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钠米颗粒介导质粒DNA转染体外真核细胞   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
DNA传递是基因表达与功能研究及其医学应用的重要技术,安全高效的DNA传递一直是研究者期待的目标。利用一种新的阳离子多聚物脱乙酰甲壳胺16介导重组质粒pcDNA3vp1转染COS7细胞,RTPCR可检测到目的基因vp1在mRNA水平的表达,实时定量PCR结果表明其转染效率介于脂质体与磷酸钙法之间,同时还对转染条件进行了探讨。DNA结合分析发现脱乙酰甲壳胺16能够与DNA形成核酸纳米颗粒,提高DNA稳定性,促进真核细胞转染效率的提高。这些结果表明脱乙酰甲壳胺16确能做为一种新型的非病毒纳米DNA传递载体,并将可能在基因表达与功能研究及基因治疗等领域发挥重要作用 。  相似文献   
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竞争PCR定量检测免疫小鼠细胞因子表达水平   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:利用竞争PCR技术定量检测各种细胞因子的表达水平。方法:在机体免疫应答过程中,细胞因子作为免疫调节分子在免疫网络系统中发挥重要的调节功能,T细胞能够通过产生并分泌各种细胞因子来调节机体的免疫反应。本研究采用竞争PCR技术,通过提取的小鼠脾脏组织总RNA,经反转录得到cDNA,利用一种修饰的竞争模板pQRS进行竞争PCR扩增,然后利用琼脂糖凝胶电泳分析并与竞争模板产物比较而定量。结论:结果表明竞争PCR能够初步定量免疫前后小鼠脾脏组织表达的IL-2、IL-4、IL-10、IL-12和IFN-γ的表达量。为深入研究免疫前后小鼠体内各种细胞因子的动态水平和分析细胞免疫水平奠定了基础。  相似文献   
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