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1.
肝癌位于我国肿瘤死亡率第2位,生存率较低。目前用于肝癌早期诊断的临床检查及血清肿瘤标志物检测的特异性与敏感性均较低,不能满足肝癌早期诊断和治疗的需要。核酸适配体与靶标分子结合的灵敏度高、特异性强,有巨大的临床诊断和治疗应用前景。本文利用双向热循环消减指数富集的配基系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment, SELEX)技术,分别以肝癌血清和健康人血清为靶标,经过19轮筛选,获得了肝癌血清特异性核酸适配体序列1 000余条,以及健康人血清特异性核酸适配体序列1 000余条,并从中各挑取了1条高丰度适配体序列,分别命名为Tc1和Tn1。采取了50例肝癌病人血清和50例健康人血清,对适配体Tc1和Tn1与靶标血清的结合特异性进行了检测。结果显示,Tc1和Tn1对两种靶标血清的检出率分别为92%和94%。说明Tc1可特异性与肝癌血清结合,Tn1可特异性与健康人血清结合。肝癌血清特异性核酸适配体的筛选获得,将为建立基于核酸适配体的肝癌血清检测新方法奠定基础。  相似文献   
2.
研究了纳米硒对睡眠剥夺(SD)小鼠(Mus musculus)认知功能的影响,并探讨其作用机制。将120只雄性昆明小鼠随机分成两批,第一批24只分为3组:对照组(NC)、亚硒酸钠组(SE)和纳米硒组(NS),分别给予硒浓度为4μg/ml的亚硒酸钠和纳米硒溶液每只0.5ml/d,NC组给等体积蒸馏水,连续30d,第31天测定SE和NS两组小鼠的血硒及全血GSH-Px活性,评价两种硒源的生物利用性;第二批96只分为4组:对照组(N-SeC),纳米硒低、中、高剂量组(L、M、H),L、M和H组分别给予硒浓度为2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml的纳米硒溶液每只0.5ml/d,N-SeC组给予同体积蒸馏水,连续30d。第二批小鼠每组又各自分为4小组:SD对照组(SDC)及SD18h、SD36h、SD54h组,采用单平台水环境法(SPM)制作小鼠SD模型。在SD后,N-SeC、L、M和H组利用Y-型迷宫试验测定认知能力,同时测定小鼠大脑GSH-Px、NO、MDA含量。结果表明,纳米硒对GSH-Px活性的提高优于传统硒源亚硒酸钠,但血硒无显著差异;与SDC组比较,SD降低了小鼠的认知能力及大脑GSH-Px活性,提高了NO和MDA含量;与N-SeC比较,纳米硒使SD小鼠的认知功能得到改善,大脑GSH-Px活性提高,MDA和NO含量下降。上述结果表明,纳米硒能够改善SD小鼠的认知功能,这可能与其提高大脑GSH-Px活性并降低了自由基对大脑神经的损害有关。  相似文献   
3.
传统中药何首乌组织培养的初步研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
主要对何首乌块根和幼茎进行了愈伤组织培养,并对何首乌不同外植体的诱导时间进行了比较.结果表明:诱导何首乌块根产生愈伤组织的最佳激素配比是0.1 mg/L 6-BA+3.0 mg/LIAA+0.5 mg/L 2,4-D,且这3种激素的作用主次为2,4-D>IAA>6-BA;在此次实验中还比较了不同消毒剂及其组合对何首乌块根的消毒效果,结果表明:70%的酒精+0.1%HgCl2具有很好的消毒作用.  相似文献   
4.
肺癌是发病率和死亡率较高的恶性肿瘤。现阶段,用于肺癌早期诊断的血清肿瘤标志物因其特异性与敏感性均较低,严重影响肺癌的临床诊断和治疗。本文用双向热循环消减指数富集的配基进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment, SELEX)技术,筛选肺癌和非癌血清标志物的核酸适配体,建立肺癌的检测方法,提高诊断和治疗效率。实验用环氧基琼脂磁珠为筛选介质,以非癌混合血清、肺癌混合血清作为双向靶标。应用热循环消减SELEX技术,经19轮筛选分别获得非癌和肺癌血清的特异性核酸适配体。通过高通量测序,得到 40条非癌核酸适配体序列和 41条肺癌核酸适配体序列。从肺癌与非癌血清特异性核酸适配体序列中分别挑选出高丰度的 4条序列,合成后制成检测试剂,经临床血清验证,阳性率为 90%。该检测方法检测灵敏度高,为肺癌的早期诊断和治疗提供了新的分子识别元件。  相似文献   
5.
