半乳糖流加对CHO细胞生长代谢及其表达的Fc融合蛋白糖基化的影响

旨在深入认识补料分批培养过程中,以半乳糖替代葡萄糖作为碳源,对CHO细胞生长、代谢和产物表达的影响。通过将补料培养基中的葡萄糖用等摩尔的半乳糖进行替换,综合考察了不同比例替换条件下CHO细胞的生长代谢和Fc融合蛋白的产物合成特性。结果显示:摇瓶的数据表明60%比例以上半乳糖的替代对细胞的生长造成了不利影响,培养后期的pH出现了大幅上升。同时随着半乳糖替代比例的增加,虽然代谢副产物乳酸的浓度有明显下降,但氨的生成却显著增多;此外,培养过程中谷氨酸和丙氨酸的浓度也随着替代比例的增加而增加。产物表达方面,在较低替代比例内(0%-40%),Fc融合蛋白的表达量和总唾液酸含量都随着替代比例的增加而升高,而随着替代比例的进一步升高(60%-100%),两者都逐渐降低。最后,在反应器内通过对培养pH的稳定控制,40%半乳糖替代过程的产物表达量和总唾液酸含量分别提高了43%和37%。补料培养基中以半乳糖替代葡萄糖进行补料的方式,有效地提高了最终Fc融合蛋白的表达量和总唾液酸含量,有助于建立高产高质的CHO细胞培养过程。     

植物原生质体在分子细胞生物学研究中的应用

植物原生质体是去除了细胞壁的裸露细胞,其具有细胞全能性,现广泛应用于植物分子细胞生物学的研究中,可以大大缩减实验周期,并有助于得到体内实验的实时检测数据。该文除了介绍植物原生质体的提取和纯化方法外,还对国内外利用各种植物的原生质体进行细胞瞬时转化、亚细胞定位、细胞融合和大分子复合物相互作用等试验进行了总结和讨论。植物原生质体还可用于基因表达模式的实时检测,并作为生物反应器的受体细胞进行代谢物的体外生产。此外,还对当前该技术所面临的瓶颈进行了分析,为植物原生质体在分子细胞生物学领域的应用提供帮助,为技术的优化和推广提供参考。     

柴胡舒肝散治疗常见病毒性肝炎的疗效及安全性

为了系统评价柴胡疏肝散治疗常见病毒性肝炎的有效性和安全性,本研究机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of Science、中国生物医学文献数据库、知网、万方、维普等中、英文数据库,检索时限均从建库至2017年11月。文献筛选、资料提取和偏倚风险由2位评价员独立完成,之后采用RevMan 5.2软件进行Meta分析。共纳入19个研究,病毒性肝炎患者1 502例(均为乙型病毒性肝炎患者),其中柴胡疏肝散结合西药治疗763例为治疗组,单独用西药治疗739例为对照组,病人年龄为17～71岁。Meta分析结果表明:柴胡疏肝散结合西药治疗病毒性肝炎的总有效率(RD=0.14, 95%CI (0.09, 0.18), p0.000 01),优于单独常规西药治疗组,差异均有统计学意义;病毒学指标HBV-DNA、肝功能指标ALT、AST、TBIL等治疗后均显著改善;治疗后不良反应发生率(RR=0.42, 95%CI (-0.29, 0.60), p0.000 01)明显低于单独常规西药治疗组。本研究表明柴胡疏肝散配合西药可提高病毒性肝炎治疗的疗效,降低不良反应,具有一定的临床推广价值。     

荔波连蕊茶GA20氧化酶基因的克隆及表达分析

根据植物GA20ox基因编码区的保守序列设计引物,以山茶属荔波连蕊茶幼嫩茎段为材料,提取总RNA,进行RT-PCR。采用RACE技术扩增获得1 567 bp的GA20氧化酶基因全长cDNA序列,命名为ClGA20ox2(GenBank登录号KF823787)。序列分析表明,ClGA20ox2开放阅读框(ORF)为1 146 bp,编码382个氨基酸,5'非编码区115 bp,3'非编码区303 bp。预测的蛋白质分子量为43.56 kD,等电点为7.02,所推导的蛋白氨基酸序列与夹竹桃和杨树GA20ox蛋白的同源性分别为73%和72%。ClGA20ox2与其它植物GA20ox蛋白比较,构建系统进化树,结果显示山茶GA20ox蛋白与夹竹桃和杨树的GA20ox蛋白的亲缘关系最为密切。实时定量PCR结果显示,该基因在荔波连蕊茶的根、茎、叶和种子中均有表达,其表达模式却不同:ClGA20ox2基因在二年生茎段中的表达丰度最高,在顶端分生组织中表达丰度最低,在嫩叶和根中表达丰度较高,成熟叶片和种子表达丰度较低。     

