+VB6 0.25 mg/L+ Fe盐母液1 mL/L+甘氨酸1.0 mg/L+VB1 0.05 mg/L+6-BA0.25 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L+卡那霉素 30mg/L + 特美汀 300mg/L (pH=6.0);最适生根诱导培养基为：WPM +IBA 0.25 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L +卡那霉素 30mg/L+ 特美汀 300mg/L (pH=6.0);（3）在最适分化和选择培养基中,农杆菌LBA4404-pBI121侵染叶片外植体产生的幼苗玻璃化率约为65%,而农杆菌EHA105-pBI121侵染处理则低于10%;（4）采用木本植物低盐WPM培养基可使黑果枸杞再生幼苗生根效率达到81.2%左右。（5）将阳性愈伤数量与总接种叶片数量比值作为遗传转化效率的评价指标,在最适遗传转化体系中,农杆菌LBA4404-pBI121和EHA105-pBI121侵染后遗传转化率分别为51%和65.2%。可见,黑果枸杞叶片高效组合培养体系能够显著提高其遗传转化率,降低玻璃化幼苗的发生率。     

基于支持向量机识别亚高尔基体蛋白质的定位

研究表明,许多神经退行性疾病都与蛋白质在高尔基体中的定位有关,因此,正确识别亚高尔基体蛋白质对相关疾病药物的研制有一定帮助,本文建立了两类亚高尔基体蛋白质数据集,提取了氨基酸组分信息、联合三联体信息、平均化学位移、基因本体注释信息等特征信息,利用支持向量机算法进行预测,基于5-折交叉检验下总体预测成功率为87.43%。