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把一段取自TMV RNA的靶cDNA序列连接在一个体内表达转录载体内的报道基因CAT起译密码子ATG的下游组成了读码框不改变的CAT融合基因,通过测定载体在大肠杆菌内表达的CAT活力变化,观察了与CAT同时表达的核酶在体内对靶序列的作用。当专一核酶RZ1、RZ1A或RZ1表达时,CAT的酶活力下降了30%,但非专一核酶RZ3的表达并不改变CAT活力。凝胶电泳和引物延伸结果表明CAT活力的下降是由于这些核酶对融合CAT mRNA在5’靶序列区发生了专一切割从而影响了蛋白的合成所致。 相似文献
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盐藻基因组DNA文库的构建(英文) 总被引:5,自引:0,他引:5
以LambdaFIX○RⅡ为载体,构建了盐藻(Dunaliellasalina)的基因组文库。该文库包含了1.1×106个重组子,插入片段平均大小为18kb左右,含插入片段的频率为100%。该文库的容量约为盐藻单倍体基因组的200倍。 相似文献
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目的:明确mi R-448-3p对颅内动脉瘤发展的影响。方法:我们通过结扎左侧肾动脉和左侧颈总动脉的方法建立大鼠IA模型;qRT-PCR用于检测mi R-448-3p表达;qRT-PCR和western blot用于检测KLF5 m RNA和蛋白表达;qRT-PCR和ELISA法用于检测炎症因子水平。结果:我们发现IA诱导大鼠中mi R-448-3p表达下调,而KLF5表达上调。我们发现并鉴定出KLF5是平滑肌细胞中mi R-448-3p的直接靶点。此外,mi R-448-3p处理使得IA诱导4周后动脉瘤大小和瘤腔截面积变小。mi R-448-3p处理保护了IA诱导后的壁厚比,抑制了巨噬细胞浸润。IAs引起KLF5表达显著增加,被mi R-448-3p处理后表达显著降低。我们还发现mi R-448-3p在脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞中具有抗炎作用。脂多糖促进KLF5、MMP2、MMP9的表达水平,但却被mi R-448-3p所抑制。结论:研究结果表明,mi R-448-3p可以抑制IA的进展,其机制可能是通过下调KLF5的介导的炎症反应。 相似文献
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青菜组织培养和转化系统的初步建立 总被引:13,自引:0,他引:13
青菜(Brassica campestris ssp. chinensisL.),属十字花科芸苔属,是我国长江流域及南方各省普遍栽培的重要绿叶蔬菜。目前迫切需要培育抗病,抗虫,抗逆和具有优良农艺性状的新品种。用常规育种和细胞工程方法在青菜品种选育方面取得了一定的进展,但是受到种质资源,杂交不亲和性以及耗时长的局限,而遗传工程可提供一个有较大潜力的方法。 相似文献
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前 言 在新世纪开初 ,欣逢《植物生理学通讯》创刊 5 0周年。本刊新组建的编委会决定循 4 0周年时的前例 ,也举行一次活动(包括出版“特辑”和召开座谈会 )。于是我们约请了一些人士撰写了纪念文稿 ,同时也收到了一些自发来稿 ,编辑了这个“特辑”。作者从九十高龄的娄成后先生 ,直到年轻的在读研究生 ,他们在文章中高度评价了本刊的作用和成就 ,同时也对本刊寄予了殷殷厚望 ,可以说代表了当今植物生理学界几代人的心声。这里 ,谨向他们表示由衷的感谢 !文稿中大都冠有“祝贺《植物生理学通讯》创刊 5 0周年”的副标题 ,为避免重复 ,一律舍去了。还有几篇文章题目雷同 ,我们作了改动。并此说明。———编者 相似文献
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黄芪毛状根GBSSI基因cDNA克隆及其结构分析 总被引:3,自引:1,他引:2
根据多种已发表的淀粉粒结构淀粉合成酶(GBSS)基因的比对分析,以它们保守区的核酸顺序为基础,设计一对简并引物。从膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch)Bunge)毛状根提取mRNA,用RT-PCR的方法扩增出560bp的cDNA片段。序列测定表明,此片段与发表的豌豆和马铃薯GBSSI基因相应序列同源性分别达89.6%和73.0%,通过5′/3′RACE(rapid 相似文献
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利用电击法将带有ble基因的pSP124S转入杜氏盐藻细胞内进行瞬时表达,研究了外源基因在盐藻内的存留及表达情况,确定了合适的电击转化条件,发现利用电击法可以使大量的质粒导入盐藻细胞,质粒在细胞中逐渐降解但至少96h内可以检测得到,外源启动子能够使ble基因有效转录,转录至少可以持续72h,ble基因能够在盐藻细胞中正确翻译,可以作为盐藻遗传转化研究的筛选标记。 相似文献
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