对贵州省县级医院医疗帮扶需求的初步调查分析

目的 调查县级医院医疗帮扶需求现状,为县级医院对口帮扶政策制定提供基础依据。方法 以贵州省县级医院决策者为调查对象,按照研究主题设计调查表,实施调查,获取数据进行分类整理、分析。结果 （1）目前帮扶模式对医疗技术及管理有一定帮助（75.73%和63.43%）,帮助很大（16.02%和15.28%）,对医疗技术无帮助（8.25%）,医院管理能力无帮助（21.29%）。（2）目前最受欢迎的帮扶为医疗技术（74.89%）、人才培养（83.12%）及管理（61.04%）。（3）人才培养以选择住院医师或主治医生到帮扶医院进修学习（57.14%）,攻读本科学历（45.95%）及在职硕士（39.19%）为主。结论 当前医疗帮扶对县级医院医疗技术及管理具有一定的帮扶效果,但尚有待改进。     

干旱胁迫对鹿角杜鹃种子萌发和幼苗生理特性的影响

为探明鹿角杜鹃种子萌发和幼苗生长期的耐旱性,以鹿角杜鹃干种子和90d苗龄幼苗为材料,采用聚乙二醇(PEG-6000)模拟不同程度的干旱胁迫,研究干旱胁迫对其种子萌发、早期幼苗生长及幼苗的细胞膜透性、MDA含量、有机渗透调节物质和抗氧化酶活性的影响,并对种子萌发率、早期幼苗生长量与PEG胁迫浓度间进行了回归分析。结果表明:(1)5%~25%PEG胁迫范围内,随着干旱胁迫程度的增加,鹿角杜鹃种子的发芽启动时间推迟,发芽持续时间延长,发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和幼苗生长量显著降低;重度干旱胁迫(25%PEG)下,鹿角杜鹃种子完全未萌发。(2)发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数以及幼苗生长量的变化均与干旱胁迫程度呈极显著负相关关系,回归分析求得鹿角杜鹃种子萌发的半致死PEG干旱胁迫浓度为15.68%、半致矮PEG干旱胁迫浓度为15.37%。(3)随着PEG胁迫浓度的增加,鹿角杜鹃幼苗叶片SOD活性呈先升后降的趋势,但各胁迫处理仍显著高于CK(0%PEG);细胞膜透性、MDA、脯氨酸、可溶性糖含量、POD和CAT活性则在中度(15%~20%PEG)和重度胁迫下显著升高,与干旱胁迫程度呈极显著正相关关系。研究表明,干旱胁迫显著抑制了鹿角杜鹃种子萌发和早期幼苗生长,使其细胞膜受到损伤,同时鹿角杜鹃可通过体内渗透调节物质和抗氧化酶活性的增加来适应干旱环境,使得自身受抑制、损伤程度降到最低。     

抗GD2 抗体疗法用于高危神经母细胞瘤治疗的研究进展

高危神经母细胞瘤是幼儿及青少年中高发型恶性疾病,为胚胎性肿瘤,其表面高度表达神经节苷脂GD2,故GD2 成为此类恶疾的治疗靶标。在过去几十年中,抗GD2 抗体疗法用于神经母细胞瘤的治疗研究取得了巨大进展,其安全性和有效性得到了充分验证。简介GD2 的生物合成、结构与功能,综述用于神经母细胞瘤的抗GD2 抗体疗法及其有效性的提高策略。     

贵州省县级医院决策者的管理培训现状及需求调查

目的 为制订县级医院决策者培训计划提供依据,对贵州省县级医院决策者的管理培训现状及需求进行调查。方法 以贵州省县级医院决策者为调查对象,按照研究主题设计调查表,实施调查,获取数据进行分类整理、分析。结果 （1）医院决策者以中青年为主,分布于40～50岁;大学本科、副高及中级职称为主;（2）岗位前所学专业主要为临床医疗,专业管理人员少;从事管理5～15年占总体的59.31%;65.24%为兼职管理人员。（3）接受3个月以内的培训（65.80%）,3个月以上培训（9.52%）,未接受过培训（24.67%）;大部分人员接受过管理知识培训（21.21%～64.50%）,就培训内容而言,仅有接受医疗法律法规的决策者超过50%,绝大部分调查培训内容均未超过50%。（4）最需要的培训知识为战略管理（49.78%）、经营管理（53.25%）、人力资源管理（51.56%）、医院信息系统管理（45.89%）、领导科学（51.52%）。结论 县级医院决策者其培养时间及培养内容不足,医院决策者管理能力尚需加强。