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人p53蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表   总被引:1,自引:0,他引:1  
将人p53基因装入Pichia分泌型质粒Phil-S1中,酶切线性化后电穿孔导入酵母细胞进行整合,经筛选得到一高表达p53蛋白的克隆。SDS-PAGE显示表达量约占分泌总量的30%。ELISA验证重组人p53存在免疫学活性。在诱导时就降低Pichia酵母系统水解酶活力等方面进行优化,经FPLC分离纯化得到约200mg/L表达量。  相似文献   
2.
人p53蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达   总被引:11,自引:2,他引:9  
将人p53 基因装入 Pichia 分泌型质粒p H I L S1 中,酶切线性化后电穿孔导入酵母细胞进行整合,经筛选得到一高表达p53 蛋白的克隆。 S D S P A G E 显示表达量约占分泌总量的30 % 。 E L I S A 验证重组人p53 存在免疫学活性。在诱导时就降低 Pichia 酵母系统水解酶活力等方面进行优化,经 F P L C 分离纯化得到约200 m g/ L 表达量。  相似文献   
3.
重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中的表达与纯化   总被引:8,自引:0,他引:8  
为实现重组人血清白蛋白(rHSA)的开发,对构建的酵母工程菌Pichia pastoris GS115/HSA进行了表达条件的优化,摇瓶中将表达rHSA的量提高到150mg/L。经中空纤维柱浓缩、Phenyl-Sepharose分离和抗HSA-Sepharose亲和层析纯化获得电泳纯的重组人血清白蛋白。  相似文献   
4.
巴斯德毕赤酵母表达体系研究及进展   总被引:29,自引:0,他引:29  
毕赤酵母表达体系是近十年发展起来的真核表达体系。作为一种成功的表达体系,有好几种因素促进了它的快速推广。主要包括如下几方面:    毕赤酵母醇氧化酶(Alcohol oxidase,AOXl)基因的强启动子特别适合于外源基因的调控表达;毕赤酵母基因操作技术和酿酒酵母Sccharomyces cerevisiae非常相似,后者是现代分子生物学中研究得透彻和应用很广的酵母表达体系;毕赤酵母对需氧生长有强的偏好,这一生理学特性使得它既能高密度发酵生长,亦有利于工业放大生产;毕赤酵母自身分泌到培养基中的…  相似文献   
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