循环血中microRNAs作为疾病标志物的研究进展

新近研究发现成熟的microRNA能够游离于细胞之外,稳定存在于循环血中,具备疾病分子生物标志物的某些优点,已在多种肿瘤和非肿瘤疾病的早期诊断和预后中显示了独特的价值,同时循环血中microRNA的功能研究也已开始。该文针对近两年循环血中microRNA标志物及功能研究的成果,对microRNA研究中的这一热点问题进行综述。     

模式生物与microRNA研究

microRNA（miRNA）是一类内源性、长度在19~25个碱基的小分子非编码RNA,其在基因的转录后调控中发挥重要功能.miRNA的研究在最近得到了快速发展,模式生物在这一过程中起到了重要作用.本文介绍了不同模式生物在miRNA的发现、作用机制和生物学功能研究中的作用.     

小鼠不同组织及缺氧损伤后的大鼠心肌细胞中RIP3的表达

目的:检测小鼠组织中受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族(RIPs)表达谱,并检测RIP3在大鼠心肌细胞缺氧损伤后的表达。方法:①采用荧光实时定量PCR分别检测RIPs家族基因在小鼠组织(心、肝、肺、肾、脑、小肠、骨骼肌、脾和主动脉)中的mRNA表达谱,并采用Western blot进一步检测RIP3在小鼠组织的蛋白表达谱。②将培养的大鼠心肌细胞分为缺氧组和对照组,缺氧组置于缺氧环境中培养48 h,采用western blot检测其中RIP3的表达变化。结果:①mRNA水平:RIP1 mRNA在脑组织中表达最高,心脏、肺、肾、骨骼肌较低;RIP2在心脏和肺表达量较其他组织高;RIP3在肠中表达较其他组织高出4倍以上,脑组织中未检测到RIP3表达;RIP4的表达以肺最高,而骨骼肌、脑和血管中表达量低。②蛋白水平:在小鼠组织中,RIP3表达以脑、骨骼肌中最高,心脏、肝、肺中表达较低。③培养的大鼠心肌细胞中,缺氧组心肌细胞的RIP3表达量显著高于对照组(P0.05)。结论:RIPs在小鼠组织中呈现差异表达,而在培养的大鼠心肌细胞缺氧损伤后RIP3表达升高。     

microRNA:心血管发育及疾病中的重要调控因子

心脏是哺乳动物在胚胎发育时期最早形成的器官,心血管系统的正常发育及功能维持受到精确的调控。近年来,心血管疾病已成为危害人类生命的首要杀手之一,因此,对心血管的发育及疾病发生的机制研究一直是生命科学研究的热点问题。microRNA(miRNA)是一类长约18～25nt的单链非编码小RNA,主要通过结合于靶基因的3'非翻译区抑制靶基因的翻译或导致mRNA降解,从而抑制靶基因的表达。miRNA在许多生物学过程中发挥重要的调控作用,如细胞增殖、分化、凋亡、癌症发生等。最近研究表明,miRNA也参与调控心血管系统的发育和疾病发生过程。在此,该文对miRNA在心血管系统发育和疾病中的作用做一综述。     

中性粒细胞／淋巴细胞比值与药物支架内再狭窄关系

目的：探讨经皮冠状动脉支架植入术前中性粒细胞／淋巴细胞比值（Neutrophil-to-LymphocyteRatio,NLR）与患者药物支架（DrugElutingStent,DES）植入后发生支架内再狭窄（In—StentRestenosis,ISR）的关系。方法：回顾性分析2012年01月至2012年10月间有DES植入史并再次入院接受冠脉造影的92例患者（平均年龄65．22±9．73岁）的血液学检查、既往冠脉造影结果及再次冠脉造影结果。根据DES植入前的NLR的四分位点将所有入选患者分为3组：最低三分位组（n=31,0．91-1．83）,中间三分位（n=30,1．87—2．63）,最高三分位（n=31,2．66—4．67）,比较3组间ISR发生率有无差异。结果：再狭窄发生在最低NLR三分位的有3例（9．68％）,发生在中间NLR三分位组的有2例（6．67％）,而有4例（12．90％）发生在NLR最高三分位组（P=0．714）,3组之间的差异无统计学意义。结论：因稳定或不稳定型心绞痛而植入药物支架的患者,其术前NLR同支架术后ISR的发生无明显相关性。NLR不能作为DES植入后发生再狭窄的预测指标。     

非编码RNA与心血管疾病的研究进展

心血管疾病已然成为人类社会的一大困扰,给患者和家人带来巨大的身心痛苦和经济压力。近些年来,非编码蛋白质的RNA在心血管疾病的诊治方面引起越来越多的关注,并且取得了可观的研究成果。现主要对miRNA、lncRNA和前沿ncRNA的研究进展进行剖析,对RNA疗法的局限性及未来发展前景进行展望。     

分子信标用于活细胞内源性mRNA 检测的实验研究

目的:观察分子信标(molecular beacons,MB)在活细胞内及在体水平对内源性m RNA检测的可行性。方法:合成增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,e GFP)的MB,模拟体内条件,分别从MB的稳定性、与目标基因结合的特异性和敏感性进行检测,并通过在活细胞和斑马鱼胚胎内的应用来观察其对内外源性m RNA的检测的可行性。结果:MB在37℃条件下在体外48小时内经琼脂糖凝胶电泳鉴定未见降解,熔解曲线结果显示荧光强度差异无统计学意义(P0.05);并且只有在靶序列存在的条件下MB的信号强度显著增强,MB的信号强度与靶基因浓度呈正相关并能基本稳定存在;经e GFP和靶向e GFP的MB共转染的293T细胞能看到荧光表达,靶向e GFP的MB可特异性结合细胞内e GFP的m RNA;在单细胞期斑马鱼胚胎内共注射MB以及目标单链后能观察到荧光表达。结论:结果表明分子信标可用于活细胞内内源性m RNA的检测。     

microRNAs:心血管疾病重要的调控因子

微RNA（microRNA，miRNA）是一类内源性19—25个核苷酸大小的非编码RNA分子，在进化中具有高度保守性，并且能够通过碱基匹配原则识别靶基因3’非翻译区的靶位点，从而抑制编码蛋白靶基因的翻译或（和）降解靶基因。目前的研究表明，miRNA在生物体发育、心血管疾病以及肿瘤发生等过程中起重要作用。本文对miRNA在心血管系统生理病理中的作用做一综述。