大田生长的林生山黧豆体内游离氨基酸含量

林生山黧豆（Lathyrussylvestris）是一种耐干旱抗贫瘠的多年生草本植物，含有丰富的游离氨基酸，特别是含有一些非蛋白质游离氨基酸，如2，4-二氨基丁酸，γ-氨基丁酸和高丝氨酸。国外文献报道的均是各种逆境条件下生长的林生山黧豆，本文则是大田生长的林生山黧豆，种子从美国引进。数年的栽培试验，表明它能适应我国北方气候。但其体内游离氨基酸的组成特点如何，尚不清楚。为此我们采用本实验室建立的聚酰胺薄膜层析荧光定量法，结合氨基酸自动分析仪，测定了其体内的游离特殊非蛋白质氨基酸和常规氨基酸。样品采自中国农业大学科学园…     

核受体及其转录活化机制研究的新突破

核受体是一类配体依赖的转录因子,它们之间有相似的结构,在进化为来源于同一前体,它们和基础转录因子有直接的联系,与配体结合后,作用于其目标基因的特定应答元件上,从而活化特定基因的转录,核受体介导的转录活化需要有辅活化子和辅阻遏子的参与,这些辅活化子和辅助遏子是有效的转录所必需的,它们能和核受体特异结合,并在核受体和基础转录因子之间发挥中介作用,目前发现普遍存在并在转录过程中具有重要作用的辅活化子有Ｃ     

林生山黧豆谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分性质的研究

以林生山黧豆为材料,利用硫酸铵分段盐析,丙酮沉淀,ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ离子交换柱层析,ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ３００凝胶过滤柱层析及ＦＰＬ－ＭｏｎｏＱ柱层析技术,以聚酰胺薄膜层析荧光定量法为酶活力检测手段,分离纯化了谷氨酰羧酶,达到电泳银染纯,纯化后的林生山黧豆谷氨酸脱羧酶活力达３７５．０９Ｕ．ｍｇ＾－１,纯化保数３８．２倍,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定,其亚基分子量为７０ｋＤ,经工ＰＡＧＥ确定     

林生山黧豆中2,4—二氨基丁酸合成代谢的体外酶学研究

用~3H-天门冬氨酸为底物,林生山黧豆(Lathyrus sylvestris L.)叶片匀浆上清液为粗酶液,进行体外反应。结果表明,天门冬氨酸的放射性掺入到2,4-二氨基丁酸,加入谷氨酸则能抑制这种掺入。将上述粗酶液透析,加入可能的辅助因子,天门冬氨酸的放射性也掺入到2,4-二氨基丁酸。研究证实在体外天门冬氨酸可以作为2,4-二基丁酸合成的底物,在林生山黧豆体内存在催化天门冬氨酸转变为2,4-二氨基丁酸的合成酶(系)。以2,4-二氨基丁酸和γ-氨基丁酸为底物,用氨基酸自动分析仪测定产物含量,结果表明,2,4-二氨基丁酸和γ-氨基丁酸不互相转变。     

孤儿受体TR3与人CNTF受体基因中顺式元件作用机制的研究

应用两对人工合成的寡核苷酸引物,分别通过ＰＣＲ扩增,得到了ＣＮＴＦＲα－Ｉ５ＮＢＲＥ序列两侧的两个扩增片段,将其和在ＥｃｏＲⅤ位点切开的ｐＴ７ｂｌｕｅ一起定向连接,得到了插入在ｐＴ７ｂｌｕｅ的ＥｃｏＲⅤ位点的缺失了ＮＢＲＥ序列的ＣＮＴＦＲα－Ｉ５,然后再将其切下,插入到具有ＳＶ４０起动子的ＣＡＴ基因表达载体的ＢｇｌⅡ位点,构建了ＣＡＴ报道基因．细胞转染和ＣＡＴ实验表明,缺失ＮＢＲＥ后,ＣＮＴＦＲα－Ｉ５仍具有增强子功能,ＴＲ３通过该增强子对ＣＮＴＦＲα的表达具有诱导作用,说明这种诱导作用并不是单一通过ＮＢＲＥ序列进行的．     

纤维素酶分子生物学研究进展及趋向

纤维素酶分子生物学研究进展及趋向吴显荣,穆小民（北京农业大学生物学院北京１０００９４）自从１９０６年从蜗牛消化液中发现纤维素酶以来,人们在纤维素的生物转化方面进行了大量的研究,但由于纤维素底物的高度复杂性等原因,纤维素的生化转化与利用与实际应用一直有相当的距离。八十年代以来,由于分子生物学的发展及生物工程技术的兴起,纤维素酶的应用又出现了新的前景。     

林生山黧豆谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分性质的研究

以林生山黧豆为材料,利用硫酸按分段盐析,丙酮沉淀,DEAE-SepharoseFF离子交换柱层析,SephacrylS300凝胶过滤柱层析及FPLC-MonoQ柱层析技术,以聚酰胺薄膜层析荧光定量法为酶活力检测手段,分离纯化了谷氨酸脱羧酶,达到电泳银染纯．纯化后的林生山黧豆谷氨酸脱羧酶活力达375．09U·mp-1,纯化倍数38．2倍,经SDS-PAGE测定,其亚基分子量为70kD,经梯度PAGE确定,天然分子量为140kD,表明该酶是由两个亚基组成的二聚体．酶学研究表明,纯化的林生山黧豆谷氨酸脱羧酶的最适pH值为5．4,对谷氨酸的Km值为1．62×10-3mol·L-1,酶的最适温度为40℃,酶特异性地使谷氨酸脱羧,不能使天门冬氨酸等其它氨基酸脱羧．     

核受体及其转录活化机制研究的新突破——辅活化子和辅阻遏子

核受体是一类配体依赖的转录因子,它们之间有相似的结构,在进化上来源于同一前体,它们和基础转录因子有直接的联系,与配体结合后,作用于其目标基因的特定应答元件上,从而活化特定基因的转录.核受体介导的转录活化需要有辅活化子(coactivator)和辅阻遏子(corepressor)的参与,这些辅活化子和辅阻遏子是有效的转录所必需的. 它们能和核受体特异结合,并在核受体和基础转录因子之间发挥中介作用. 目前发现普遍存在并在转录过程中具有重要作用的辅活化子有CBP/P300和SRC-1等,辅阻遏子有SMRT等.     

高等植物体内4－氨基丁酸的代谢及生理作用

４－氨基丁酸（４－ＡＢ,γ－氨基丁酸或ＧＡＢＡ）是一种独特的非蛋白质氨基酸,存在于细菌、低等和高等植物、脊椎动物和一些非脊椎动物。１９４９年,Ｓｔｅｗａｒｄ首先在马铃薯块茎中发现了天然的４－氨基丁酸,５０年代初,人们发现４－ＡＢ以相当量存在于哺乳动物大脑后,进行了大量的研究,对４－ＡＢ在脊椎动物大脑中的代谢和生理作用等各个方面有了相当的了解,但对高等植物体内的４－ＡＢ则知之甚少。近几年来,高等植物体内４－ＡＢ的研究又出现了许多新的进展,本文在此作一综述。