双重实时荧光PCR法检测食品和饲料中的鸡源性成分

根据鸡线粒体DNA细胞色素b基因序列和内参照基因PUC18质粒基因序列设计特异性引物和以不同荧光素标记的TaqMan探针。通过对反应条件的优化筛选,建立能同时扩增鸡源性成分和内参照基因成分的双重实时荧光PCR检测方法。设置内参照反应是为了监控反应体系中是否含有PCR反应的抑制物,避免出现假阴性结果。分别以鸡、鸭、鹅、火鸡、牛、羊、猪、鱼、兔、驴、鹿、狗、马、鸽子、大豆、玉米、小麦、大米、马铃薯及番茄的线粒体DNA作为模板进行特异性试验,结果表明该方法仅能特异性扩增鸡源性成分,而对其它物种未见有效扩增。通过灵敏度测试,该方法检出限达0.01%。所制定的方法特异性高,灵敏度好,可以作为食品和饲料中鸡源性成分的高效检测方法。     

玉米叶绿体表达载体的构建及AsRED基因原核表达

从玉米幼嫩叶片中提取玉米叶绿体基因DNA,通过PCR克隆出叶绿体同源重组片段trnA和trnI、叶绿体特异性启动子Prrn以及终止子psbA.构建玉米叶绿体表达载体pBAIRTARED,含有一个人工操纵子,其中,筛选标记基因aadA和红色荧光蛋白报告基因AsRED处于Prrn启动子和psbA终止子控制.将构建的载体转化大肠杆菌BL21（DE3）,观测到重组细胞呈现红色,表明构建的载体可以用于玉米叶绿体转化以及表达报告基因.     

头颈部恶性肿瘤患者放疗后吞咽困难的危险因素分析及吞咽功能训练的临床应用价值

摘要 目的：分析头颈部恶性肿瘤（HNC）患者放疗后吞咽困难的危险因素,并观察吞咽功能训练的临床应用效果。方法：选择2020年4月~2022年5月期间在华中科技大学同济医学院附属同济医院接受放疗的HNC患者150例。采用自制调查量表获取患者的一般资料,采用单因素和多因素Logistic分析HNC患者放疗后吞咽困难的危险因素,并观察吞咽功能训练的临床应用效果。结果：本研究中150例HNC患者,放疗后出现吞咽困难的有93例,吞咽困难发生率为62.00%。根据放疗后是否出现吞咽困难将患者分为无吞咽困难组（n=57）和吞咽困难组（n=93）。单因素分析显示,HNC患者放疗后吞咽困难与文化程度、婚姻状况、高血压、糖尿病、高脂血症、居住地、体质量指数无关（P>0.05）,而与年龄、性别、吸烟史、饮酒史、肿瘤分期、肿瘤位置、累积放疗剂量有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析,结果显示：年龄偏大、男性、吸烟史、饮酒史、肿瘤分期为III期、肿瘤位置为颈部肿瘤、累积放疗剂量偏高是HNC患者放疗后吞咽困难的危险因素（P<0.05）。HNC患者干预1个月后、干预2个月后安德森吞咽困难量表（MDADI）评分较干预前下降,功能性经口摄食量表（FOIS）评分较干预前升高（P<0.05）。结论：HNC患者放疗后吞咽困难的发生率较高,年龄、性别、吸烟史、饮酒史、肿瘤分期、肿瘤位置、累积放疗剂量等均是其影响因素。HNC患者放疗期间给予吞咽功能训练,可有效改善患者的吞咽状况。     

中医药疗效在医生工作环境和病人满意间的中介作用 ——基于双因素理论视角

目的 从双因素理论的视角,以疗效为中介变量研究工作环境对病人满意度的影响。方法 通过对250名基层中医院医生的问卷调查和访谈,证明了医生感知“中医药服务疗效”在工作环境和医生感知病人满意间的中介作用。结果 中介效应占两者间总效应的21.1%,而医生感知“工作环境”满意度和感知“中医药服务疗效”满意度均较低。结论 工作环境通过疗效对病人满意度产生影响,要提高基层中医药服务的疗效,提高病人满意度,可通过提高医生的工作环境满意度实现。     

利用染色体区段混合BAC探针鉴定食管癌细胞中的染色体畸变

染色体畸变是恶性肿瘤细胞的重要遗传学特征,文章旨在应用BAC DNA克隆鉴定食管癌细胞中的染色体臂和染色体区段的畸变。针对染色体各区段选取5~10个1 Mb BAC DNA,分别混合制备成特定染色体区段的BAC DNA混合克隆,然后将染色体臂上覆盖所有区段的上述混合克隆进一步混合制备成特定染色体臂BAC DNA混合克隆。利用简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(Degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)标记染色体臂探针,利用切口平移法(Nick translation)标记染色体区段探针,并对食管癌细胞中期染色体进行荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)分析。正常人外周血淋巴细胞中期染色体FISH结果显示,上述方法标记的探针具有较高的特异性。进一步利用染色体臂混合探针,确定了多个食管癌细胞中的染色体重排所涉及的特定染色体臂;利用染色体区段混合探针,鉴定出KYSE140的t(1q;7q)衍生染色体中1q上的断点范围位于1q32-q41。文章成功建立了1 Mb BAC DNA混合克隆探针标记技术,并鉴定出多个食管癌细胞中的染色体臂和染色体区段畸变,不仅为利用M-FISH技术鉴定肿瘤细胞中的染色体畸变提供了更为准确的方法,而且还可能进一步将该法推广应用于恶性血液病的核型分析以及产前诊断。