【目的】探讨鳞翅目模式昆虫家蚕Bombyx mori作为重金属污染的监测指示生物在镉胁迫下的酶反应及相关的基因表达。【方法】给家蚕幼虫期全龄添食镉(Cd2+), 调查不同性别家蚕5龄幼虫脂肪体中脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量, 超氧化物歧化酶(SOD)、 过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及其基因表达水平的变化。【结果】Cd2+胁迫对雌雄家蚕MDA 含量均具有浓度效应关系, MDA含量随Cd2+胁迫浓度的升高而增加。Cd2+胁迫下, SOD和CAT活性表现为先升后降的变化趋势, Pearson相关性分析显示SOD和CAT活性变化有显著相关性(雄: R=0.770, P=0.001; 雌: R=0.854, P=0.000)。雌性家蚕脂肪体中CAT活性变化和Cat mRNA水平的表达具有正相关性(R=0.712, P=0.003)。雄性家蚕脂肪体中GSH-Px活性随Cd2+胁迫浓度的升高而增加, 显示浓度 效应关系, 12.5~50 mg/kg Cd2+胁迫组GSH-Px活性与对照相比有显著差异(P<0.05), 其活性和GSH-Px mRNA水平的表达具有正相关性(R=0.834, P=0.000); 雌性家蚕脂肪体中GSH-Px活性表现为先升后降的变化趋势, 12.5 mg/kg Cd2+胁迫组GSH-Px活性与对照相比有显著增加(P<0.01)。【结论】结果表明, 急性镉胁迫对家蚕脂肪体有明显的毒性作用, 其作用机制与脂质过氧化加剧和抗氧化酶活性变化有关。家蚕对重金属镉的解毒机制有性别相关性。  相似文献   
6.
胃癌是发病率及死亡率均较高的消化道恶性肿瘤之一,严重威胁人类的生命健康。血清肿瘤标志物的检测对提高早期胃癌的检出率,改善胃癌的治疗有重要的意义。核酸适配体以其灵敏度高、靶向性强等优势显示出了较强的临床适用性。本研究以双向热循环消减指数富集式配基系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术为支持,纳米(琼脂)磁珠材料为载体,胃癌血清及正常人血清为筛选靶标,结合高通量测序技术建立了快速高效的核酸适配体筛选方法。经过19轮双向筛选,获得高重复率的胃癌血清特异性核酸适配体序列10条及正常人血清特异性核酸适配体序列8条。将这些序列分别混合并制成检测试剂A、B,结合实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术,对100份临床血清样本进行特异性验证。通过比较分析,建立了快速高效的胃癌血清检测技术。结果显示,核酸适配体G AP1与N AP1的二级结构类似于抗体的“Y”型,且呈茎环状。检测试剂A、B对胃癌及正常人血清的检出率分别为92%和88%。表明本技术可以较准确地筛选得到高特异性和强亲和力的核酸适配体,体现了核酸适配体作为新型肿瘤标志物在临床检测及治疗的应用潜力。  相似文献   
7.
胚乳将许多种子的胚完全包裹,是这些种子萌发的物理屏障,其破裂与否是决定种子萌发与否的最后开关。胚乳破裂是胚生长产生由内向外“顶”的机械力量以及胚乳组织本身机械强度下降(胚乳弱化)的共同结果,而胚乳弱化则包括细胞壁的酶促和非酶促松弛机制。本文综述胚生长产生的机械力量、胚乳破裂的部位和方式、胚乳的组织结构及其细胞壁的化学组成、各种细胞壁降解酶及非酶的扩展蛋白(expansin)和活性氧在胚乳弱化中的作用等方面的研究进展。  相似文献   
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