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1.
应用聚合酶链反应改造蛙鱼生长激素cDNA   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了在大肠杆菌中表达天然序列的娃鱼生长激素基因,本研究应用聚合酶链反应扩增方法改造娃 鱼生长激素cDNA,成功地扩增出编码蛙鱼生长激素成熟肤的序列,并在该序列的5端和3端分别引 人EcoRI和BamHI的识别序列,使之便于进入载体,获得亚克隆。结果表明:应用聚合酶链反应扩 增及分子克隆方法改造蛙鱼生长激素cDNA较传统的DNA重组方法简便,效率高。文中对聚合酶链 反应扩增中非预期突变进行了讨论。  相似文献   
2.
金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药的分子机制   总被引:2,自引:0,他引:2  
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院内和社区感染的重要现菌,所致感染治疗困难,因此成为各国学者关注与研究的热点。本文就近几年国内外在MRSA耐药分子机制的研究中取得的成果,如mecA基因以及其他与MRSA对甲西林抗性表达相关基因的定位,结构及功能等作一介绍。  相似文献   
3.
白鹇血液某些生理生化成分分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文对白鹇指名亚种血液中血清总蛋白、血清白蛋白、血清总胆固醇(Chol)、血清甘油三酯(TG)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)、血清肌酐(Cr)、血红蛋白(Hb)、红细胞总数、白细胞总数、白细胞分类计数进行了测定。积累了一些基础数据。  相似文献   
4.
小西葫芦黄花叶病毒外壳蛋白抗体制备   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据已报道的小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)序列设计特异引物,扩增ZYMV的全长外壳蛋白(CP)基因,插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌B121(DE3)plysS中诱导表达。通过12%SDS—PAGE和5%~20%梯度SDS—PAGE二次制备电泳纯化诱导产物,免疫小鼠,获得经过Western blot分析为特异的抗CP血清。硫酸铵沉淀法与ProteinA—Red Sepharose亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1:4800的一抗,对西瓜和甜瓜田间样品的间接ELISA检测表明,ZYMV在田间普遍发生,研究制备的IgG可用于ZYMV检测。  相似文献   
5.
鲑鱼生长激素基因分泌型表达质粒的构建   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
生长激素(GH)是动物垂体前叶分泌的一种多肽类激素.应用分子重组及PCR等技术,构建了一种鲑鱼生长激素基因分泌型表达质粒pOsGH153,使编码鲑鱼生长激素成熟肽的序列克隆在大肠杆菌分泌型表达载体PIN-Ⅲ-ompA内,直接位于编码大肠杆菌外膜蛋白A信号肽序列的下游,在Lpp-Lac杂合启动子控制下,经IPTG诱导,分子量约23 000的鲑鱼生长激素在大肠杆菌中获得高效表达,该产物具有天然鲑鱼生长激素的免疫活性,直接分泌到细胞周质,而信号肽被自动剪除.  相似文献   
6.
大豆花叶病毒CP基因原核表达与抗血清制备   总被引:2,自引:1,他引:1  
根据已报道的大豆花叶病毒(SMV)序列设计引物,扩增SMV的外壳蛋白(CP)基因,序列同源性分析结果表明,与目前已报道的SMV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为85.0%~96.8%,相应推测的氨基酸序列同源性为87.9%~98.9%.将CP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)Plys S中诱导表达.通过12%SDS-PAGE和5%~20%梯度SDS-PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清,Western blot分析对CP具有高度特异性.硫酸铵沉淀法与Protein A-Red Sepharose 亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1∶ 3 800的一抗,可用于田间SMV病样检测.  相似文献   
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