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1.
目的:探究人髓细胞白血病基因-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)是否参与非小细胞肺癌对吉非替尼的耐药。方法:应用Western blot检测Mcl-1在吉非替尼敏感细胞PC-9和耐药细胞H1975表达差异;梯度浓度的吉非替尼作用于PC-9细胞后,Western blot实验检测B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)家族中抗凋亡蛋白的表达变化;应用Western blot实验检测Mcl-1在PC-9和H1975细胞内降解速度差异。结果:Mcl-1在PC-9细胞内的表达明显低于H1975细胞,差异有统计学意义(P0.05),并且随着吉非替尼作用浓度的升高,Mcl-1表达逐渐降低,而Bcl-2和Bcl-x L表达基本不变,并且PC-9细胞内Mcl-1降解更迅速,半衰期明显缩短。结论:非小细胞肺癌对吉非替尼耐药可能与Mcl-1的表达量上调,降解速度减慢,半衰期延长有关。  相似文献   
2.
端粒酶调控机制的研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
端粒酶在细胞中的主要生物学功能是通过其逆转录酶活性复制和延长端粒DNA来稳定染色体端粒DNA的长度。近年有关端粒酶与肿瘤关系的研究进展表明,在肿瘤细胞中端粒酶还参与了对肿瘤细胞的凋亡和基因组稳定的调控过程。与端粒酶的多重生物学活性相对应,肿瘤细胞中也存在复杂的端粒酶调控网络。通过蛋白质-蛋白质相互作用在翻译后水平对端粒酶活性及功能进行调控,则是目前研究端粒酶调控机制的热点之一。  相似文献   
3.
目的:利用酵母双杂交系统筛选与人POT1(human protection of telomeres 1,hPOT1)相互作用的蛋白。方法:以hPOT1的300~634氨基酸片段为诱饵,在人乳腺cDNA文库中筛选能与hPOT1相互作用的蛋白质;运用营养缺陷型培养基和X-α-Gal实验排除假阳性,并对阳性克隆进行序列测定和比对。结果:经过酵母双杂交筛选,发现7个与hPOT1相互作用的蛋白;选取NM23B与hPOT1通过GST-pull down和免疫共沉淀进行进一步的验证,结果证明它们确实存在相互作用。结论:hPOT1能与NM23B发生相互作用,在此实验基础上可以进一步研究NM23B与hPOT1相互作用的生物学意义。  相似文献   
4.
目的:研究Pot1蛋白的稳定性。方法:利用慢病毒表达载体构建表达外源Flag-Pot1的He La细胞稳定克隆,在该克隆中加入CHX抑制新蛋白的合成,检测外源Pot1的半衰期,确定Pot1的稳定性;将Pot1质粒与Ub质粒共转293T细胞后,加入MG132阻止蛋白酶体途径,确定Pot1的稳定性是否受泛素化修饰的影响;构建点突变和截短突变的Pot1质粒,与Ub质粒共转293T细胞后,加入MG132阻止蛋白酶体途径,确定影响Pot1稳定性的区域。结果与结论:Pot1通过泛素化修饰影响自身稳定性;点突变和截断突变实验证实Pot1存在多个泛素化位点,且主要发生在C端400~634位氨基酸残基。  相似文献   
5.
目的:构建高效抑制核磷蛋白NPMl基因的短发夹RNA(shRNA)干扰载体。方法:以人NPM1基因为靶序列,设计并合成shRNA序列,将其连入RNA干扰慢病毒载体p113.7;酶切鉴定插入shRNA序列片段的质粒,经测序正确后转染293T细胞;Western印迹检测得到抑制效果好的载体pll-shRNA,将其-9慢病毒载体共转染293T细胞,进行病毒的包装,将得到的病毒感染HTl080细胞,通过RT-PCR、Western印迹等方法验证其抑制效果。结果:酶切证实构建的载体pll-shRNA中已插入外源基因片段,转染293T细胞后都有抑制效果,其中pll-shRNA2的抑制效果最好;用pll-shRNA2病毒感染HTl080细胞,RT-PCR和Western印迹检测分别在RNA和蛋白质水平证实NPMl的表达显著降低。结论:构建的RNA干扰载体pll-shRNA2能有效抑制NPMl的表达,为NPMl功能的研究提供了有力工具。  相似文献   
6.
