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目的:探讨低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因Nkx-2.2表达的影响,揭示低碘导致脑发育迟滞的可能分子作用机制。方法:雌性Wistar大鼠随机分为2组:低碘组和正常对照组,均饲以低碘饲料,分别饮用去离子水和碘酸钾溶液,3个月后分别取材于孕16天、新生及20日鼠龄低碘及正常仔鼠,实时荧光定量PCR检测其脑组织中Nkx-2.2 mRNA含量。结果:低碘组血清甲状腺激素水平明显低于对照组(P<0.05或P<0.01),建立缺碘Wistar大鼠动物模型。低碘及正常各年龄组的表达水平随着年龄增加表达趋势不一致,但均有明显差别(F=573.68、120.82, P<0.01)。各年龄组低碘及正常大鼠比较,孕16天正常鼠Nkx-2.2表达水平明显高于低碘鼠(t=6.86, P<0.01),而新生及20日龄低碘鼠Nkx-2.2表达水平明显高于正常鼠(t=15.85、10.61, P<0.01)。结论:同源盒基因Nkx-2.2表达差异与低碘导致脑发育迟滞密切相关。 相似文献
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微球体悬浮芯片技术及其应用 总被引:3,自引:0,他引:3
微球体悬浮芯片技术是继平面芯片(基因芯片,蛋白质芯片)之后的一种新型芯片技术。与平面芯片相比,具有高通量,快速,精确,操作简便等优点,在核酸,蛋白质等生物分子的大规模分析中具有巨大的应用潜力。 相似文献
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骨保护素 (OPG)成熟肽N端D1~D4结构域仅由 2个外显子编码 .以人基因组DNA作为模板 ,采用重叠延伸PCR得到N端D1~D4域编码序列 ,并在其上游引入 2×His密码子序列 ,然后克隆入载体pQE 30进行表达 ,SDS PAGE表明 8×His融合蛋白主要以包涵体形式存在 ,可被抗OPG抗体识别 .变性条件下通过Ni NTA金属螯合亲和层析对表达产物进行纯化后再经梯度透析进行复性 ,采用破骨细胞样细胞 (osteoclast likecell ,OLC)诱导分化实验来检测重组蛋白的生物活性 ,证实单核 巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF)和破骨细胞分化因子 (ODF)可协同促进多核OLC的生成 ,但加入重组OPG片段后 ,OLC生成显著减少 . 相似文献
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大鼠胰岛素样生长因子Ⅰ基因的克隆及表达 总被引:4,自引:0,他引:4
以大鼠染色体DNA为模板,PCR分别扩增胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因外显子2编码区和外显子3编码区,并使外显子2编码区的3′端与外显子的3编码区的5′端有相同的40个碱基,采用外显子拼接法,以两种扩增产物为模板再次进行PCR,得到210bp的大鼠IGF-Ⅰ基因编码序列,将此序列克隆入pUC18质粒进一步构建表达型重组粒pGEX-IGF-Ⅰ,并在大肠杆菌DH5α中进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE分析及Western blot检测,并经体外实验证明其具有刺激细胞增殖的生物活性。 相似文献
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载脂蛋白E(apo E)是人血液中重要的载脂蛋白成分之一,其遗传表型和血液浓度与高脂蛋白血症及动脉粥样硬化关系密切。制备单克隆抗体和建立相应的免疫化学技术是测定人apo E表型和浓度的重要途径。 利用本室建立的不连续密度梯度超速离心 相似文献
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钠/碘同向转运体的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
甲状腺对I^-的摄取是甲状腺激素合成的第一步,而调节这一过程的重要物质是位于甲状腺滤泡细胞基底膜上的钠/碘同向转运体(sodium/iodide symporter,NIS)。NIS主要存在于甲状腺组织,其调节I^-摄取要依赖Na^ 的存在,摄取过程可被SCN^-、ClO4^-等一价阴离子所抑制。人和大鼠NIS的基因都已经被克隆,对其基因表达调控的研究也逐渐兴起。促甲状腺激素(TSH)对NIS的基因的表达及I^-摄取具有很强的刺激作用。研究人员在一些自身免疫性甲状腺疾病患的血清中发现了针对NIS的抗体,而且,认识到NIS的基因突变是先天性甲状腺功能低下的一个重要原因。此外,人们利用NIS的基因,进行基因治疗肿瘤的研究也已逐步展开。 相似文献
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用纯化的羊抗人载脂蛋白B抗体包被96孔微量滴定板,与样品保温后,加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人载脂蛋白E纯化抗体,最后用邻苯二胺底物显色. 与同时进行的标准物比较,可测定样品中含有载脂蛋白B脂蛋白中载脂蛋白E(简称LpB∶E )的含量. 用建立的方法对120例血样进行了LpB∶E 测定,并对所得结果进行了简要讨论. 相似文献
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多粘菌素BSub—MICs导致大肠杆菌自溶的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过建立多粘菌素BSub-MICs诱导大肠杆菌形成溶菌环的实验模型,自溶环上细菌进行了动态观察,以光学显微镜检查,可见随着时间延长,细菌淡染程度加重;以活菌计数法观察到活菌数量的下降;用透射电镜观察到细菌胸壁不完整或全部破损,内容物流失,确证了多粘 素BSub-MICs诱导大肠杆菌形成的溶菌环上细菌发生了自溶。 相似文献
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