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1.
两种纯化蓖麻毒素方法的比较陈兴,赵立超,贺永怀,沈倍奋(军事医学科学院基础医学研究所,北京100850)高纯度的蓖麻毒素(ricin)对于免疫毒素的制备至关重要,直接影响到免疫毒素的应用效果。总结本实验室纯化ricin的经验,我们发现蓖麻粗提物依次通...  相似文献   
2.
抗尿激酶单克隆抗体识别相应抗原决定簇的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
 尿激酶是一种纤溶酶原激活剂,临床上用于治疗血栓。为了有效地用单克隆抗体亲和柱纯化尿激酶,我们对一组抗尿激酶单克隆抗体识别相应抗原决定簇的特性进行了研究。Western Blotting试验表明:S_(13)、S_(26)、N_(14)、N_(30)、N_(17-2)、N_(34)、N_(36)七个单克隆抗体主要抗54000道尔顿的高分子量尿激酶(HUK)。除N_(30)外,其余抗体还同时不同程度地抗33000道尔顿的低分子量尿激酶(LUK)。N_(30)除识别HUK外,还识别分子量为18000道尔顿的多肽链。竞争性结合试验证明:七个单克隆抗体分别抗五个不同的抗原决定簇,但它们都不抗尿激酶的活力中心。  相似文献   
3.
抗脲激酶单克隆抗体的研制   总被引:2,自引:0,他引:2  
用杂交瘤技术获得了7种抗人脲激酶单克隆抗体。这些抗体仅与脲激酶反应,而不与结构上类似于脲激酶的胰酶、胰凝乳蛋白酶反应,与正常人血清也无明显反应。免疫电转印实验及酶活力抑制实验表明,除N30识别脲激酶分子及18kd轻链外,其他6种抗体均识别脲激酶54kd分子及33kd重链,所有7种抗体均不抑制酶活力。本文也探讨了这组抗体用于脲激酶结构功能研究,纯化脲激酶以及对某些肿瘤诊断的可能性。  相似文献   
4.
CTLA4Ig融合蛋白在CHO细胞中的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
CTLA4Ig是人CTLA4胞外区与人免疫球蛋白铰链区、CH2区、CH3区组成的融合蛋白,可以与B7结合,通过阻断B7与CD28的结合,从而阻断B7介导的T细胞活化必需的共刺激信号,可作为免疫抑制剂用于器官移植。将CTLA4Ig融合分子克隆到真核表达载体pCI-dhfr,并用脂质体方法转染到COS7和CHO-dhfr-细胞中,用氨甲喋呤筛选转染的CHO-dhfr-细胞。用RT-PCR、ELISA、细胞免疫荧光染色和Western-blot鉴定重组蛋白的表达。采用A蛋白纯化重组蛋白。  相似文献   
5.
用三种不同的异型双功能交联剂把单抗和完整蓖麻毒素连接起来,经适当纯化获得了高活性免疫毒素(ITs),体外试验中蛋白质合成抑制50%的浓度IC50达到2.7×10-12mol/L.以二硫键连接的ITs比硫醚键连接的ITs细胞毒性高5—10倍(P<0.05),而硫醚键连接的ITs在动物体内代谢慢1倍,且其原型药物维持时间更长,稳定性更好。两类ITs在体内的代谢产物也不相同。  相似文献   
6.
为获得具有生物学活性的hFKBP52,来筛选新型的促神经再生药物.采用半巢式、桥联PCR及亲和层析方法,从人胎脑cDNA文库中成功扩增出hFKBP52基因,在pET28a(+)中实现了高效、可溶性的融合表达,表达量约30%.重组的蛋白质经亲和纯化至电泳纯,纯化后的hFKBP52显示出肽基脯氨基顺反异构酶活性.表明原核表达的hFKBP52具有类似于其天然蛋白质的生物学活性.  相似文献   
7.
Ⅱ型胶原蛋白与弗氏完全佐剂大鼠关节炎模型的建立和比较   总被引:19,自引:0,他引:19  
目的对Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ-A)和弗氏完全佐剂(A-A)大鼠关节炎模型在大体外观和足部组织病理学切片等方面进行观察比较。方法分别采用Ⅱ型胶原蛋白和弗氏完全佐剂诱导建立大鼠关节炎模型,利用排水法对大鼠足部体积进行测定,并将大鼠后足进行组织病理学切片观察。结果从大体外观和足部病理切片上两种大鼠模型均显示出有明显的病变,但CⅡ-A大鼠与A-A大鼠比较,滑膜增生及软骨破坏等继发性病变特征更为明显,关节炎持续时间也较长,更接近于人的类风湿性关节炎。结论CⅡ-A大鼠模型与A-A相比是研究RA较为理想的动物模型。  相似文献   
8.
本文采用Ultrogel AcA 34凝胶柱纯化单克隆抗体和蓖麻毒素的结合物。结合物与游离毒素的分离较Sephadex G150柱好。继而利用蓖麻毒素B链能与半乳糖基结合的特性,用酸化Sepharose 4B柱进一步纯化结合物;达到完全除去游离抗体,使免疫毒素对靶细胞的特异性毒性提高20倍。  相似文献   
9.
一种快速简便的提取和纯化蓖麻毒素的方法   总被引:9,自引:1,他引:8       下载免费PDF全文
蓖麻毒素是免疫毒素的重要组成之一。本文采用硫酸胺盐析法,从蓖麻籽匀浆液中直接制备粗毒。然后,在酸化Sepharose 4B柱上用半乳糖溶液梯度洗脱。由此得到分子量为65000道尔顿的电泳纯蓖麻毒素。其小鼠LD50为0.53μg,M olt-4细胞毒性试验IC为3.8×10-10M与以前报道用改良Olsnes法所得结果相近。但操作简便、得率提高近5倍。  相似文献   
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