杨玲  田云  杨浩  张琳  金蕊 《现代生物医学进展》2016,16(19):3728-3730
目的:评估康莱特(KLT)配伍吉非替尼治疗对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的免疫功能和生活质量的影响。方法:选取我院2013年1月-2014年7月诊治的晚期NSCLC患者64例并随机分为两组各32例。对照组给予吉非替尼口服,试验组在对照组基础上加KLT静脉滴注。观察两组T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+表达情况及自然杀伤(NK)细胞活性;采用生活质量量表(QLQ-CCC)和卡式功能状态量表(KPS)对生活质量及功能状态进行评估。结果:试验组T淋巴细胞亚群CD4~+、CD4~+/CD8~+表达率及NK细胞活性高于对照组(P0.05),且其治疗前后的差值低于对照组(P0.05);试验组躯体、心理、社会、QLQ-CCC总分及KPS得分均高于对照组,且其治疗前后的差值均高于对照组(P0.05)。结论:KLT配伍吉非替尼治疗晚期NSCLC可减少吉非替尼对免疫功能的损害,提高患者的生活质量。  相似文献   
7.
人端粒保护蛋白hPot1的一种新选择性剪接体的克隆及鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
hPot1是端粒单链结合蛋白,在维持染色体末端的稳定性中发挥着重要作用。从前列腺癌细胞C4-2中提取总RNA,以反转录得到的cDNA为模板,扩增全长的hPot1 cDNA,发现hPot1基因的一种新的剪接形式。这种新的剪接形式缺失了野生型hPot1基因的第2个外显子,并且造成了读码框架的改变,使翻译提前终止,表达出一段有45个氨基酸残基的短肽。进一步检测表明,这一hPot1 mRNA新剪接体广泛存在于多种组织来源的细胞中,提示这一剪接形式可能是细胞调控hPot1功能的一种调节机制。  相似文献   
8.
回接内生真菌对工业大麻生理及农艺性状的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
回接工业大麻中分离出的6种内生真菌于大田种植的云麻1号,研究了内生真菌对工业大麻酶活性及农艺性状的影响。结果表明:接种毛壳菌和镰孢菌的大麻植株SOD和POD活性显著提高(P<005);除炭疽菌外,小不整球壳菌、毛壳菌、黑孢霉、镰孢菌和粘束孢均提高了大麻植株的麻皮干重和麻皮厚度;毛壳菌处理组大麻植株的节间长、麻皮干重、麻皮厚度均显著高于对照(P<005)。这些结果为大麻生产中合理利用内生真菌制剂促进大麻优质丰产及深入研究内生真菌的作用机制奠定基础。  相似文献   
9.
10.
康平寿的组织培养与快速繁殖   总被引:11,自引:5,他引:6  
1 植物名称 康平寿 (Haworthiacomptoniana)。2 材料类别 成年康平寿的春生花茎 (其中大部分花蕾已出现 ,但尚未开放 )。供试植株来源于日本カクタヌ专门家联盟。3 培养条件  ( 1 )启动培养基 :MS + 6 BA 2mg·L- 1 (单位下同 ) +KT 1 +NAA 0 .2 ;( 2 )分化培养基 :MS + 6 BA 1 +KT 1 ;( 3)增殖培养基 :MS +6 BA 0 .5 +KT 0 .5 +NAA 0 .1 ;( 4 )复壮与生根培养基 :1 /2MS +NAA 0 .1。以上培养基均加入 3%蔗糖、0 .7%琼脂 ,pH 5 .8。培养温度为 ( 2 5± 2 )℃ ,光照 8h·d- 1 ,光照度为 2 0 0 0lx。4 生长与分化情况4.1…  相似文献   
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